放線菌分離方法的研究.pdf

1、放線菌是一類與人類生活密切相關(guān)的微生物，其在工業(yè)上具有重大的利用價(jià)值，為人類做出了巨大的貢獻(xiàn)。目前分離出的放線菌僅占其總數(shù)的10％～20％，即傳統(tǒng)分離方法不能分離到近80％的新的放線菌。如何有效發(fā)掘并充分利用這些尚未為人類所知的放線菌資源是當(dāng)前土壤微生物學(xué)迫切需要解決的問(wèn)題。本試驗(yàn)研究了微波預(yù)處理、土壤粒徑及土壤懸液分散劑對(duì)放線菌分離效果的影響，得到以下結(jié)論： 1.高有機(jī)質(zhì)土樣經(jīng)過(guò)適度微波處理可顯著增加土壤放線菌總數(shù)、鏈霉菌數(shù)以

2、及小單孢菌數(shù)。處理3～15min，GA及HA培養(yǎng)基上放線菌總數(shù)分別較對(duì)照提高8.3％～92.6％及24.4％～108.5％：微波預(yù)處理土樣對(duì)可培養(yǎng)放線菌的種類有明顯影響，能有效提高小單孢菌等稀有放線菌的出菌率，并分離出鏈輪絲菌與原小單孢菌等新的稀有放線菌，處理3～24min，GA與HA培養(yǎng)基上新出現(xiàn)放線菌種類占放線菌總種類的比例為62.5％～85.7％與66.7％～83.3％。微波處理能增加拮抗性放線菌的數(shù)量，處理6、9和15min，拮

3、抗性放線菌株數(shù)所占比例較對(duì)照分別提高66.7％、66.7％和83.3％。 2.利用微波預(yù)處理風(fēng)干土樣時(shí)，隨照射劑量增加，放線菌總數(shù)、鏈霉菌數(shù)呈先增后減趨勢(shì)，小單孢菌數(shù)量較對(duì)照大幅度提高，其中處理3min時(shí)達(dá)到最大值，放線菌總數(shù)、鏈霉菌數(shù)及小單孢菌數(shù)分別較對(duì)照增加了71.3％、102.9％及212.5％。微波處理后新出現(xiàn)了多種不同的稀有放線菌；微波處理拮抗性放線菌的出菌率明顯高于對(duì)照，處理9min時(shí)拮抗性放線菌篩出率為81.8％，

4、新出現(xiàn)拮抗性放線放線菌仍以鏈霉菌屬為主。 3.微波處理新鮮土樣對(duì)土壤微生物數(shù)量有一定影響。隨著微波預(yù)處理土樣時(shí)間的增加，細(xì)菌數(shù)量逐漸減少；真菌數(shù)量的變化呈現(xiàn)出減少-增加-減少的趨勢(shì)，從真菌各屬的區(qū)系組成來(lái)看，曲霉對(duì)微波的耐受性最好，青霉對(duì)微波的耐受性最差。微波預(yù)處理新鮮土樣對(duì)放線菌總數(shù)、鏈霉菌數(shù)量增加的影響效果不明顯，GA培養(yǎng)基上僅在處理3min時(shí)放線菌總數(shù)較對(duì)照增加65.0％，HA培養(yǎng)基上僅在處理15min時(shí)較對(duì)照增加3.5％

5、。微波預(yù)處理新鮮土樣對(duì)小單孢菌屬出菌率影響較大：GA培養(yǎng)基上處理3min時(shí)小單孢菌屬數(shù)量較對(duì)照增加92.9％，HA培養(yǎng)基上處理9min時(shí)小單孢菌屬數(shù)量較對(duì)照增加280.0％。 4.不同粒級(jí)土壤中放線菌的種類和數(shù)量不同。土壤粒徑越小，放線菌數(shù)量越多，其中小單孢菌屬等稀有放線菌數(shù)量增加明顯；土壤有機(jī)質(zhì)含量對(duì)放線菌數(shù)量與土壤粒徑的關(guān)系影響不大，但培養(yǎng)基種類對(duì)放線菌數(shù)量、種類與土壤粒徑的關(guān)系有一定影響。在GA培養(yǎng)基上，呈現(xiàn)出隨著土壤粒徑

6、的減小，放線菌總數(shù)增加的趨勢(shì)，其中1號(hào)高有機(jī)質(zhì)草地土樣放線菌總數(shù)較對(duì)照增加45.1％；在HA培養(yǎng)基上，放線菌總數(shù)、鏈霉菌數(shù)及小單孢菌數(shù)因土樣的差異而不同，其中1號(hào)高有機(jī)質(zhì)草地土樣放線菌總數(shù)較對(duì)照增加44.0％；在黃豆粉培養(yǎng)基上，不同土樣隨著粒徑減小，放線菌數(shù)量的變化有較大的差異，但黃豆粉培養(yǎng)基上的小單孢菌屬數(shù)量占放線菌總數(shù)的比率最高。 5.以適宜濃度的CMC為分散劑時(shí)，可明顯增加放線菌的檢出量。CMC濃度為2.5g/L時(shí)，在大部分稀釋度