朱海平糞便涂片課件

1、糞便涂片蘭州大學第一醫(yī)院 檢驗科朱海平,糞便菌群涂片檢查臨床意義,糞便中細菌數(shù)量、形態(tài)種類、比例與腸道菌群處于平衡還是失調狀態(tài)有著密切的關系 糞便菌群涂片能快速診斷腸道菌群失調，為早期預防、治療提供線索,菌群失調,概念：指機體某部位正常菌群中菌種間的平衡被打 破，菌種間的比例大幅度變化而超出正常范圍的狀態(tài)。這種狀態(tài)進一步發(fā)展，機體出現(xiàn)一系列臨床病癥和體征，稱為菌群失調癥或菌群交替癥,什么

2、會使菌群失調呢？,菌群失調的原因,抗生素的不合理應用（除抗生素本身毒副作用外）是主要誘因，殺滅致病菌的同時也殺滅有益菌，破壞了正常的微生態(tài)平衡，引起菌群失調。 疾?。何杆崛狈Α⒏斡不?、胃腸腫瘤等； 其他：手術、激素、同位素、放射線和免疫抑制劑的大量使用，都可造成菌群失調,腸道菌群的檢測方法,糞便涂片：革蘭氏染色—G+紫黑色、G-淺紅色

3、 顯微鏡觀察細菌的總數(shù)、形態(tài)、比例等培養(yǎng)：需氧菌—埃希氏菌屬、沙門氏菌屬、志賀氏 菌屬等,一、糞便直接涂片的優(yōu)缺點,1、優(yōu)點：①設備簡單②操作簡單③時間短④形象直觀，直接了解糞便菌群的“像”，熟練者對診斷菌群失調有較高的準確性。,2、缺點：①檢驗者必須有一定的經(jīng)驗，否則易判斷錯誤②主要是定性檢查，確定分度較困難。,二、操作技術,1、涂片 ：  將新鮮大便多處沾取直接涂抹在潔凈的

4、玻片上，糞便不可稀釋以防細菌變形。標本務求新鮮，涂片厚薄適宜2、外觀  ： 肉眼檢查外觀顏色、形狀（若含有膜狀物的大便應補做艱難梭菌培養(yǎng)）3、鏡檢  ： 染色技術是診斷準確成功的關鍵，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌要對比鮮明。鏡檢時應將涂片視野全面觀覽，切不可看幾個視野就計數(shù)或報告,三、檢查方法,1、細菌總數(shù) 觀察菌群涂片首先要總覽細菌總數(shù)，通過“比例概數(shù)法”進行判

5、斷。 了解涂片上細菌的數(shù)量是增多還是減少，有無優(yōu)勢菌或真菌。細菌總數(shù)過多的情況較少見或不易引起重視，菌群失調時細菌總數(shù)多在正常、減少或消失。,2、觀察革蘭氏陽性、陰性桿菌及球菌的比率改變,G+桿菌 ：G-桿菌：G+球菌 ：G-球菌（包括球菌/桿菌）比率反映了糞便菌群的質素，它一般不受糞便稀釋或濃縮的影響，所以較細菌總數(shù)有更大的意義，更能反映菌群的本質和預后。,3、計數(shù)方法,選定有代表性

6、視野中的部分區(qū)域作細菌分類計數(shù)，需要數(shù)100～200個細菌以求得比例。不同年齡的人的比例都不一樣，一般桿菌與球菌比例約為75：25。,各年齡組細菌比率平均值的正常參考值（%）,年齡   G+桿菌   G-桿菌 G+球菌 G-球菌 1d：     30.7—61.5     38

7、.5—60.9        0—2.2     0—0.012d：     60.0—71.6     34.8—36.9       3.0—3.5         0—0.013d：    

8、 66.9—82.7     16.0—31.4       1.3—1.6         0—0.055d：     85.5—87.51     11.0—12.8       1.4—1.7    

9、   0.08—0.4半年：   82.1—96.4     2.3—15.8       0.5—2.6         0.2—1.11歲：     78.4—94.5   3.5—16.6     

10、0; 1.5—2.6         0.3—1.75歲：   51.7—86.3     10.6—37.7       2.0—13.2       1.1—5.410歲：   56.7—88.5   7.6—30.7

11、       2.5—12.2       2.0—6.718—25歲： 54.3—78.6   12.2—35.2       2.2—12.5     2.4—9.041—55歲： 39.4—59.3   37.3—49.6     &#

12、160; 2.4—5.9         3.4—6.756—65歲： 35.3—56.8   44.3—49.6       2.3—5.9         3.6—6.766歲：     34.5—55.2   26.1—49.

