山融3號小麥BC-,2-代群體耐鹽主效QTL相關(guān)分子標(biāo)記的篩選定位.pdf

1、由于自然環(huán)境的不斷惡化，耕地土壤鹽漬化已成為制約世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的主要的環(huán)境因子。小麥?zhǔn)鞘澜缟现匾募Z食作物之一，對鹽漬環(huán)境十分敏感，鹽脅迫往往造成其產(chǎn)量和品質(zhì)的大幅下降。如何運(yùn)用生物技術(shù)研究小麥的耐鹽機(jī)理、定位克隆耐鹽基因、培育耐鹽新品種、提高小麥產(chǎn)量是育種學(xué)家和生物技術(shù)工作者共同面臨的重大課題。本課題組首創(chuàng)的小麥（Triticum aestivum L.2n=42）不對稱體細(xì)胞雜交技術(shù)，將耐鹽禾草（長穗偃麥草Agropyron elon

2、gatum2n=70）的染色體小片段或/和DNA整合入普通小麥濟(jì)南177(JN177)基因組，選育出耐鹽漸滲小麥新品種山融3號(SR3)。前期對該品種的初步研究表明，其耐鹽性由5A染色體上的主效基因控制。
　　 本研究以濟(jì)南177作為輪回親本，對山融三號與濟(jì)南177的回交一代(BC1)進(jìn)行回交，以所獲BC2代作為研究材料。利用5A染色體上存在的新的分子標(biāo)記，對山融三號小麥的耐鹽相關(guān)QTL進(jìn)一步深入分析，初步確定了耐鹽主效基因的性

3、質(zhì)和位置。實(shí)驗(yàn)中，利用SSR/EST-SSR等分子標(biāo)記技術(shù)，設(shè)計(jì)211對標(biāo)記引物（小麥5A染色體上59對SSR引物、26對EST-SSR引物和65對STS引物；小麥其余染色體上30對標(biāo)記引物以及31對與小麥5A具有高同源性的水稻第9染色體STS引物）對BC2群體的雙親進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其中46對引物的PCR擴(kuò)增呈微衛(wèi)星DNA多態(tài)性，多態(tài)性指數(shù)為25.4％。用這46對引物繼續(xù)對以BC2群體構(gòu)建的耐鹽池和鹽敏感池進(jìn)行PCR擴(kuò)增，篩選出5對位于

4、5A染色體上的微衛(wèi)星DNA擴(kuò)增呈多態(tài)性的SSR標(biāo)記引物(Xwmc713-5A，Xgwm304，Xgwm666，Xcfa2141，XBarc144)，在BC2群體中個(gè)體擴(kuò)增后顯示與耐鹽基因連鎖。利用MapMaker3.0及MapDraw V2.1軟件推算出耐鹽主效基因位于5AL染色體上，與最近的XBarc144標(biāo)記的相對距離為12.7cM，可利用這5個(gè)分子標(biāo)記在缺失圖Chinese_Spring_Deletion_5A以及連鎖圖Wheat