褐斑病對(duì)苜蓿品質(zhì)的影響及苜蓿假盤(pán)菌(Pseudopeziza medicaginis)子囊孢子萌發(fā)特性研究.pdf

1、苜蓿（Medicago sativa Linn.）作為優(yōu)質(zhì)牧草，在世界各國(guó)的畜牧業(yè)發(fā)展中占據(jù)著非常重要的地位。近年來(lái)，隨著種植面積的增加，苜蓿病害日趨嚴(yán)重，已成為制約苜蓿產(chǎn)量與品質(zhì)的主要因素。由苜蓿假盤(pán)菌（Pseudopeziza medicaginis）引起的苜蓿褐斑病是苜蓿生產(chǎn)中的主要病害之一，在各大苜蓿種植區(qū)均有不同程度的發(fā)生，研究苜蓿褐斑病對(duì)生產(chǎn)中選擇適宜方法控制其為害具有重要意義。本文對(duì)寧夏六盤(pán)山地區(qū)紫花苜蓿褐斑病的發(fā)生和危害

2、情況，褐斑病對(duì)苜蓿營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響，子囊孢子萌發(fā)特性和分泌細(xì)胞壁降解酶活性進(jìn)行研究。研究結(jié)果如下:
　　(1)田間調(diào)查結(jié)果表明:寧夏固原市、涇源縣、隆德縣苜蓿褐斑病發(fā)病情況嚴(yán)重，病情指數(shù)分別為68.61、30.01、75.81。
　　(2)不同發(fā)病級(jí)別的菖蓿褐斑病葉片、莖稈中營(yíng)養(yǎng)成分含量試驗(yàn)結(jié)果表明:隨著感病程度的增加，苜蓿粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪、K含量下降;中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、粗灰分、Ca、總酚

3、、單寧含量增加;P含量未改變。其中，與健康葉片相比，Ⅳ級(jí)感病葉片中CP含量下降了15.64％，NDF、ADF增加了39.75％、71.10％，說(shuō)明感病后的苜蓿營(yíng)養(yǎng)成分嚴(yán)重受損。感病葉片中葉綠素a、葉綠素b分別下降了18.02％、70.25％，類胡蘿卜素增加了42.31％，說(shuō)明苜蓿假盤(pán)菌可破壞葉片的光合機(jī)構(gòu)，擾亂正常的光捕獲能力，是引致葉片衰老和脫落的因素之一。
　　(3)P.medicaginis子囊孢子碳氮源利用試驗(yàn)結(jié)果表明:供

4、試的5種碳源中，對(duì)碳源的利用率由強(qiáng)到弱依次為葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、甘油和乳糖，子囊孢子的萌發(fā)時(shí)間集中在4-9h。供試的9種氮源中，有機(jī)態(tài)氮源，酵母粉、牛肉膏、蛋白胨的子囊孢子萌發(fā)時(shí)間集中在5-13h，72h萌發(fā)率達(dá)到100％。無(wú)機(jī)氮源草酰乙酸和硫酸銨萌發(fā)率與對(duì)照瓊脂基本一致;氨基乙酸和硝酸鈉7-9h即可見(jiàn)有子囊孢子萌發(fā)，72h萌發(fā)率達(dá)到100％。
　　(4)Pmedicaginis子囊孢子萌發(fā)Ca2+/CaM信號(hào)系統(tǒng)試驗(yàn)結(jié)果表明:

5、外源CaCl2濃度在0.1-100mmol/L子囊孢子均可萌發(fā)，加入Ca2+螯合劑EGTA萌發(fā)受到抑制，同時(shí)加入EGTA(10mmol/L)和CaCl2(1mmol/L)仍然不能解除抑制作用，但是在EGTA(10mmol/L)中加入Ca2+載體A23187(10μmol/L)，子囊孢子萌發(fā)率顯著增大。PLC抑制劑Neomycin濃度在0.01-10mmol/L，子囊孢子不能萌發(fā)。Ca2+通道調(diào)節(jié)劑Nicardipine濃度為1mmol/

6、L時(shí)，子囊孢子被溶解，其他濃度下均不萌發(fā)。CAM拮抗劑Chloropromazine濃度為0.01mmol/L,子囊孢子沒(méi)有萌發(fā)且周?chē)行鯛钗锃h(huán)繞，濃度大于0.1mmol/L萌發(fā)亦受到抑制。
　　(5)Pmedicaginis分泌細(xì)胞壁降解酶及感病葉片細(xì)胞膜透性測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果表明:子囊孢子以分泌果膠甲基半乳糖醛酸酶(PMG)為主要細(xì)胞壁降解酶，隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)PMG、羧甲基纖維素酶活性增強(qiáng)，β-葡糖苷酶活性較小且變化不明顯。子囊孢子