13、6       2.8—10.9       3.3—7.4,腸道菌群各類細菌的比例,G+桿菌 % G-桿菌% G+球菌% G-球菌%正常范圍 50.2-74 23.5-44 2-13 0.5-9較正常增

14、多 75-85 45-50 25-30 5-10較正常明顯增多 ＞85 ＞50 ＞30 ＞10較正常明顯減少

15、35-40 30-35 ＜10 ＜5較正常顯著減少 ＜20-30 ＜15-20 ＜2 ＜1 桿菌：球菌（G+桿菌+

16、G-桿菌：G+球菌+G-球菌） 3-10：1,細菌總數(shù)的評定標準,每油鏡視野細菌數(shù) 評價 (數(shù)個視野平均值） <10 顯著減少 11-100 明顯減少 101-500

17、 略減少 501-5000 正常 ＞5000 顯著增多,腸道菌群的種類,99.9%厭氧菌G+桿菌：雙歧桿菌 、乳桿菌 、梭狀芽胞桿菌 （產氣莢膜桿菌、艱難梭菌、破傷風梭菌）等G-桿菌： 脆弱擬桿菌 等G+球菌： 消化鏈球菌 等G-球菌： 韋榮球菌 等,腸道菌群

18、的種類,0.1%需氧菌G+桿菌： 芽孢桿菌 （枯草芽胞桿菌、臘樣芽胞桿菌）G-桿菌： 大腸桿菌、沙門菌 、志賀菌 、普通變形桿菌 銅綠假單菌 等G+球菌： 葡萄球菌 、鏈球菌 等G-球菌： 奈瑟菌 G-彎曲菌：空腸彎曲菌,腸道菌群與人體健康,1、有益菌 或稱共生菌 ： 雙岐桿菌、乳桿菌、優(yōu)桿菌等2、中間菌 ： 腸球菌、大腸桿菌、擬桿菌等，

19、 有益，也有害3、有害菌 ：銅綠假單胞菌、葡萄球菌、梭狀芽胞桿菌等,正常女嬰4個月，母乳喂養(yǎng)，蛋黃樣正常軟便，似純培養(yǎng)的革蘭氏陽性桿菌占95%以上，呈正常菌群涂片所見,男，1歲幼兒，正常糞便涂片。細菌總數(shù)正常，以革蘭氏陽性桿菌為主，革蘭氏陰性桿菌及革蘭氏陽性球菌均在正常范圍，呈正常菌群涂片所見,健康壯年人之糞便，革蘭陽性菌（似乳桿菌和雙歧桿菌）多于革蘭陰性桿菌（似擬桿菌），革蘭陽性和革蘭陰性球菌在正常范

20、圍，呈現(xiàn)壯年人之正常菌群涂片所見。,健康青年人正常糞便涂片，革蘭氏陽性桿菌明顯多于革蘭氏陰性桿菌，呈正常菌群涂片所見,女性，63歲正常老年人糞便，革蘭氏陽性桿菌略多于革蘭氏陰性桿菌，革蘭氏陽性和陰性球菌及芽胞桿菌正常在范圍，呈現(xiàn)老年人正常菌群涂片,檢查要點與報告要點,糞便涂片觀察到的細菌分為四類： 1、 革蘭氏陽性桿菌 2、 革蘭氏陰性桿菌 3、 革蘭氏陽性球菌 4、

21、 革蘭氏陰性球菌 通過標本中四類細菌的百分比、有無比例倒置與正常菌群平衡狀態(tài)的正常百分比的比較,來評定受檢者的菌群狀態(tài)。,涂片快速查菌群時根據(jù)菌群菌群失調嚴重程度可分為三度： Ⅰ度和Ⅱ度菌群失調是數(shù)量的改變 Ⅲ度是質的改變,菌群失調分度的標準,菌群失調的分度及診斷,Ⅰ度菌群失調 臨床表現(xiàn)：慢性腹瀉、輕、可自發(fā)

