制藥廠(chǎng)設(shè)備清潔與清潔驗(yàn)證

1、1,內(nèi) 容 摘 要,GMP對(duì)設(shè)備清潔及驗(yàn)證的要求設(shè)備清潔的目的設(shè)備清潔工作現(xiàn)狀污染物的來(lái)源清潔作用機(jī)理清洗介質(zhì)的選擇清潔劑的選擇設(shè)備清潔方法清潔工作的發(fā)展趨勢(shì),2,內(nèi) 容 摘 要,設(shè)備清潔驗(yàn)證的時(shí)機(jī)清潔驗(yàn)證的檢測(cè)對(duì)象清潔驗(yàn)證產(chǎn)品與設(shè)備分組殘余物限度的確定分析方法的選擇取樣方法的選擇,3,GMP對(duì)設(shè)備清潔及驗(yàn)證的要求,第四十九條 藥品生產(chǎn)車(chē)間、工序、崗位均應(yīng)按生產(chǎn)和空氣潔凈度級(jí)別的要求制定廠(chǎng)房、設(shè)備、容器等清潔規(guī)

2、程，內(nèi)容應(yīng)包括：清潔方法、程序、間隔時(shí)間，使用的清潔劑或消毒劑，清潔工具的清潔方法和存放地點(diǎn)。,4,GMP對(duì)設(shè)備清潔及驗(yàn)證的要求,附錄一. 總則4. 藥品生產(chǎn)過(guò)程的驗(yàn)證內(nèi)容必須包括： (1)空氣凈化系統(tǒng) (2) 工藝用水系統(tǒng) (3) 生產(chǎn)工藝及其變更 (4) 設(shè)備清洗 (5) 主要原輔材料變更 無(wú)菌藥品生產(chǎn)過(guò)程的驗(yàn)證內(nèi)容還應(yīng)增加： (1) 滅菌設(shè)備 (2) 藥液濾過(guò)及灌封

3、(分裝)系統(tǒng),5,設(shè)備清潔的目的,設(shè)備清潔的目的是防止發(fā)生可能改變藥品質(zhì)量、使其安全性、均一性、濃度、純度達(dá)不到規(guī)定的要求的事故或污染。,6,符合GMP要求降低藥物交叉污染及微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)保證用藥安全延長(zhǎng)系統(tǒng)或設(shè)備的使用壽命提高企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益,清潔驗(yàn)證的必要性,7,設(shè)備清潔工作現(xiàn)狀,近年來(lái)，由于重大污染事故的發(fā)生，人們?cè)絹?lái)越重視廠(chǎng)房及設(shè)備的清潔工作。隨著分析技術(shù)的日益發(fā)展，清潔驗(yàn)證工作也已逐步展開(kāi)，并日益深入。FDA對(duì)制藥廠(chǎng)

4、商的檢查也包括了清潔驗(yàn)證的內(nèi)容，1993年還專(zhuān)門(mén)制訂了《清潔驗(yàn)證檢查指南》。,8,污染物的來(lái)源,原料（活性成分）：這是在設(shè)備清潔及清潔驗(yàn)證中需優(yōu)先考慮的殘余物，因?yàn)檫@些原料有藥理活性，若污染下一品種將會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的后果。活性成分的降解產(chǎn)物：可能在加工過(guò)程中產(chǎn)生，也可能在與清潔劑接觸的過(guò)程中產(chǎn)生。活性成分降解后，可能仍有藥理作用，或毒副反應(yīng)增加。輔料：輔料中應(yīng)重點(diǎn)考慮的是色素及矯味劑，但有其它輔料殘存也可能造成污染事故，如淀粉對(duì)碘

5、制劑。輔料的降解產(chǎn)物也不容忽視。,9,污染物的來(lái)源,清潔劑：清潔劑殘存,并在設(shè)備清潔及清潔驗(yàn)證時(shí)也應(yīng)重點(diǎn)考慮是否有確定殘存限量。若使用復(fù)方清潔劑，還應(yīng)考慮驗(yàn)證時(shí)選哪一成分作參照。微生物污染：應(yīng)重點(diǎn)考慮的是大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等致病菌。其它細(xì)菌若大量存在也應(yīng)重視?？诜苿┑奈⑸镂廴疽苍絹?lái)越受到重視。熱原污染：目前僅無(wú)菌產(chǎn)品考慮熱原的污染問(wèn)題。,10,污染物的來(lái)源,微粒污染：微粒污染可能使成品中存在斑、點(diǎn)、塊、纖

