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文檔簡介
1、煙草是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物,煙草根結(jié)線蟲病是世界煙草生產(chǎn)上的重要病害之一。在我國大部分煙草種植區(qū)均有發(fā)生,且多個(gè)省市危害嚴(yán)重。由于生產(chǎn)上所種植的煙草品種抗性程度不夠,防治上仍然以化學(xué)藥劑為主要防控手段。長期使用化學(xué)農(nóng)藥易導(dǎo)致根結(jié)線蟲抗(耐)藥性劇增、環(huán)境污染和煙葉重金屬含量超標(biāo)等影響防治效果、生態(tài)平衡和人類健康等問題出現(xiàn)。為此,本文針對煙草根結(jié)線蟲病生防控制設(shè)計(jì)試驗(yàn),試驗(yàn)內(nèi)容主要是進(jìn)行了拮抗菌株室內(nèi)篩選及防效測定,拮抗菌溫室盆栽驗(yàn)證以及拮
2、抗菌株對煙草根結(jié)線蟲發(fā)育進(jìn)程影響的初步研究。通過本研究,從生防菌的初步篩選、拮抗菌對卵和二齡幼蟲的拮抗試驗(yàn)、溫室盆栽控病試驗(yàn)、同時(shí)調(diào)查統(tǒng)計(jì)根結(jié)線蟲在植株根內(nèi)發(fā)育進(jìn)程受拮抗菌的影響等幾個(gè)方面,建立一套較為系統(tǒng)、可行的根結(jié)線蟲生防菌篩選體系。本研究的主要結(jié)果如下:
1、煙草根結(jié)線蟲拮抗活性菌株初步篩選
分別利用實(shí)驗(yàn)室保存經(jīng)前人研究對煙草病害具有良好控病作用的的45株菌株進(jìn)行煙草根結(jié)線蟲二齡幼蟲抑殺測定,得到有拮抗活性的菌
3、株13株,占待測菌總數(shù)的28.9%;其中真菌3株,細(xì)菌8株,放線菌2株。其中處理二齡幼蟲校正死亡率超過70%的菌株共3株,分別為哈茨木霉菌YZL229(77.0%),熒光假單胞桿菌P-72-10(74.0%),枯草芽孢桿菌Itb162(72.3%),占待測菌總數(shù)的11.1%。
2、拮抗菌YZL229,P-72-10,Itb162對煙草根結(jié)線蟲卵和二齡幼蟲的拮抗試驗(yàn)
通過初步篩選,分別選取對煙草根結(jié)線蟲具有良好拮抗作用
4、的哈茨木霉菌YZL229,熒光假單胞桿菌P-72-10,枯草芽孢桿菌Itb162對煙草根結(jié)線蟲卵和二齡幼蟲進(jìn)行抑殺測定。結(jié)果表明,三種菌株不同濃度發(fā)酵液上清液均對煙草根結(jié)線蟲的卵表現(xiàn)出較好的抑制作用。處理120h后,菌株發(fā)酵液對煙草根結(jié)線蟲卵孵化的抑制作用從大到小為:YZL229>P-72-10> Itb162。其中菌株YZL229發(fā)酵液原液抑制孵化作用最明顯,菌株Itb162發(fā)酵液5倍稀釋液抑制作用最小,但均與對照呈顯著性差異。同樣,
5、三種菌株不同濃度發(fā)酵液上清液均對煙草根結(jié)線蟲的二齡幼蟲表現(xiàn)出較好的抑制作用。處理48h后,菌株發(fā)酵液對根結(jié)線蟲二齡幼蟲的抑殺作用從大到小為: YZL229>P-72-10> Itb162。其中菌株YZL229發(fā)酵液原液在處理48h后對二齡幼蟲的致死率高達(dá)94.7%,而菌株Itb162發(fā)酵液5倍稀釋液對二齡幼蟲的致死率為62.3%,均與對照具顯著性差異。另外,還,針對菌株YZL229對煙草根結(jié)線蟲卵作了寄生測定。結(jié)果表明,處理7d后菌株Y
6、ZL229對根結(jié)線蟲卵的寄生率高達(dá)73.4%,同時(shí)還發(fā)現(xiàn)該菌株對發(fā)育較成熟的卵具有較高的寄生率,而對未發(fā)育成熟的卵寄生率較低。
3、拮抗菌株對煙草根結(jié)線蟲病的溫室盆栽試驗(yàn)