22、緩解 糞便外觀：多為稀便，大便常規(guī)無明顯異常 涂片所見：細菌總數(shù)在正常低值，G+桿菌基本正常，G-桿 菌略增加（或G+球菌較正常增加） 總之，僅是數(shù)量和比例輕度改變,,,8天嬰兒稀便，腹瀉3-5次/天，革蘭氏陽性球菌及球桿菌增多，革蘭氏陽性桿菌減少，革蘭氏陰性桿菌相對多，呈現(xiàn)Ⅰ度菌群失調改變,20歲，女性，輕度腹瀉之青年人糞便，2-4次/d?？梢姼?/p>

23、蘭陰性桿菌多于革蘭陽性桿菌，為I度菌群失調改變，不需治療即可恢復。,男，57歲，急性腸炎。革蘭陽性桿菌明顯減少，革蘭陰性桿菌在正常低值，革蘭陽性球菌明顯增多，呈現(xiàn)球桿比例倒置，菌群呈I度菌群失調改變。,Ⅱ度菌群失調,臨床表現(xiàn)：慢性腹瀉、不可逆糞便外觀：多為稀便、也可呈粘液水樣便、膿血或柏油樣便。大便常規(guī)可見少量白細胞和膿細胞。涂片所見：細菌總數(shù)明顯減少，G+桿菌減少，G-桿菌明顯增多（擬桿菌、大腸桿菌），G+球菌較正常增多，球桿

24、比倒置，可見少量類酵母菌。,,,常住菌明顯減少，革蘭氏陽性桿菌顯著減少，革蘭氏陰性桿菌部分消失，革蘭氏陽性鏈球菌及類酵母菌增多，呈現(xiàn)Ⅱ度菌群失調改變,66歲女性慢性肝炎患者，腹瀉，黃色稀便。細菌總數(shù)略減少，革蘭陽性和革蘭陰性桿菌明顯減少，而革蘭陽性球菌增多，可見大量脂肪球（蘇丹III染色明顯），呈II度菌群失調改變。,,Ⅲ度菌群失調,臨床表現(xiàn)： 急性腹瀉、二重感染、排便次數(shù)多，可出現(xiàn)低 熱和白細胞升高糞便外觀：

25、 稀便或粘液便，常呈黃綠色或黑色；大便常規(guī) 可見大量白細胞和膿細胞。涂片所見： 細菌總數(shù)顯著減少；原有細菌大多被抑制，一種細菌或真菌占優(yōu)勢：葡萄球菌、白假絲酵母菌、致病大腸桿菌、艱難梭菌、銅綠假單菌、肺炎克雷伯菌總之，原菌群中的某一種少數(shù)菌成為菌群的絕對優(yōu)勢是Ⅲ度菌群失調癥的主要特點，應同時做糞便細菌的分離和鑒定。,,,快速涂片查菌群：涂片所見細菌總數(shù)顯著減少，革蘭陽性、革蘭陰性桿菌消失，可見少數(shù)革蘭陽性球菌和較多量的酵母樣

26、菌，呈現(xiàn)III度菌群失調改變。,革蘭陽性桿菌減少，革蘭陰性桿菌明顯減少，酵母菌明顯增多，呈現(xiàn)III度菌群失調改變。,報告方式,報告方式有兩種：文字描述法和簡表法1、文字描述法： 具體描述細菌總數(shù)，革蘭氏陽性桿菌、革蘭氏陰性桿菌、革蘭氏陽性球菌、革蘭氏陰性球菌變化，有無優(yōu)勢菌，可能的特征性細菌，并考慮該年齡段菌群特點，提出腸道菌群的初步印象診斷。,文字描述法報告正常菌群范例,文字描述法一 如涂片所見：

27、 細菌總數(shù)在正常范圍，革蘭氏陽性球菌多于革蘭氏陰性桿菌，有少數(shù)革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陰性球菌，未見明顯的酵母菌。印象診斷：基本正常腸道菌群,文字描述法報告Ⅱ度菌群失調菌群范例 文字描述法二 如涂片所見：  細菌總數(shù)：         明顯減少革蘭氏陽性

28、桿菌：     較正常明顯減少革蘭氏陰性桿菌：     較正常略減少革蘭氏陽性球菌：   較正常增加革蘭氏陰性球菌：    未見改變酵母菌：             較正常略有增加其它： &#

29、160;             可見少量膿細胞鏡下印象：         呈Ⅱ度菌群失調改變還可在報告中增加描述，如球菌是鏈球菌，有梭狀芽胞桿菌等等，另正常的或未見到的可以不報告，如革蘭氏陰性球菌、酵母菌等。,2、簡表法報告Ⅱ度菌群失調范例,,,,THANK YOU,