6、維等外觀(guān)問(wèn)題，在設(shè)備清潔時(shí)應(yīng)考慮去除，但清潔驗(yàn)證時(shí)常忽略這一問(wèn)題。消毒劑：在設(shè)備或設(shè)備附近使用消毒劑時(shí)，應(yīng)考慮可能對(duì)設(shè)備造成的污染。潤(rùn)滑劑：許多制藥設(shè)備（如壓片機(jī)、攪拌機(jī)等）都使用潤(rùn)滑油，最好使用食用級(jí)的潤(rùn)滑油，因?yàn)樗鼈冇行孤┥踔僚c藥品接觸的可能。,11,污染物的來(lái)源,環(huán)境中存在的塵埃：在空氣中懸浮的塵埃中，有可能含有各種污染物，有時(shí)甚至是活性成分。 與設(shè)備有關(guān)的污染：密封墊、包材、鍍層脫落物、金屬屑都可能產(chǎn)生污染。維修保

7、養(yǎng)中產(chǎn)生的污染物也應(yīng)考慮。殘留的沖洗水,12,清潔作用的機(jī)理,去除設(shè)備表面殘余物的方法有多種，其作用機(jī)理可概括為：機(jī)械作用溶解去污化學(xué)反應(yīng)。清潔程序的每一步驟都有可能包括這四種機(jī)理中的一種或多種。,13,清潔作用的機(jī)理,機(jī)械作用：即用機(jī)械力去除設(shè)備表面的殘余物，包括刷、吸及水流沖洗。用高壓水流噴射設(shè)備表面，清洗效果很好，它可以清洗到其它方法難以到達(dá)的部位。用超聲波清洗小件器具也是很有效的方法。,14,清潔作用的機(jī)理,溶

8、解：可用水或有機(jī)溶媒將殘余物溶解?？捎脽崴ɑ蛉苊剑┮部商砑幽承┲軇?，如酸性殘?jiān)捎脡A性清潔劑、堿性殘?jiān)捎盟嵝郧鍧崉?15,清潔作用的機(jī)理,去污： 使用表面活性劑，通過(guò)增溶、潤(rùn)濕、乳化、分散等作用將殘余物從設(shè)備表面去除。,16,清潔作用的機(jī)理,化學(xué)反應(yīng)：通過(guò)氧化、水解或酶催化等反應(yīng)將大分子分解成小分子，使其更易去除。常用的氧化劑有次氯酸鈉、過(guò)氧化氫、過(guò)碳酸鈉、臭氧等。用酸或堿溶液可將酯、酰胺、醚等水解成有機(jī)酸鹽和醇，使

9、其更易溶解。酶可催化某些化學(xué)反應(yīng)，促進(jìn)大分子的降解，如蛋白酶可使蛋白質(zhì)降解成小分子成分，使其更易溶解。,17,清洗介質(zhì)的選擇,設(shè)備清潔常用的清洗介質(zhì)有水和（非水）有機(jī)溶媒。設(shè)備表面的殘余物可溶于水時(shí)應(yīng)選擇水作沖洗介質(zhì)，最終的沖洗應(yīng)用純化水或注射用水。用水做清洗介質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)毒、無(wú)殘留物，但對(duì)不銹鋼表面可能有不良的影響，如生銹或腐蝕。,18,清洗介質(zhì)的選擇,當(dāng)設(shè)備表面的殘余物可溶于有機(jī)溶媒時(shí)，可選擇丙酮、二氯甲烷、庚烷等有機(jī)溶媒進(jìn)行

10、清洗。對(duì)于極性較大的殘余物可選用能與水混溶的有機(jī)溶媒（如低級(jí)脂肪醇、乙醚）或與水的混合物。環(huán)境保護(hù)、操作者的安全及費(fèi)用問(wèn)題是選用有機(jī)溶媒的限制因素。,19,清潔劑的選擇,常用的清潔劑可分為：?jiǎn)谓M分清潔劑復(fù)方清潔劑,20,清潔劑的選擇,單組分清潔劑：?jiǎn)谓M分清潔劑是指僅用一種溶媒或一種助潔劑的水溶液。當(dāng)使用單組分清潔劑可以達(dá)到設(shè)備的清潔要求時(shí)，應(yīng)盡量選用，這樣可以簡(jiǎn)化驗(yàn)證過(guò)程。酸、堿：調(diào)節(jié)清洗液的pH值，如NaOH、KOH、磷

