桑椹成熟期營養(yǎng)成分變化及差異蛋白質(zhì)組的研究.pdf

1、桑椹營養(yǎng)成分豐富，具有很好的保健效果和藥用價值，作為天然無公害的綠色食品，已被列入既是食品又是藥品的保健品行列。桑椹資源綜合利用具有良好的發(fā)展前景，但是桑椹成熟期短，上市集中，且不耐貯存。因此，桑椹保鮮是桑椹產(chǎn)業(yè)中的重要研究課題，對桑椹生理及成熟期分子調(diào)控機(jī)理的研究具有理論與實踐的意義。 本文以果桑品種大10和SG01為材料，對其不同成熟階段(綠熟期、半熟期、全熟期)營養(yǎng)成分的變化進(jìn)行了比較分析，應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)，

2、對桑椹成熟過程中差異表達(dá)蛋白質(zhì)組分析，克隆了成熟特異性表達(dá)基因細(xì)胞壁轉(zhuǎn)化酶的部分序列。本研究取得了以下結(jié)果： 1.桑椹的蛋白質(zhì)、粗灰分和Ca2+含量隨著成熟過程而減少，可溶性糖、糖酸比、維生素C含量增加，2個供試果桑材料表現(xiàn)相似的傾向，其中，可溶性糖、糖酸比、維生素C含量都是大10品種高于SG01。 2.分別以桑葉和桑椹為材料，對蛋白質(zhì)雙向電泳的樣品制備技術(shù)進(jìn)行了探討，在蛋白質(zhì)樣品的色澤，溶解性及電泳分離效果等多個評價指

3、標(biāo)方面，改良的蛋白質(zhì)提取法更適于桑葉與桑椹蛋白質(zhì)雙向電泳的技術(shù)要求。 3.以SDS-PAGE和2DE兩種方法比較不同組織蛋白質(zhì)的差異表達(dá)，結(jié)果得到表達(dá)量相差2倍以上的蛋白組分有22個，桑椹綠熟期特異性斑點2個，全熟期特異表達(dá)3個。對桑椹不同成熟階段的差異蛋白質(zhì)進(jìn)行了雙向電泳分析，得到表達(dá)量差異2倍以上的蛋白點32個，其中在全熟期表達(dá)量最大的蛋白點6個。 4.選擇表達(dá)量差異在2倍以上的8個凝膠斑點進(jìn)行膠內(nèi)酶切質(zhì)譜分析，通過