中草藥混菌發(fā)酵生產(chǎn)新型生物制劑的研究.pdf

1、本試驗(yàn)采取黑曲霉和植物乳桿先有氧、后厭氧發(fā)酵中草藥的形式,研究混菌異步發(fā)酵最佳培養(yǎng)基及最佳發(fā)酵工藝條件;采用高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)中草藥發(fā)酵前后成分的變化;通過(guò)愛拔益加(AA)肉雞試驗(yàn),比較對(duì)照組肉雞的生產(chǎn)性能、免疫器官指數(shù)、血液指標(biāo),探討混菌發(fā)酵中草藥的價(jià)值。其研究結(jié)果如下:
　　試驗(yàn)一:混菌發(fā)酵中草藥最佳培養(yǎng)基和最佳發(fā)酵工藝的研究
　　本試驗(yàn)先采用黑曲霉有氧發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶、果膠酶破解植物細(xì)胞壁,再用植物乳桿菌厭氧

2、發(fā)酵酶解。通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),以纖維素酶活力、果膠酶活力為指標(biāo),探索中草藥混菌發(fā)酵的最佳生產(chǎn)工藝。試驗(yàn)結(jié)果表明:最佳培養(yǎng)基中,中草藥濃度為10％,葡萄糖添加量為1%,酵母膏添加量為0.2%,K2HPO4添加量為0.1%,有氧發(fā)酵溫度為30℃,厭氧發(fā)酵溫度為37℃,好氧厭氧發(fā)酵時(shí)間比為2:1,總發(fā)酵時(shí)間為96小時(shí),接種量比例為2%:2%,pH為5。在此條件下,纖維素酶活達(dá)到1412.3U/mL,果膠酶活達(dá)到1287.5U/mL。中草

3、藥經(jīng)混菌發(fā)酵后,粗蛋白提高了31.19%,粗脂肪提高了59.11%,P含量提高了85.71%。中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、木質(zhì)素分別降解了24.21%、12.58%、17.56%。
　　試驗(yàn)二:采用HPLC法檢測(cè)中草藥發(fā)酵前后成分的變化
　　本試驗(yàn)通過(guò)HPLC法建立指紋圖譜,比較發(fā)酵前后中草藥前后成分的變化,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵后大部分物質(zhì)的含量都有不同程度的提高;大多數(shù)物質(zhì)峰面積由發(fā)酵前達(dá)到發(fā)酵后的1~4倍左右,其中有兩處時(shí)間點(diǎn)的物質(zhì)

4、峰面積分別是發(fā)酵前的10.03倍和41.85倍(1.66310.03倍、8.11041.85倍);同時(shí)復(fù)方制劑經(jīng)過(guò)發(fā)酵后產(chǎn)生了多處新的特征吸收峰,說(shuō)明中草藥經(jīng)發(fā)酵后,藥液某些成分發(fā)生了變化,發(fā)酵后產(chǎn)生了新的活性物質(zhì)。
　　試驗(yàn)三:混菌發(fā)酵中草藥替代抗生素試驗(yàn)對(duì)AA肉雞的影響
　　本試驗(yàn)研究了添加混菌發(fā)酵中草藥與添加抗生素日糧對(duì)42日齡肉仔雞生產(chǎn)、免疫性能的影響。研究表明,混菌發(fā)酵組與添加抗生素相比,日增重差異顯著(P<0.0

5、5),混菌發(fā)酵組提高了11.92%。日采食量差異顯著(P<0.05),混菌發(fā)酵組提高了4.38%,料肉比差異不顯著(P>0.05);混菌發(fā)酵組和抗生素比較,脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)差異不顯著(P>0.05),但有提高的趨勢(shì)。在胸腺指數(shù)方面,混菌發(fā)酵組和添加抗生素組相比,差異顯著(P<0.05);在總抗氧化能力上(T-AOC),混菌發(fā)酵組比抗生素組提高17.49%,差異顯著(P<0.05)。總超氧化物歧化酶(T-SOD)比抗生素組提高了3.2