11、酸、檸檬酸、乙醇酸。螯合劑：與金屬離子形成絡(luò)合物，增加金屬離子的溶解度。,21,清潔劑的選擇,單組分清潔劑：助懸劑：使殘余物懸浮在沖洗液中沖洗掉而不會(huì)沉積在設(shè)備的其它部位，如低分子聚丙烯酸酯。表面活性劑：有多種類(lèi)型，其選擇應(yīng)用必須平衡多種因素。應(yīng)避免使用高泡表面活性劑，以免增加漂洗的難度。氧化劑：有機(jī)化合物經(jīng)氧化后形成小分子，更易溶解，常用的氧化劑有次氯酸鈉等。酶：是由微生物產(chǎn)生的化學(xué)催化劑，對(duì)底物有選擇性催化作用。清潔劑處方

12、中常用的酶有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶。,22,清潔劑的選擇,多組分清潔劑：多組分清潔劑是指用一種以上的助潔劑組成的復(fù)方清潔劑。多數(shù)情況下，選用多組分清潔劑更符合清潔要求。絕大多數(shù)產(chǎn)品是由多種成分組成的，這些成分具有不同的化學(xué)性質(zhì)，只有多種清潔機(jī)理的聯(lián)合作用，才能徹底清除。多組分清潔劑有很大的靈活性，可對(duì)大部分殘余物有清潔作用。省時(shí), 如表面活性劑的存在可以使NaOH更有效地浸濕殘余物并將其去除，縮短清洗時(shí)間；減少用水量，當(dāng)使用循

13、環(huán)清洗系統(tǒng)時(shí)更是如此。,23,清潔劑的選擇,清潔劑的選擇應(yīng)由各制藥企業(yè)根據(jù)自己的清潔目標(biāo)，清潔限度、人力物力等條件決定。應(yīng)選擇處方已知且固定的清潔劑，并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)規(guī)程，供應(yīng)商還應(yīng)提供清潔劑的安全性數(shù)據(jù)，以供確定清潔劑殘余限量時(shí)參考。,24,清潔劑的選擇,堿性清潔劑最常用，對(duì)酸式鹽、片劑賦形劑、蛋白質(zhì)及發(fā)酵產(chǎn)品清潔效果最好，還可乳化某些脂肪、油脂等。酸性清潔劑對(duì)堿式鹽、微粒、生物堿及某些糖的清潔效果較好。中性清潔劑多用于人工清

14、潔以保證工人的安全，或在其它清潔劑對(duì)設(shè)備有腐蝕作用、對(duì)排水有pH值限度時(shí)選用。,25,清潔劑的選擇,有機(jī)溶媒對(duì)碳?xì)浠衔?，如蠟、凡士林、油脂等的清潔效果較好。含酶清潔劑可根據(jù)底物不同選擇不同的含酶清潔劑。含次氯酸鹽的清潔劑可用于清除蛋白質(zhì)沉積物。,26,清潔劑的選擇,以上內(nèi)容僅供在選擇清潔劑類(lèi)型時(shí)參考，制藥企業(yè)在選用具體品種時(shí)應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室在摸擬實(shí)際生產(chǎn)條件下進(jìn)行篩選，然后經(jīng)在生產(chǎn)過(guò)程中試用才能確定。清潔劑選定后，還應(yīng)選擇清潔劑的濃度

15、、溫度、作用時(shí)間、物理或機(jī)械力及沖洗程序等，這些因素都會(huì)影響清洗效果，不能孤立起來(lái)單獨(dú)考慮。,27,設(shè)備清潔方法,手工清潔自動(dòng)清潔,28,設(shè)備清潔方法,手工清潔：手工清潔是指由操作工在生產(chǎn)結(jié)束后，按一定程序?qū)ιa(chǎn)設(shè)備進(jìn)行清洗。目前國(guó)內(nèi)大部分生產(chǎn)設(shè)備都采用這種方法進(jìn)行清潔。手工清潔因受多種因素（如操作者的差異、操作條件的差異等）的影響，不能保證所有設(shè)備表面都能達(dá)到要求的清潔水平，清潔驗(yàn)證有一定的難度。,29,設(shè)備清潔方法,手工清潔：

16、根據(jù)具體設(shè)備及設(shè)備表面殘余物的要求建立科學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，并經(jīng)嚴(yán)格的驗(yàn)證。由經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)的操作人員進(jìn)行清潔。將設(shè)備清潔納入生產(chǎn)操作規(guī)程，作為生產(chǎn)工藝的一部分，而不僅僅作為生產(chǎn)結(jié)束后對(duì)生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)清潔衛(wèi)生的整理。加強(qiáng)對(duì)清潔效果的驗(yàn)證工作。,30,設(shè)備清潔方法,自動(dòng)清潔：自動(dòng)清潔也可稱(chēng)為原地清潔（CIP, Cleaning In Place)，它是將生產(chǎn)設(shè)備與各種清潔液、沖洗介質(zhì)的輸送管道連接，生產(chǎn)結(jié)束后可在原地按固定程序自動(dòng)進(jìn)行清洗

