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文檔簡介
1、<p> 前列腺素合成酶在腎及胃分布的探討</p><p> 作者:沈瑞蓮 張國鏡 金潔 王偉 邢安鳳 周秀艷</p><p> 【摘要】 前列腺素合成酶是人體內重要的酶系,對其的研究目的旨在為臨床醫(yī)學、病理學提供形態(tài)學參考依據。 </p><p> 【關鍵詞】 前列腺素合成酶; 分布; 平均灰度值</p><p>
2、前列腺素合成酶是與膜結合的多酶體系,催化、氧化、環(huán)化、還原作用一系列反應,前列腺素是由花生四烯酸衍生而成的。在組織切片上顯示前列腺素合成酶的原理是該酶可催化底物花生四烯酸氧化成前列腺素,反應中所形成的活潑氧原子又使3.3-二氨基聯苯膠形成棕色沉淀,以間接證實前列腺素合成酶的存在。</p><p><b> 1 材料與方法</b></p><p> 正常Wistar
3、大鼠和昆明小鼠,體重分別為200g和20g左右,取其胃和腎,冰凍切片。用Janszen顯示法。花生四烯酸0.4mg,DAB 2mg, KCN 0.65mg,0.2MTrisHCI緩沖液(pH8.0 ) 10ml,35℃孵育3小時,孵育后標本用蒸餾水洗,分別用甘油明膠和中性樹膠封片。經LeicaQ50 OMC圖像分析儀進行平均灰度值( Mean.Crey.MG)的測定,用于進行酶組織化學反應強度分析。</p><p&
4、gt;<b> 2 結果</b></p><p> 前列腺素合成酶反應產物為棕色顆粒,在大、小鼠的反應部位基本相同。在小鼠腎臟,腎皮質深層靠近髓質陽性反應產物,主要以近端小管曲部為主。在小鼠胃黏膜的近黏膜下層有陽性反應產物。在大鼠腎和胃也獲相同結果。經圖像分析儀測量每種組織切片5張,共測50視野。每種組織在不同封固條件下各測定一張蓋玻片下無切片,但有封固劑的區(qū)域為空白對照。按腎、胃的順序
5、,而以明膠在前,樹膠在后的排序測量,所獲平均灰度值如下:小鼠222.91±9236.33±18.14209.42±7.50227.96±13.36大鼠217.42±6.0622701±11231.11±12.87225.83±10.15</p><p><b> 3 討論</b></p><
6、p> 通過對大、小鼠腎臟前列腺素合成酶組織化學反應的觀察發(fā)現,陽性反應的部位基本相同,均位于皮質深層三分之二區(qū)域,而皮質淺層三分之一處基本無反應。說明在大、小鼠,前列腺合成酶在作用于花生四烯酸,合成前列腺素并無明顯差別。腎正常血流量的維持及調節(jié)有賴于前列腺素的產生。由于前列腺素有明顯的舒張血管的作用,在腎內使腎血管擴張增加腎血流量及腎血流的重新分布起到降壓和調節(jié)動脈壓的作用。在某些病理情況下,缺乏前列腺素一方面可導致血管收縮和高
7、血壓,另一方面腎內前列腺素缺乏可引起腎皮質血流減少,于是引起腎素釋放使腎素血管緊張素系流被激活,促使血壓升高而腎皮質本身具有較強的合成前列腺素的功能[1],也從側面加以印證。</p><p> 在胃黏膜近黏膜下層的較大區(qū)域中,前列腺素合成酶的組織化學反應較強,說明前列腺素的功能較強,這與抑制胃蒙古膜壁細胞分泌胃酸過多維持胃液整體平衡有密切關系,在胃液分泌的負反饋調節(jié)機制中起重要作用。至于抑制機理可能是作用于腺甘
8、酸環(huán)化酶系統(tǒng),阻止:cAMP的生成,而cAMP被認為是促進胃酸分泌的媒介。</p><p> 從分布部位看,前列腺素合成酶的酶組織化學反應強度的差異并不十分明顯。平均灰度值差異很小。另外,從前列腺素的分布來看,酶組織化學反應的結果與生物化學理論并不完全相符。由本實驗觀察可知,前列腺素合成酶的陽性反應部位是在腎皮質深層的區(qū)域,主要在近曲小管;而生物化學理論所描述的是在腎髓質,主要在腎集合小管細胞、腎動脈內皮細胞、
9、及腎間質細胞內合成。由于腎血流量大、血流速度快且腎皮質的血流量要遠遠大于腎髓質的特點,前列腺素合成酶活性較強的部位是在腎皮質,但其并不一定是前列腺素發(fā)揮作用較強的區(qū)域。很有可能此酶在腎皮質合成以后隨血液循環(huán)被運輸到腎髓質而發(fā)揮其生物學活性。前列腺素除對腎臟和胃的作用外,對水電解平衡、血小板、生殖系統(tǒng)[2]、心血管系統(tǒng)以及神經系統(tǒng)均有調節(jié)作用。本研究的目的僅在于為上述功能的調節(jié)及該沒在臨床的應用提供形態(tài)學參考依據。</p>
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