分離篩選具有抑菌活性的海洋放線菌.pdf

1、目的:
　　 1從海洋環(huán)境中分離篩選具有抑菌活性的海洋放線菌，進(jìn)行生理生化和16S rDNA分析，從而鑒定篩選菌株的種屬;
　　 2初步探究影響篩選菌株發(fā)酵液抑菌活性的因素，優(yōu)化菌株的發(fā)酵條件。
　　 材料和方法:
　　 1以從青島沿海采集的海泥為樣本，進(jìn)行倍比梯度稀釋通過(guò)高氏一號(hào)培養(yǎng)平板（重鉻酸鉀濃度50μg/mL）分離放線菌菌落。以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等為指示病原菌，采用圓紙片法對(duì)各發(fā)酵液上清的抑

2、菌活性進(jìn)行初步篩查。
　　 2對(duì)所篩選具有抑菌活性的菌株形態(tài)學(xué)觀察，生理生化鑒定，16S rDNA分析，并制作系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)。
　　 3控制發(fā)酵溫度不變，研究發(fā)酵時(shí)間對(duì)發(fā)酵液上清抑菌活性的影響;控制發(fā)酵時(shí)間不變，研究發(fā)酵溫度對(duì)發(fā)酵液上清抑菌活性的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1在高氏一號(hào)固體培養(yǎng)基上分離得到海洋放線菌34株，放線菌F1發(fā)酵液上清對(duì)金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)抑制作用，而對(duì)大腸桿菌抑制作用較弱。

3、r>　　 2菌株F1革蘭氏染色為紫色，在多種培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好，生理生化鑒定與鏈霉菌屬相似，16S rDNA序列比對(duì)表明該菌株與Streptomyces tanashiensis NR043369相似度99％。
　　 3發(fā)酵時(shí)間小于96h時(shí)，菌株F1發(fā)酵液上清對(duì)金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈逐漸變大，發(fā)酵大于96h后，發(fā)酵液上清產(chǎn)生抑菌圈大小變化不明顯。發(fā)酵溫度對(duì)抑菌圈大小變化影響不明顯。
　　 結(jié)論:
　　 1菌