17、，主要用于清洗封閉的設(shè)備或生產(chǎn)系統(tǒng)。與手工清潔相比，CIP系統(tǒng)可達(dá)到均勻一致的清潔效果，并可再現(xiàn)。CIP系統(tǒng)在食品加工及奶制品業(yè)已使用多年。許多制藥企業(yè)也已開(kāi)始使用，最初用于配液罐和輸送管道的清洗。,31,清潔工作的發(fā)展趨向,用堿性清潔劑取代有機(jī)溶媒以減少或消除在空氣中的擴(kuò)散，降低處置費(fèi)用。但在某些特殊情況下，可能仍需使用有機(jī)溶媒進(jìn)行沖洗，以保證藥物殘余物的去除。,32,清潔工作的發(fā)展趨向,對(duì)設(shè)備清潔有了更嚴(yán)格的驗(yàn)證要求。過(guò)去，人們

18、通過(guò)檢測(cè)沖洗液中藥物的殘余量來(lái)判斷清洗的終點(diǎn)。從交叉污染的角度來(lái)看，這種方法顯然有其局限性。對(duì)下一品種有影響的是仍附著在設(shè)備表面的殘余物而不是沖洗液中已沖洗掉的殘余物。有時(shí)，沖洗液中可能不含殘余物，但某些不溶性成分可能仍附著在設(shè)備表面。另外，沖洗液分析不能給出沖洗液中殘余物與系統(tǒng)中殘余物總量的關(guān)系。因此，測(cè)量沖洗液中的殘余物不是進(jìn)行清潔驗(yàn)證的最好的方法，但作為藥品生產(chǎn)過(guò)程質(zhì)量控制的一部分仍有一定價(jià)值。,33,清潔工作的發(fā)展趨向,近年

19、來(lái)，隨著對(duì)藥品質(zhì)量要求的提高，人們對(duì)清潔驗(yàn)證工作越來(lái)越重視。監(jiān)測(cè)范圍從沖洗液中的殘余物擴(kuò)展到設(shè)備表面的殘余物。監(jiān)測(cè)對(duì)象既包括了前批藥品的殘余物,又包括了清潔劑的殘余物。檢測(cè)方法從外觀(guān)檢查發(fā)展到定性及定量分析。,34,清潔驗(yàn)證的四個(gè)階段,選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開(kāi)發(fā)階段）制定驗(yàn)證方案（參照物、取樣點(diǎn)、合格標(biāo)準(zhǔn)、取樣方法和檢驗(yàn)方法）實(shí)施驗(yàn)證，獲取數(shù)據(jù)，評(píng)價(jià)并得出結(jié)論監(jiān)控及再驗(yàn)證,35,開(kāi)發(fā)階段,方案準(zhǔn)備階段,方案實(shí)施階段,監(jiān)

20、控及再驗(yàn)證階段,清潔 SOP 制訂 培訓(xùn),設(shè)備 取樣點(diǎn)選擇 表面積計(jì)算,確定待檢測(cè)物與合格標(biāo)準(zhǔn) 選定參照物 清潔劑的殘留,驗(yàn)證方案 制訂 培訓(xùn),化驗(yàn)方法 方法開(kāi)發(fā) 驗(yàn)證,方案執(zhí)行 清潔 取樣 化驗(yàn),合格 ？,驗(yàn)證報(bào)告,原因分析,日常監(jiān)控,再驗(yàn)證,變更管理,,,,,,,,,,,,,,,,否,是,,,,,,,,,,流程圖,36,設(shè)備清潔驗(yàn)證的時(shí)機(jī),最初驗(yàn)證：對(duì)于自動(dòng)清潔系統(tǒng)（如CIP），應(yīng)對(duì)新訂的清潔程

21、序、新產(chǎn)品或設(shè)備更換或添置關(guān)鍵部件時(shí)的前三次運(yùn)行進(jìn)行驗(yàn)證。日常監(jiān)測(cè)：每次手工清潔后，對(duì)設(shè)備表面取樣，采用快速的分析方法，對(duì)清潔效果進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，作為防止因操作者個(gè)人差異、操作條件差異影響清潔效果、造成交叉污染的一種措施。換品種生產(chǎn)：在同一操作間使用同一設(shè)備調(diào)換另一品種生產(chǎn)時(shí)應(yīng)取樣檢測(cè)。,37,設(shè)備清潔驗(yàn)證的時(shí)機(jī),改變清潔程序：當(dāng)清潔程序中部分內(nèi)容有變化，如清潔劑改變、清潔設(shè)備改變、清潔步驟改變時(shí)應(yīng)重新驗(yàn)證。操作者資格認(rèn)證：

