日本弓背蟻共生放線菌的多樣性分析及抑菌活性研究.pdf

1、來源于微生物的活性物質長久以來作為前導化合物發(fā)揮顯著作用。然而，隨著半個多世紀以來人們對土壤和水體等一些趨同環(huán)境中環(huán)境微生物的大量篩選，導致我們獲得的化合物往往是已知的。因此，很多學者建議從新生境中獲得新菌種，發(fā)現新的活性物質。目前，國內外對昆蟲共生放線菌及其產生化合物的相關研究表明，生活在這些特殊環(huán)境中的微生物能夠合成多種新奇結構化合物，為發(fā)現新的微生物藥物提供可能。本論文旨在從純培養(yǎng)角度對日本弓背蟻體內及體表的放線菌進行多樣性分析，

2、以及抑菌活性初步篩選，以期挖掘更多的微生物新種以及具有生物活性的放線菌資源，為活性菌株次級代謝產物的后續(xù)研究打好基礎。
　　本研究選用6種不同分離培養(yǎng)基對日本弓背蟻不同部位的共生放線菌進行系統(tǒng)分離，分析不同培養(yǎng)基以及螞蟻不同部位的出菌率，對獲得放線菌進行抑菌活性篩選，同時測定部分稀有菌株及部分活性較好的鏈霉菌的16S rRNA基因序列，并進行系統(tǒng)發(fā)育分析，將菌株歸類到屬，分析螞蟻不同部位純培養(yǎng)放線菌的多樣性，取得的結果如下:

3、>　　(1)本文選用6種不同分離培養(yǎng)基，對日本弓背蟻不同部位（表皮、頭、胸和腹部）的共生放線菌進行系統(tǒng)分離，共得到124株可培養(yǎng)放線菌，去重復后得到116株。
　　(2)分析螞蟻不同部位分離出的放線菌數量后發(fā)現，頭部的出菌率最高，占67.2％，其次為表皮，胸部和腹部分離出的放線菌所占比例較小。
　　(3)對分離到的放線菌進行抑菌活性檢測，共篩選得到活性菌株19株。其中，有16株對5種以上病原真菌表現出抑制活性（較強或較弱）;

4、14株對5種以上病原真菌表現出較好的抑制活性（不包括弱活性）;10株對某種或某些病原真菌的抑菌率在50％以上。這些活性菌株主要分布在螞蟻頭部，其次分布在表皮部位。
　　(4)通過形態(tài)及部分菌株的16S rRNA基因分析后將這些菌株歸類到8個屬包括鏈霉菌屬（Streptomyces），原小單孢菌屬（Promicromonospora），小單孢菌屬（Micromonospora），野野村氏菌屬（Nonom uraea），疣孢菌屬（Ve

5、rrucosispora），棲植物菌屬（Phytohabitans），小雙孢菌屬（Microbispora）及諾卡氏菌屬（Nocardia）。其中，鏈霉菌屬為優(yōu)勢菌屬（占89.7％）。
　　(5)通過系統(tǒng)發(fā)育分析發(fā)現，鏈霉菌屬內不同種間形成不同分支，表明了日本弓背蟻內共生鏈霉菌多樣性較高。同時，隸屬于不同菌屬的稀有菌株之間也形成不同的分支，顯示出了日本弓背蟻共生放線菌具備多樣性。
　　(6)對菌株的16S rRNA基因序列進

6、行分析后發(fā)現3個潛在新種，經多相分類學鑒定確定菌株1H-HV4為諾卡氏菌屬的一個新種，命名為Nocardia camponoti;菌株1H-GS9為鏈霉菌屬的一個新種，命名為Streptomyces formicae;菌株1C-HV12為原小單孢菌屬的一個新種，命名為Promicromonospora alba。
　　從本文的內容中可以看出日本弓背蟻共生放線菌具有豐富的多樣性，同時表現出很好的抑菌活性，在發(fā)現新型生物活性物質方面具