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1、木食性低等白蟻腸道中有高密度的各種各樣的共生鞭毛蟲(chóng)、細(xì)菌和古菌,它們?cè)诎紫伕缓w維素的食物消化過(guò)程中承擔(dān)著重要的作用。本文應(yīng)用熒光顯微鏡和不依賴培養(yǎng)的分子生物學(xué)方法,對(duì)廣泛分布在我國(guó)長(zhǎng)江流域及以南地區(qū)的黑胸散白蟻(Reticulitermes chinensis Snyder)腸道中的共生古菌多樣性進(jìn)行了初步的研究,研究結(jié)果如下: 1.用NIKON熒光顯微鏡對(duì)黑胸散白蟻腸道共生古菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的原位顯微觀察,發(fā)現(xiàn)黑胸散白蟻腸道
2、有大量的能自發(fā)熒光的共生古菌黏附在囊形胃腸壁上皮,這些共生古菌大多數(shù)是短桿狀,少數(shù)是長(zhǎng)桿狀。 2.用不依賴培養(yǎng)的分子生物學(xué)方法對(duì)黑胸散白蟻腸道共生古菌進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育多樣性分析。用PCR直接從黑胸散白蟻腸道DNA中擴(kuò)增出古菌的SSU rRNA基因,擴(kuò)增產(chǎn)物純化后連接到pGEM-T easy載體上(Promega),轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a,構(gòu)建古菌的16S rRNA基因文庫(kù)。從文庫(kù)中隨機(jī)選擇含有正確插入序列的克隆,用限制性內(nèi)切酶Msp
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