22、新到崗的對(duì)操作者進(jìn)行上崗資格認(rèn)證，對(duì)在崗操作者定期進(jìn)行考核以確認(rèn)能否準(zhǔn)確無(wú)誤地執(zhí)行清潔程序。產(chǎn)品、工藝、生產(chǎn)設(shè)備改變：當(dāng)產(chǎn)品處方、工藝或生產(chǎn)設(shè)備改變后應(yīng)對(duì)原有清潔程序進(jìn)行驗(yàn)證。,38,設(shè)備清潔驗(yàn)證的時(shí)機(jī),設(shè)備維修保養(yǎng)后：停產(chǎn)后重新開(kāi)工前：設(shè)備進(jìn)行定期或不定期的維修保養(yǎng)后，應(yīng)對(duì)清潔結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證評(píng)價(jià)。維修保養(yǎng)可能會(huì)給設(shè)備內(nèi)帶來(lái)各種污染物，使清潔過(guò)程復(fù)雜化。重新開(kāi)工前應(yīng)對(duì)設(shè)備表面取樣對(duì)清潔結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。停產(chǎn)期間，空氣凈化等環(huán)境控制設(shè)

23、施可能也不正常運(yùn)行，清潔工作也會(huì)變得比較復(fù)雜。,39,設(shè)備清潔驗(yàn)證的時(shí)機(jī),生產(chǎn)區(qū)被污染：在某種污染問(wèn)題，如交叉污染、雜菌持續(xù)超標(biāo)到解決后應(yīng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證，以保證清潔效果。定期驗(yàn)證：應(yīng)定期進(jìn)行再驗(yàn)證。時(shí)間間隔由各企業(yè)根據(jù)具體情況確定。,40,清潔驗(yàn)證時(shí)機(jī)的選擇,41,清潔驗(yàn)證檢測(cè)的對(duì)象,在清潔驗(yàn)證中，應(yīng)根據(jù)可能存在的污染物確定檢測(cè)對(duì)象，通常應(yīng)包括：前批藥物殘余物清潔劑殘余物微生物熱原,42,清潔驗(yàn)證產(chǎn)品與設(shè)備分組,清潔驗(yàn)證最可

24、靠的驗(yàn)證方案是對(duì)每一品種、每一設(shè)備的清潔程序分別進(jìn)行驗(yàn)證。這對(duì)于產(chǎn)品與設(shè)備較多的制藥企業(yè)來(lái)說(shuō)，難度太大。在這種情況下，可以根據(jù)產(chǎn)品的性質(zhì)、類(lèi)別或設(shè)備類(lèi)型進(jìn)行分組驗(yàn)證。,43,產(chǎn)品分組,將配方相似的產(chǎn)品歸為一組，在同組產(chǎn)品中，根據(jù)以下情況選擇重點(diǎn)品種作為驗(yàn)證的集中目標(biāo)：溶解度最低的產(chǎn)品；藥效最強(qiáng)的產(chǎn)品；溶解度低、藥效又強(qiáng)的產(chǎn)品；最難清洗的產(chǎn)品; 新產(chǎn)品。,44,產(chǎn)品分組,對(duì)于清潔劑殘余物，可根據(jù)以下情況選擇驗(yàn)證檢測(cè)目標(biāo)：最

25、易檢測(cè)的成分；含量最高的成分;毒性最強(qiáng)的成分。選擇驗(yàn)證的檢測(cè)目標(biāo)時(shí)，應(yīng)考慮到含量最高的成分可能已被清除，而含量極少粘附力最大的成分可能仍留在設(shè)備表面。產(chǎn)品分組后，不必對(duì)每種殘余物進(jìn)行檢測(cè)，只需檢查是屬于哪一組的，再根據(jù)以上原則選擇集中檢測(cè)的目標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證。,45,設(shè)備分組,按設(shè)備進(jìn)行分組時(shí)，可以把功能及加工的劑型相近的設(shè)備歸為一組。,46,殘余物限度的確定,在設(shè)備清潔中，要達(dá)到絕對(duì)潔凈既無(wú)可能，也無(wú)必要，因?yàn)椴淮嬖诮^對(duì)純凈的物質(zhì)，

