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1、本文進(jìn)行了不結(jié)球白菜蕪菁花葉病毒電鏡診斷,研究了病毒侵染對不結(jié)球白菜光合熒光特性及抗氧化酶的影響,克隆出蕪菁花葉病毒的CP和HC-Pro基因,主要內(nèi)容如下:
1.以感病品種矮腳黃和抗病品種短白梗為試驗材料,研究了蕪菁花葉病毒侵染對不結(jié)球白菜光合及熒光特性的影響。結(jié)果表明:感染蕪菁花葉病毒后,矮腳黃葉綠素的含量,凈光合速率(Pn),氣孔導(dǎo)度(Gs),胞間CO2濃度(Ci),蒸騰速率(Tr)均顯著降低,而短白梗各個參數(shù)下降幅度
2、均不顯著;兩個品種的PSⅡ有效光化學(xué)量子產(chǎn)量(Fv’/Tm’)和最大光化學(xué)量子產(chǎn)量(Fv/Fm)降低幅度較小,矮腳黃的PSⅡ?qū)嶋H光化學(xué)量子產(chǎn)量(ФPSⅡ),表觀光合電子傳遞速率(ETR)和光化學(xué)猝滅系數(shù)(qP)均顯著降低,而短白梗則降幅較小,非光化學(xué)猝滅系數(shù)(qN)矮腳黃顯著升高,而短白梗升高不明顯。
2.以感病品種矮腳黃和抗病品種短白梗為試驗材料,研究了蕪菁花葉病毒侵染對不結(jié)球白菜抗氧化酶的影響。結(jié)果表明:短白梗POD活
3、性迅速提高,而且一直處于較高的水平,矮腳黃POD活性變化緩慢,變幅也較小,水平較低;接種后短白梗CAT活性持續(xù)升高,第九天出現(xiàn)峰值后有所降低,但酶活仍高于矮腳黃,矮腳黃變化緩慢,變幅較小,第七天達(dá)到峰值后一直處于較低水平;短白梗與矮腳黃相比,SOD酶活升高較快,上升幅度較大,且始終處于一個較高的水平,變化率在第三天和第九天出現(xiàn)峰值。
3.從南京江浦農(nóng)場不結(jié)球白菜上獲得蕪菁花葉病毒分離物NCB,利用RT-PCR法對病毒CP和
4、HC-Pro基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,分別得到1 kb和1.4 kb的兩條帶,與預(yù)期的TuMV CP和HC-Pro基因大小吻合。擴(kuò)增產(chǎn)物克隆后測序,CP基因序列長度為864個核苷酸,編碼288個氨基酸;HC-Pro基因序列長度為1374個核苷酸,編碼458個氨基酸。NCB的CP和HC-Pro基因與已報道的TuMV其他分離物的核苷酸序列同源性分別為90%-99%和80%-95%,氨基酸同源性分別為96%-100%,94%-99%。從CP基因核苷
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