氯嘧磺隆對兩種土壤中細菌和氨氧化細菌amoA基因多樣性的影響.pdf

1、分析氯嘧磺隆對兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中細菌多樣性和氨氧化細菌amoA基因多樣性的影響，為評價氯嘧磺隆對土壤微生物的影響提供基礎數據。采用直接法從土壤中提取總DNA，用細菌通用引物擴增16S rDNA V3區(qū)，綜合可培養(yǎng)的方法和DGGE技術分析土壤樣品中的微生物群落結構;用特異引物以總DNA為模板擴增氨氧化細菌amoA基因，構建amoA基因文庫，通過RFLP技術分析土壤樣品中的氨氧化細菌群落特征。
　　 采用平板計數

2、方法，研究了氯嘧磺隆對兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中可培養(yǎng)微生物數量的影響，發(fā)現氯嘧磺隆的處理濃度為11μg·kg-1 soil（正常用量，N）、110μg·kg-1 soil（過量用量，E）時，7d后兩種供試土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中好氧細菌的數量有最大的抑制作用，而且濃度越高抑制越明顯;氯嘧磺隆的處理濃度為11μg·kg-1 soil（正常用量，N）、110μg·kg-1 soil（過量用量，E），14d后對供試土壤

3、（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中好氧細菌的數量有顯著的抑制作用，而且高濃度比低濃度的抑制明顯。但隨著培養(yǎng)時間的延長，抑制作用開始減弱，并于28 d后處理與對照水平接近。
　　 采用PCR-DGGE方法，研究了氯嘧磺隆對兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中細菌多樣性的影響。發(fā)現實驗的整個處理周期中氯嘧磺隆處理濃度為11μg·kg-1 soil（正常用量，N）、110μg·kg-1 soil（過量用量，E）時，供試紅壤的細菌多樣性顯

4、著降低，而對供試黃棕壤中細菌多樣性影響較小。同時，7d、14d氨嘧磺隆的兩種處理濃度對供試的兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）的細菌群落有一定的影響，隨著培養(yǎng)時間的延長氯嘧磺隆的兩種處理濃度對供試黃棕壤中細菌群落影響減小，這與平板計數結果一致。
　　 采用PCR-RFLP方法，構建26個amoA基因文庫，共挑取1014個陽性克隆子。分析發(fā)現氯嘧磺隆的加入對供試土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）的氨氧化細菌amoA基因多樣性產生了

5、一定的影響。供試的兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）中氯嘧磺隆處理濃度為11μg·kg-1 soil(正常用量,N)110μg·kg-1soil（過量用量，E）時的最優(yōu)勢OTU變化較大，且與對照的最優(yōu)勢OUT相比變化明顯。兩種土壤（黃棕壤，NJ;紅壤，YT）的處理與各自的對照amoA基因均勻度指數、香農指數和辛普森指數變化較小。黃棕壤處理amoA基因豐富度指數在早期比對照低，并與42 d恢復到對照水平;整個培養(yǎng)周期中紅壤處理amoA基