26、對(duì)于設(shè)備清潔驗(yàn)證來(lái)說(shuō)，重要的是確定一個(gè)可接受的殘余物的限度。殘余物在下批產(chǎn)品中的分散有兩種極端的情況：最好的情況是殘余物均勻地分散于每單位劑量中；最壞的情況是所有殘余物集中于一個(gè)單位劑量中。實(shí)際清潔驗(yàn)證中所面臨的是介于二者之間的情況。在確定殘余物限量時(shí)應(yīng)考慮到這一點(diǎn)。,47,殘余物限度的確定,殘余物限度的確定方法：根據(jù)最低無(wú)顯著性影響水平值確定根據(jù)中毒劑量的百分?jǐn)?shù)確定以“不得檢出”的作為殘余物限量以沖洗液中殘余物濃度、每

27、擦拭棉簽上所含殘余物的量、設(shè)備單位表面積上殘余物的量等表示殘余物限量。根據(jù)實(shí)際清潔能力確定殘余物限量以“肉眼不可見(jiàn)”作為殘余物限量,48,殘余物限度的確定,根據(jù)最低治療量的百分?jǐn)?shù)確定：以調(diào)換品種每日最大劑量中所含的前品種活性殘余物不得超過(guò)其每日最低治療量的百分?jǐn)?shù)作為限量。通常的范圍是0.01～0.1%，同品種批間清潔時(shí)，該限度可放寬至10％。應(yīng)有最高絕對(duì)量的規(guī)定。,49,殘余物限度的確定,根據(jù)最低治療量的百分?jǐn)?shù)確定：計(jì)算公式

28、：最小NOEL:無(wú)顯著性影響水平值共用設(shè)備表面積,,50,殘余物限度的確定,根據(jù)中毒劑量的百分?jǐn)?shù)確定：即以調(diào)換品種每日最大劑量中所含殘余物的量不得超過(guò)其中毒劑量的百分?jǐn)?shù)作為限量。可以用于非活性成分如賦形劑、清潔劑、消毒劑、降解產(chǎn)物等的限量確定，因這些成分有時(shí)中毒劑量極高，所以應(yīng)有最高絕對(duì)量的規(guī)定。對(duì)于仍處于研究開(kāi)發(fā)階段的活性成分，可能僅知其中毒劑量，亦可用此法確定其殘余物限量。,51,殘余物限度的確定,根據(jù)中毒劑量的百分

29、數(shù)確定：計(jì)算公式：,52,殘余物限度的確定,以“不得檢出”的作為殘余物限量：即以分析方法的檢測(cè)限作為殘余物限量。這種限量確定方法在很大程序上依賴(lài)于分析方法的靈敏度，當(dāng)新的檢測(cè)方法出現(xiàn)，能在更低水平上檢測(cè)出殘余物時(shí)，需指定一個(gè)限度值。因未與殘余物的治療活性或毒性相結(jié)合，這種確定方法是否可行值得考慮。,53,殘余物限度的確定,以沖洗液中殘余物濃度、每擦拭棉簽上所含殘余物的量、設(shè)備單位表面積上殘余物的量等表示殘余物限量。需以治療劑量

30、或中毒劑量、批量、共用設(shè)備的表面積為依據(jù)折算。,54,殘余物限度的確定,根據(jù)實(shí)際清潔能力確定殘余物限量：經(jīng)最大努力徹底清潔后，對(duì)設(shè)備表面殘余物進(jìn)行檢測(cè)，以此時(shí)殘余物的量作為殘余物限量。可以作為適合所有產(chǎn)品的通用的限度。在缺乏最低有效量等藥理數(shù)據(jù)時(shí)可用此法確定殘余物限量。優(yōu)點(diǎn):劑量、批量、設(shè)備規(guī)模改變可不必改變用此法確定的殘余物限量。,55,殘余物限度的確定,以“肉眼不可見(jiàn)”作為殘余物限量: 肉眼檢測(cè)的“檢出限”為1.0～4.0μ

31、g/cm2。這是調(diào)換品種生產(chǎn)時(shí)設(shè)備清潔的最低標(biāo)準(zhǔn)。,56,殘余物限度的確定,在實(shí)際確定殘余物限度時(shí)，通常在上述限度中選最低值作為最終殘余物的限度。一個(gè)科學(xué)、合理的殘余物限度確定后，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格驗(yàn)證，對(duì)清潔程序進(jìn)行評(píng)價(jià)修正，可以有效地防止清潔不足造成的污染及清潔過(guò)度造成的浪費(fèi)。,57,分析方法的選擇,用于清潔驗(yàn)證的分析方法有定性與定量、專(zhuān)屬性與非專(zhuān)屬性，操作簡(jiǎn)便與復(fù)雜、手工分析與自動(dòng)分析之分。進(jìn)行清潔驗(yàn)證時(shí)，企業(yè)可以根據(jù)殘余物類(lèi)型及企業(yè)

