蘭屬中幾種蘭花雜交后代組培與核型研究.pdf

1、本試驗(yàn)是在泰安市泰山林業(yè)科學(xué)研究院從韓國引進(jìn)的大花蕙蘭（Cymbidium hvbridum）品種與泰山義祥蘭園栽培的國蘭優(yōu)良品種基礎(chǔ)上進(jìn)行的，研究工作主要有以下三個(gè)方面的內(nèi)容。一是對得到雜交組合的幼胚（未成熟的種子）進(jìn)行非共生萌發(fā)研究，從果實(shí)的不同發(fā)育時(shí)期、萌發(fā)的基本培養(yǎng)基方面入手，建立完整的非共生萌發(fā)技術(shù)體系；二是對雜種胚萌發(fā)形成的原球莖進(jìn)行組培快繁技術(shù)研究，從基本培養(yǎng)基、大量元素、蔗糖濃度、添加物等方面入手，篩選出后代原球莖增殖快

2、繁的最適培養(yǎng)基，為科研和生產(chǎn)實(shí)踐提供較為系統(tǒng)與合理的參考依據(jù)；三是通過核型分析對雜交后代進(jìn)行早期鑒定，明確雜交后代的遺傳背景，包括其倍性、染色體形態(tài)、核型參數(shù)等，為雜交育種時(shí)后代的選育提供參考與依據(jù)。
　　 主要的研究結(jié)果如下：
　　 1.以大花蕙蘭與國蘭雜種胚為外植體進(jìn)行初代培養(yǎng)，篩選出雜種胚非共生萌發(fā)的最佳采收時(shí)間及萌發(fā)最適基本培養(yǎng)基。胚齡以150天左右為最佳采收時(shí)間，萌發(fā)率最高；最適萌發(fā)培養(yǎng)基為B11+蔗糖20 g

3、/L+瓊脂8.0g/L+AC3.0g/L。
　　 2.以大花蕙蘭與國蘭雜交原球莖為外植體進(jìn)行繼代培養(yǎng)，篩選出原球莖增殖分化的最適培養(yǎng)基。不同雜交組合后代在不同培養(yǎng)基中的增殖倍數(shù)各不相同，但繼代培養(yǎng)的最適基本培養(yǎng)基均為KC+蔗糖20 g/L+瓊脂8.0g/L+香蕉泥150g/L。外源激素對增殖分化有促進(jìn)作用，其中生長素類以NAA為效果最佳，細(xì)胞分裂素類以6-BA為最佳；NAA濃度為0.2mg/L時(shí)雜交原球莖增殖效果為最佳，6-BA

4、和NAA的濃度配比為4～5:1時(shí)，分化效果最好：1.0mg/L的GA對繼代培養(yǎng)有促進(jìn)作用；綜上所述，繼代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為KC+NAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+GA1.0mg/L+蔗糖20 g/L+瓊脂8.0g/L+香蕉泥150g/L。
　　 3.在雜交蘭生根培養(yǎng)中，大量元素與蔗糖濃度對生根影響極其顯著。最適無機(jī)鹽濃度為1/4MS，60天后組培苗生根率達(dá)到100％，平均生根數(shù)最多為2.4條，平均根長最長為1.79c

5、m；蔗糖濃度為30g/L，根生長狀況最佳，平均生根數(shù)最多為3.43條，平均根長最長為1.34 cm。雜交蘭最適生根培養(yǎng)基為1/4MS+NAA0.2mg/L+瓊脂8.0 g/L+蔗糖30 g/L+香蕉泥150g/L。
　　 4.雜交蘭組培苗移栽時(shí)對根部進(jìn)行斷根處理，可刺激新根的生成，提高幼苗成活率，移栽至水苔基質(zhì)中100天后成活率達(dá)81％，平均苗高為11.89cm，與未進(jìn)行斷根處理的相比，苗的長勢也明顯見好。
　　 5.通

6、過對4種大花蕙蘭父本與雜交后代進(jìn)行核型分析，對雜交后代進(jìn)行早期鑒定。結(jié)果表明：大花型父本‘綠寶石’與‘天使’體細(xì)胞染色體數(shù)均為2n=4x=80，為四倍體，其分別與二倍體春劍和蕙蘭雜交后代體細(xì)胞染色體數(shù)均為2n=3x=60，可鑒定其雜交后代為真雜種；小花型父本‘夏綠’與‘圣蕾芬’體細(xì)胞染色體數(shù)2n=2x=40，為二倍體，其與春劍雜交后代經(jīng)核型分析，在染色體相對長度、平均臂比、及不對稱系數(shù)等指標(biāo)上，后代都趨于父母本的中間值，雜交后代染色體形

7、態(tài)具有雙親的特點(diǎn)，也可鑒定為真雜種。
　　 6.雜交組合后代實(shí)際核型與理論核型均存在一定的差異，表明人工雜交打破了親本染色體組間長期進(jìn)化形成的共適體系。所有親本及后代染色體的結(jié)構(gòu)主要由中部和近中部著絲點(diǎn)染色體組成，最長染色體與最短染色體的比值在2.01～4.2之間，臂比大于2的染色體所占的比率也都不高，均不超過35％。按Stebbins（1971）的核型分類標(biāo)準(zhǔn)，所有親本及雜交后代除‘夏綠’為2C型，其余均為2B型。由此可見，蘭