浙貝母基因組dna提取方法比較研究【開(kāi)題報(bào)告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開(kāi)題報(bào)告</b></p><p><b>　　生物工程</b></p><p>　　浙貝母基因組DNA提取方法比較研究</p><p>　　1. 課題研究意義及國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀</p><p>　　浙貝母屬百合科，種類繁多。主要分布在江蘇南部、浙江北部和湖南，也分

2、布于日本。浙貝母是用于止咳化痰的常用中藥，是著名的“浙八味”之一，其藥用成分為生物堿。我國(guó)貝母的出口中浙貝母占了全國(guó)貝母總產(chǎn)量的40%。同時(shí)浙貝母是貝母族中個(gè)體最大的一種，浙貝母主要分布在樟溪河及鄞江流域兩岸，主產(chǎn)區(qū)是章水、鄞江兩鎮(zhèn)，龍觀鄉(xiāng)也有少量種植。本文分別以取自寧波市鄞州區(qū)章水的狹葉浙貝、寬葉浙貝、多籽浙貝葉片為材料，分別采用CTAB法、SDS法、高鹽低pH法和試劑盒法來(lái)提取浙貝母基因組DNA，并通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳、紫外分光光度計(jì)

3、、PCR擴(kuò)增對(duì)所提取的DNA樣品進(jìn)行純度和濃度及完整性檢測(cè)，以尋找適合浙貝母基因組DNA的提取方法。近三年來(lái)，浙貝母的價(jià)格一直回落，使得農(nóng)戶種植的信心也跟著回落，而貝母的藥用價(jià)值并不改色，因此研究浙貝母的生物學(xué)活性，鑒定浙貝母品種優(yōu)良性顯得十分重要。目前國(guó)內(nèi)已有采用分子生物學(xué)方法鑒定藥用貝母的報(bào)道，同時(shí)也有對(duì)貝母進(jìn)行同工酶的研究等等。但對(duì)浙貝母基因組DNA的提取方法研究報(bào)道較少。</p><p>　　本文在浙江寧

4、波鄞州區(qū)章水、龍觀、鄞江、金華磐安等地分別采集了相同品種的浙貝母鱗莖，在鄞州區(qū)的章水采集了狹葉浙貝、寬葉浙貝、多籽浙貝三個(gè)不同品種的浙貝母的地上莖及葉。本文主要就是研究采用多種方法從中藥材浙貝母的新鮮葉片中提取基因組DNA，并且對(duì)這些方法進(jìn)行比較，從中找出更為適宜的簡(jiǎn)單易操作的方法。這個(gè)研究也為開(kāi)展浙貝母種質(zhì)資源的遺傳多樣性分析以及對(duì)其分子鑒定奠定了基礎(chǔ)。</p><p>　　2. 課題研究的主要內(nèi)容、預(yù)期目標(biāo)和

5、研究方案</p><p><b>　　主要內(nèi)容：</b></p><p>　?。?）以不同浙貝母品種葉片為材料，進(jìn)行材料預(yù)處理（烘干或液氮研磨）；</p><p>　?。?）采用SDS法、酸堿法、改良CTAB法和試劑盒提取法進(jìn)行浙貝母基因組DNA提取方法比較研究；</p><p>　?。?）進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析，確定最佳提

6、取方法</p><p>　?。?）對(duì)浙貝母基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。</p><p>　　預(yù)期目標(biāo)：（1）浙貝母不同品種、產(chǎn)地間理化性質(zhì)的比較，為不同品種的鑒定提供輔助依據(jù)。</p><p><b>　?。?）撰寫(xiě)畢業(yè)論文</b></p><p><b>　　研究方案：</b></p>

7、<p><b>　　3. 課題進(jìn)度計(jì)劃</b></p><p>　　2010年5月至2010年6月：收集相關(guān)資料，熟悉實(shí)驗(yàn)步驟；</p><p>　　2010年7月至2010年8月：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備，開(kāi)展預(yù)備實(shí)驗(yàn)；</p><p>　　2010年9月至2011年1月：比較不同提取方法對(duì)浙貝母基因組DNA質(zhì)量的影響；</p>

8、<p>　　2011年2月至2011年3月：完成實(shí)驗(yàn)資料的整理、論文撰寫(xiě)與修改。</p><p><b>　　4. 參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 趙樹(shù)進(jìn),陳念,嚴(yán)萍.中藥材生物多樣性及核酸分析技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社,2009:61-88.</p><p>　　[2] 高文遠(yuǎn),李志亮,肖培根.浙貝母基因組DNA的提

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