32、自身的具體條件選擇不同的分析方法。,58,分析方法的選擇,59,分析方法,,優(yōu)點(diǎn),,缺點(diǎn),,高效液相色譜法,,高度特異性；中等至高度靈敏度；可定量,,分析時(shí)間長(zhǎng)；成本高,,薄層層析法,,高度特異性；中等至高度靈敏度；成本低,,肉眼終點(diǎn)，非定量化；樣品準(zhǔn)備時(shí)間長(zhǎng),,分光光度法,,中等至高度特異性；高靈敏度；可用作篩選方法,,不能定量化,,總有機(jī)碳分析法,,范圍廣、低量檢測(cè)；有聯(lián)機(jī)能力，快速樣品周期樣品準(zhǔn)備時(shí)間最短,,非特異性；只適用于

33、水溶性樣品,,聯(lián)酶免疫吸附測(cè)定法,,對(duì)生物制品有特異性；非常靈敏,,樣品周期長(zhǎng)；非常昂貴，勞動(dòng)強(qiáng)度大有變性蛋白問(wèn)題,,電泳,,對(duì)生物制品有特異性；中等靈敏度,,非常昂貴，勞動(dòng)強(qiáng)度大，有變性蛋白問(wèn)題換樣品所需時(shí)間長(zhǎng),,pH,,快速，成本低；有聯(lián)機(jī)能力,,非特異性，限于水溶性樣品只對(duì)清潔劑有用，靈敏度有限,,電導(dǎo)率,,快速，成本低；有聯(lián)機(jī)能力,,非特異性；有限靈敏度,,肉眼檢測(cè),,直接得出結(jié)果；通常用于一般篩選,,不能定量化；主觀(guān)性,

34、,,分析方法的選擇,60,分析方法的選擇,在這些分析方法中，最常用的是HPLC、TLC、UV等?？傆袡C(jī)碳分析（TOC）是一種比較新的分析方法，過(guò)去常用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)，靈敏度高，但無(wú)選擇性，理論上可對(duì)任何含有機(jī)碳的化合物進(jìn)行定量。目前除用于活性藥物殘余物的測(cè)定外，還可用于生物制品及清潔劑殘余物的測(cè)定，可與聯(lián)酶免疫吸附測(cè)定法（ELLSA）互補(bǔ)。本法回收率在50～70％以上（殘余物含量在0.5～100ppm時(shí)），操作者間的誤差可在5％以下。,6

35、1,分析方法的選擇,肉眼檢測(cè)，主要用于嚴(yán)重污染清潔后的檢測(cè)。據(jù)報(bào)道，肉眼可以觀(guān)察到每2×2in2(25cm2) 的表面上含100μg以上的殘余物時(shí)的微粒。對(duì)于無(wú)毒、無(wú)活性的化合物的殘余物，肉眼檢測(cè)可以作為一種檢測(cè)手段。根據(jù)對(duì)GMP的理解，生產(chǎn)設(shè)備經(jīng)清潔后，不存在肉眼可見(jiàn)的殘余物，已成為設(shè)備清潔的最低標(biāo)準(zhǔn)。,62,取樣方法的選擇,殘余物在設(shè)備表面的分布有兩種極端的情況：殘余物均勻地分布于設(shè)備表面，在任何部位取樣都能對(duì)整個(gè)設(shè)備表

36、面的污染情況做出準(zhǔn)確評(píng)價(jià)；殘余物在設(shè)備表面的分布不均勻，必須認(rèn)真選擇取樣點(diǎn)，以對(duì)設(shè)備表面的污染情況做出準(zhǔn)確評(píng)價(jià)。設(shè)備清潔驗(yàn)證中最常遇到的是后者，所以需要驗(yàn)證的設(shè)計(jì)者精心選擇取樣點(diǎn)和取樣方法。,63,取樣方法的選擇,取樣點(diǎn)的選擇：選擇取樣點(diǎn)時(shí)，應(yīng)注意難以清洗的部位的取樣。選擇取樣方法時(shí)，應(yīng)注意不能給設(shè)備表面帶來(lái)新的殘余物、異物、或微生物污染。,64,取樣方法的選擇,設(shè)備清潔驗(yàn)證中常用的取樣方法有以下幾種:擦拭法對(duì)最終沖洗液取樣

