21135.兩種木食性白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌多樣性的比較研究

1、⑨碩士學(xué)位論文MASTER’STHESISComparativestudiesonthediversityofintestinalsymbioticbacteriabetweentwodifferentwood—feedingtermitesATheSiSSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementF0rtheMSDegreeinBiologyByChenJuanPostgraduatePr

2、ogramCollegeofLifeSciencesCentralChinaNormalUniversitySupervisor：YangHongAcademicTitle：AssociateProfessorSignatureMay2011⑧碩士學(xué)位論文MASTER’STHESIS摘要木食性白蟻?zhàn)鳛樽匀唤缒举|(zhì)纖維素的高效降解者，在能源日益缺乏的當(dāng)今世界受到了科學(xué)界的廣泛關(guān)注。木食性白蟻腸道中棲息著眾多的共生微生物，這些微生物與白蟻的共

3、生關(guān)系與共生機(jī)制長(zhǎng)期以來(lái)一直是人們非常感興趣的課題，對(duì)其共生關(guān)系的研究和探討對(duì)深入了解木食性白蟻降解纖維素的機(jī)制，開(kāi)發(fā)與利用有益的微生物資源于新型的生物質(zhì)能源產(chǎn)業(yè)具有積極的意義。本文分別以黑胸散白蟻(ReticulitermeschinensisSnyder)和象白蟻Nasutitermessp為對(duì)象研究了一種低等木食性白蟻和一種高等木食性白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌的多樣性，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了比較與分析，為進(jìn)一步探討共生細(xì)菌在不同類(lèi)群木食性白蟻腸道

4、中的作用與功能，闡明白蟻降解纖維素的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：1以象白蟻Nasutitermessp全腸DNA為模板，細(xì)菌16SrRNA基因的通用引物為引物擴(kuò)增并構(gòu)建了象白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌的16SrRNA基因文庫(kù)。從隨機(jī)挑取的419個(gè)克隆中得到73個(gè)細(xì)菌16SrRNA基因。對(duì)這些共生細(xì)菌16SrDNA的系統(tǒng)發(fā)育分析表明，象白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌主要有螺旋體(658％)、嗜纖維桿菌(165％)、擬桿菌(45％)這幾大類(lèi)，另外還包括一些

5、浮霉菌，厚壁菌以及一些不能確認(rèn)門(mén)類(lèi)的非培養(yǎng)細(xì)菌。2以黑胸散白蟻全腸DNA為模板，細(xì)菌16SrRNA基因的通用引物為引物擴(kuò)增并構(gòu)建了黑胸散白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌的16SrRNA基因文庫(kù)。從隨機(jī)挑取的602個(gè)克隆中得到150個(gè)細(xì)菌16SrRNA基因。對(duì)這些共生細(xì)菌16SrDNA的系統(tǒng)發(fā)育分析表明，黑胸散白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌主要類(lèi)群有螺旋體(423％)、白蟻菌群l(193％)、變形菌(106％)、厚壁菌(71％)和擬桿菌(68％)，此外，還包括一些

6、浮霉菌和放線細(xì)菌。3對(duì)黑胸散白蟻腸道內(nèi)的好氧及兼性厭氧菌進(jìn)行了MPN的測(cè)定，結(jié)果表明該白蟻腸道內(nèi)好氧與兼性厭氧細(xì)菌的數(shù)量是925105每條。‘4對(duì)兩個(gè)細(xì)菌16SrRNA基因文庫(kù)克隆的Rarefaction分析表明，從兩個(gè)文庫(kù)所選的克隆數(shù)都能夠較好地覆蓋細(xì)菌的多樣性。本研究的結(jié)果表明，象白蟻與黑胸散白蟻腸道內(nèi)共生細(xì)菌的多樣性與種群結(jié)構(gòu)有明顯的差異，推測(cè)這種差異與白蟻腸道內(nèi)鞭毛蟲(chóng)的有無(wú)、消化道生理?xiàng)l件以及白蟻的代謝需要等生物學(xué)特性相關(guān)。關(guān)鍵