選擇拮抗試驗(yàn)中對煙草根結(jié)線蟲具有良好拮抗作用的哈茨木霉菌YZL229,熒光假單胞桿菌P-72-10,枯草芽孢桿菌Itb162對煙草根結(jié)線蟲進(jìn)行溫室盆栽試驗(yàn)。用灌根法先接種拮抗菌菌懸液14d后,再接種二齡幼蟲,接種二齡幼蟲60d后對煙草植株進(jìn)行調(diào)查。
7、試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株YZL229,P-72-10和Itb162均對煙草根結(jié)線蟲侵染有不同程度的抑制作用。三種拮抗菌均能不同程度的減小寄主植株的GI(egg index)和EMI(egg mass index),均能不同程度的增加寄主植株的生長指數(shù)(葉片長度,根長,葉面積),均能增加寄主植株的干重和鮮重,同時(shí)也能減少寄主根圍線蟲密度和減少煙草根結(jié)線蟲的產(chǎn)卵量。其中菌株YZL229具有三者之中最好的拮抗效果,其效果由大到小依次為:YZL229
8、>P-72-10> Itb162,三者均與發(fā)病對照具有顯著性的差異,均展現(xiàn)了良好的生防潛力。
4、熒光假單胞桿菌P-72-10對煙草根結(jié)線蟲發(fā)育進(jìn)程的影響
選擇經(jīng)前人研究能定殖于煙草根表且對煙草根結(jié)線蟲具有良好拮抗作用的熒光假單胞桿菌P-72-10菌株進(jìn)行盆栽試驗(yàn),分別于接種二齡幼蟲后二齡幼蟲侵染和不同時(shí)間段不同齡期對線蟲發(fā)育進(jìn)程進(jìn)行調(diào)查,以直觀的說明拮抗菌株P(guān)-72-10對煙草根結(jié)線蟲發(fā)育進(jìn)程的影響,從而驗(yàn)證其生防
9、潛力。試驗(yàn)結(jié)果表明,接種二齡幼蟲后第2d,4d,6d,8d,10d二齡幼蟲侵染煙草植株數(shù)量逐漸增大,但經(jīng)菌株P(guān)-72-10處理過的侵染率除第4d外均顯著低于對照。接種后第10d對侵染的煙株進(jìn)行移栽,在接種二齡幼蟲第14d,21d,28d和35d對煙草植株根系內(nèi)線蟲進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)。結(jié)果表明,經(jīng)菌株P(guān)-72-10處理的煙株根系內(nèi)的根結(jié)線蟲與對照相比其發(fā)育進(jìn)程受到了顯著的抑制和延緩,這表明拮抗菌P-72-10能在整個(gè)根結(jié)線蟲生活史時(shí)段中有效的抑
10、制根結(jié)線蟲的發(fā)育進(jìn)程和繁殖,具有良好的生防潛力。
5、建立一套較為系統(tǒng)、可行的煙草根結(jié)線蟲生防菌篩選技術(shù)體系
本研究利用初步篩選出的三株菌株從其對煙草根結(jié)線蟲卵和二齡幼蟲的抑制試驗(yàn)、溫室控病試驗(yàn),對侵染煙株不同發(fā)育進(jìn)程根結(jié)線蟲的影響三個(gè)不同角度充分驗(yàn)證了三種拮抗菌株對煙草根結(jié)線蟲的生防潛力,建立起一套較系統(tǒng)、可行的煙草根結(jié)線蟲生防菌篩選技術(shù)體系。在對煙草根結(jié)線蟲卵和二齡幼蟲的抑制試驗(yàn)中,針對可能對根結(jié)線蟲卵和二齡幼蟲
11、具有寄生能力的真菌菌株進(jìn)行了卵和二齡幼蟲的寄生測定,同時(shí)利用三株拮抗菌株不同濃度發(fā)酵液上清液分別對卵進(jìn)行孵化抑制試驗(yàn)和對二齡幼蟲進(jìn)行抑殺試驗(yàn),同時(shí)觀察統(tǒng)計(jì)二齡幼蟲在不同濃度發(fā)酵液上清液中的行為特征,充分驗(yàn)證三株拮抗菌株的抑制效果;在溫室盆栽控病試驗(yàn)中,利用三株菌株菌懸液對煙株進(jìn)行灌根處理,調(diào)查其根結(jié)指數(shù)(GI)和卵塊指數(shù)(EMI)及單位土壤中線蟲數(shù)量,并從煙株的生長指數(shù)等方面充分說明菌株的控病能力;在進(jìn)行三株菌株對侵染煙株后不同發(fā)育進(jìn)程
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