環(huán)境因子對萱藻(Scytosiphon lomentaria)絲狀體擴(kuò)增及孢子囊發(fā)育的影響.pdf

1、萱藻Scytosiphon lomentaria(Lyngbye.)Link隸屬于褐藻門(Phaeophyta)，在我國北起遼東半島，南至廣東省海陵島之間海域廣泛分布，生長盛期4-6月，常叢生于中、低潮帶巖石上或石沼中。萱藻藻體黃褐至深褐色，管狀，膜質(zhì)。自然條件下可生長至高20-50厘米，直徑2-5毫米，人工栽培條件下，其長度可達(dá)60-110厘米。萱藻具有異形世代交替的生活史，宏觀的管狀藻體為配子體階段，微觀的絲狀體、墊狀體和類墊狀體為

2、孢子體階段。絲狀體、墊狀體和類墊狀體之間可以相互轉(zhuǎn)化。
　　 萱藻口感鮮美，具有極高的食用價值。同時，萱藻在抗氧化性、抗腫瘤、抗病毒、抗細(xì)菌方面均表現(xiàn)出良好的活性，已證實(shí)可從中提取多種藥物成分。除此之外，作為一種大型海藻，萱藻還具備抗污、去除氮磷等生態(tài)修復(fù)的作用，是一種極具開發(fā)潛力的新型養(yǎng)殖海藻。
　　 快速獲得足量絲狀體和高效誘導(dǎo)孢子囊的產(chǎn)生是萱藻實(shí)現(xiàn)人工養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)。因此，本論文在掌握萱藻生活史及其各個發(fā)育階段

3、生物學(xué)特征的基礎(chǔ)上，以本實(shí)驗(yàn)室保存的萱藻種質(zhì)為材料，重點(diǎn)研究了環(huán)境因子對萱藻絲狀體快速擴(kuò)增及孢子囊誘導(dǎo)、發(fā)育的影響，為萱藻絲狀體育苗提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。同時，本文還對萱藻孢子體的抗生素敏感性進(jìn)行了初步的研究，為萱藻種質(zhì)的無菌化培養(yǎng)提供理論數(shù)據(jù)。
　　 本文的研究結(jié)果為：
　　 1、在實(shí)驗(yàn)設(shè)定的條件下，最適宜萱藻絲狀體快速擴(kuò)增的溫度條件為22℃，光照強(qiáng)度條件為72.0μmol/(m2·s)，光周期條件為14L：10D。

4、
　　 2、鹽度條件對萱藻絲狀體的擴(kuò)增具有重要影響，鹽度過低(16)絲狀體細(xì)胞會出現(xiàn)色素體溶解、死亡現(xiàn)象，過高(48)亦不利于絲狀體的快速擴(kuò)增。實(shí)驗(yàn)條件下，32是最適于絲狀體快速擴(kuò)增的鹽度條件。
　　 3、在實(shí)驗(yàn)所設(shè)定的濃度(NH4+：18.0-54.0mg/L，NO3-：30.0-90.0mg/L)下，不同濃度的銨態(tài)氮(NH4Cl)和硝態(tài)氮(NaNO3)均可被萱藻絲狀體利用作為氮源，并促進(jìn)萱藻絲狀體的生長。相同摩爾濃度

5、下硝態(tài)氮更有利于萱藻絲狀體的快速擴(kuò)增，60.0mg/L的NaNO3為最適的氮濃度；萱藻絲狀體可以利用有機(jī)磷(甘油磷酸鈉)和無機(jī)磷(NaH2PO4)作為磷源，在相同摩爾濃度下，無機(jī)磷源更有利于萱藻絲狀體的快速擴(kuò)增，3.0mg/L的NaH2PO4為最適磷濃度。
　　 4、三種金屬元素(Mn、Mg、Fe)對萱藻絲狀體的生長具有促進(jìn)作用，其中鐵元素對萱藻絲狀體生長尤為重要。當(dāng)鐵不足時，絲狀體細(xì)胞會呈現(xiàn)胞質(zhì)縊縮、色素體變綠等發(fā)育不良狀態(tài)。

6、三種金屬元素促進(jìn)絲狀體擴(kuò)增的最佳濃度分別為：0.4、2.0、0.4mg/L。
　　 5、低濃度(1.00x10-6mg/L)的維生素(Vb1、Vb2、Vb12)對萱藻絲狀體的生長具有促進(jìn)作用，高濃度(1.00mg/L)的Vb1和Vb12對萱藻絲狀體的擴(kuò)增速率沒有抑制作用，而高濃度(1.00mg/L)的Vb2會降低萱藻絲狀體的擴(kuò)增速率。三種維生素促進(jìn)萱藻絲狀體擴(kuò)增的最佳濃度均為：1.00x10-6mg/L。
　　 6、不同

7、培養(yǎng)液條件下，萱藻絲狀體的擴(kuò)增速率不同。在實(shí)驗(yàn)所設(shè)條件下，ES培養(yǎng)液最適于萱藻絲狀體的快速擴(kuò)增。
　　 7、環(huán)境因子在萱藻絲狀體單室孢子囊形成和發(fā)育的不同階段對其影響效果不同。光照強(qiáng)度過大[>57.6μmol/(m2·s)]不利于萱藻絲狀體孢子囊的形成，14.4-28.8μmol/(m2·s)最適于絲狀體單室孢子囊的形成，而28.8-43.2μmol/(m2·s)是孢子囊的發(fā)育成熟的最佳光照強(qiáng)度；20℃是誘導(dǎo)萱藻絲狀體孢子囊形成

8、的最佳溫度，而17℃是促進(jìn)孢子囊發(fā)育成熟的最適溫度；10L：14D是最適于萱藻絲狀體孢子囊形成的光周期條件，短光周期梯度(6L：18D，8L：16D和10L：14D)對萱藻孢子囊的發(fā)育具有促進(jìn)作用，而中、長光照條件(12L：12D、14L：10D)不利于孢子囊的發(fā)育。
　　 8、萱藻孢子放散對溫度具有較廣的適應(yīng)范圍，在7.0-27.0℃條件下均可放散，但不同溫度條件下放散量及放散速度不同。12.0℃是最有利于孢子放散的溫度；光照

9、強(qiáng)度是影響孢子放散的重要因素之一，72.0μmol/(m2·s)最適于萱藻孢子的大量、快速放散；絲狀體生物量直接決定了萱藻孢子的放散量，但二者并不呈線性關(guān)系，0.8mg/mL是最有利于孢子放散且最高效的絲狀體生物量。
　　 9、抗生素對萱藻孢子體的生長發(fā)育具有重要影響。低濃度的青霉素(<100μg/mL)和鏈霉素(100<μg/mL)對萱藻孢子體的生長具有一定的促進(jìn)作用，而高濃度的青霉素(>100μg/mL)和鏈霉素(>100μ