37、空白品生產(chǎn)直接進(jìn)行下一品種的生產(chǎn)，在下一品種中檢查殘余物。外觀(guān)檢查有機(jī)溶媒提取廠(chǎng)房設(shè)施表面及環(huán)境空氣的取樣,65,取樣方法的選擇,擦拭法： 將擦拭材料用溶媒浸潤(rùn)后擦拭設(shè)備的表面（可以是一定量的面積）。 擦拭材料可以是天然棉或合成棉或布，可以做成棉球，也可以做成一定面積的布?jí)K（定量取樣用）。 最常用的溶媒是水，也可以用有機(jī)溶媒如甲醇、已烷等。 擦拭法取樣點(diǎn)的選擇也很重要。選擇易取樣的開(kāi)放區(qū)域，因這些

38、部位最易清潔，所以不能代表設(shè)備的整體清潔水平；選擇較難取樣的部位（角落、縫隙等），因這些部位也較難清洗，所以能夠?qū)υO(shè)備的整體清潔水平進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)價(jià)，但定量困難。,66,取樣方法的選擇,對(duì)最終沖洗液取樣：這也是一種常用的取樣方法。優(yōu)點(diǎn)是能夠覆蓋大片表面積，并可達(dá)到擦拭法不易接近的地方，如果操作得當(dāng)，可以得到整個(gè)設(shè)備表面的清潔結(jié)果。但若驗(yàn)證所針對(duì)的殘余物不溶于水，則可能給出錯(cuò)誤的結(jié)論。清潔驗(yàn)證真正關(guān)心的是仍留在設(shè)備表面的殘余物，而不是已沖洗

39、掉的殘余物。這種取樣法的另一個(gè)缺點(diǎn)是大量沖洗液對(duì)殘余物的稀釋?zhuān)赡軙?huì)使殘余物難以檢測(cè)。,67,取樣方法的選擇,空白品生產(chǎn)：設(shè)備清潔后，加工一批空白品，然后檢測(cè)空白品中污染物的含量。這是檢查設(shè)備清潔情況及殘余物對(duì)下一品種污染情況的最直接明了的方法。但這種方法是假定污染物在設(shè)備表面分散均勻，并能均勻地分散于空白品中，所以也有一定的局限性。另外，這種取樣法需要耗費(fèi)大量的人力、物力和財(cái)力。殘余物被稀釋后可能難以檢測(cè)也是其缺點(diǎn)。,68,取樣

40、方法的選擇,直接進(jìn)行下一品種的生產(chǎn)，在下一品種中檢查殘余物：這是在通常情況下不應(yīng)采用的一種方法。若殘余物超過(guò)限量將會(huì)使整批產(chǎn)品報(bào)廢。FDA對(duì)這種做法不予認(rèn)可。,69,取樣方法的選擇,外觀(guān)檢查： 可對(duì)設(shè)備清潔水平進(jìn)行主觀(guān)評(píng)價(jià)。然后再用其它方法對(duì)清潔不徹底的部位取樣檢測(cè)。,70,取樣方法的選擇,有機(jī)溶媒提?。哼@是測(cè)定難溶于水的殘余物的最有效的方法?？稍谧罱K沖洗后進(jìn)行。,71,取樣方法的選擇,廠(chǎng)房設(shè)施表面及環(huán)境空氣的取樣：表面取樣

41、可用如前所述的擦拭與沖洗法?？諝馊涌捎肊PA塵埃取樣法將樣品收集到膜濾器上進(jìn)行測(cè)定。,72,常用取樣方法的優(yōu)缺點(diǎn),73,取 樣 用 溶 媒,對(duì)殘余物有一定的溶解度對(duì)殘余物檢測(cè)無(wú)干擾易揮發(fā),無(wú)殘留無(wú)毒,74,擦拭材料,理想的擦拭材料應(yīng):不干擾檢測(cè)對(duì)象的檢測(cè);使用方便,在被擦拭表面無(wú)殘留.我們目前使用的是:脫脂棉.據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道:合成棉更符合上述要求.擦拭材料可做成棉球,也可做成一定面積(25cm2)的塊狀供定量取樣用.,75,片

42、劑清潔驗(yàn)證的取樣點(diǎn),76,確定殘余物限量的常用方法,77,確定殘余物限量的常用方法,在我們進(jìn)行清潔驗(yàn)證的初期，基本上是以現(xiàn)有分析方法“不得檢出”作為殘余物限量，雖能在一定程度上減少污染與交叉污染的發(fā)生，但這種限量在很大程度上依賴(lài)于分析方法的靈敏度，未與殘余物的藥理活性或毒性相結(jié)合，因此，具有一定的局限性。 根據(jù)GMP對(duì)設(shè)備清潔的要求，結(jié)合殘余物的藥理活性等數(shù)據(jù)，提出了確定殘余物限量的四個(gè)原則。由于以擦拭法作為主要的取樣