蛙神經(jīng)干復(fù)合動作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度的測定

1、第四次實(shí)驗(yàn),蛙神經(jīng)干復(fù)合動作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度的測定,實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)后處理,[實(shí)驗(yàn)要求],1. 掌握蛙坐骨-脛腓神經(jīng)標(biāo)本的制備方 法,2. 掌握引導(dǎo)神經(jīng)干復(fù)合動作電位和測定其傳導(dǎo)速度的基本原理和方法,基本知識,-刺激和閾刺激，興奮和興奮性,-動作電位及其潛伏期、時程和幅值,[實(shí)驗(yàn)原理],-神經(jīng)干動作電位的傳導(dǎo),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,-70,-55,+35,時間(m

2、s),mV,動作電位,刺激偽跡,S,,,,潛伏期,,,時程,,,,幅值,,R,,刺激偽跡 : 當(dāng)電刺激神經(jīng)時，刺激電流逸散到神經(jīng)干表面而通過引導(dǎo)電極記錄下來就成為刺激偽跡，它可作刺激的時間標(biāo)志。,,,- - - - - - - - - - - -,+ + + + + + + + + + + +,- - - - - - - - - - - -,+ + + + + + + + + +

3、 + +,圖4-1 動作電位的傳導(dǎo)示意圖,- -,+ +,,1. 細(xì)胞外記錄2. 記錄的是神經(jīng)干的復(fù)合動作電位,本次實(shí)驗(yàn)：,,神經(jīng)纖維,,,,,,,,,,,,S,,,,圖4-2 雙相動作電位,1 是眾多不同閾值神經(jīng)纖 維電變化的復(fù)合反映；2 不具有“全或無”的現(xiàn)象。,復(fù)合動作電位的特點(diǎn),+,-,-,+,-,,+,+,-,+,+,-,-,,,圖4-3 雙相動作電位形成原理示意圖,-,+,,+,+,+,+,+,-,-,-,-,-,

4、,,,圖4-4 單相動作電位形成原理示意圖,基本知識,[實(shí)驗(yàn)原理],原理,V=s/(t2 - t1 ),雙相動作電位,,,2通道,4通道,原理,單相動作電位,,[實(shí)驗(yàn)原理],基本知識,t,時程,幅值,2通道,[實(shí)驗(yàn)步驟],1.制備蛙坐-骨脛腓神經(jīng)標(biāo)本（P80）,2.連接實(shí)驗(yàn)裝置(P77),3.Medlab系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)參數(shù)配置（P78）,+,-,-,-,制備蛙坐-骨脛腓神經(jīng)標(biāo)本（P55）,從枕骨大孔進(jìn)針向前破壞腦向后破壞脊髓骶髂關(guān)節(jié)上1cm

5、剪去軀干上部及內(nèi)臟剝皮及分離兩側(cè)后肢分離坐骨神經(jīng),[實(shí)驗(yàn)步驟],1.制備蛙坐骨-脛腓神經(jīng)標(biāo)本（P80）,2.連接實(shí)驗(yàn)裝置(P77),3.Medlab系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)參數(shù)配置（P78）,4.實(shí)驗(yàn)處理、觀察、記錄和測量,妥善放置神經(jīng)干標(biāo)本啟動刺激器，確定閾刺激（閾強(qiáng)度）和最大刺激強(qiáng)度，觀察雙相動作電位調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度至圖形最佳并存盤,實(shí)驗(yàn)處理、觀察、記錄和測量,,,妥善放置神經(jīng)干標(biāo)本啟動刺激器，確定閾刺激（閾強(qiáng)度）和最大刺激強(qiáng)度，觀察雙相動作

6、電位調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度至圖形最佳并存盤,實(shí)驗(yàn)處理、觀察、記錄和測量,夾損R1和R2間神經(jīng),觀察單相動作電位， 存盤。測其幅值及時程,,,實(shí)驗(yàn)后處理1．打印出2通道雙相和單相動作電位的 圖形。2．列表顯示實(shí)驗(yàn)結(jié)果相關(guān)數(shù)值。3．分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果并寫出實(shí)驗(yàn)報告。,1.制備的標(biāo)本盡可能長些，避免損傷。2.制備標(biāo)本時要經(jīng)常向神經(jīng)干滴加林格液，保持標(biāo)本濕潤，但屏蔽盒內(nèi)不可積液。3.電刺激強(qiáng)度要逐漸增加，找到最大強(qiáng)度后再向下調(diào)整刺激強(qiáng)度至波

7、形最佳狀態(tài)。4.夾傷神經(jīng)觀察單相AP時，要給予夾傷之前同樣的引導(dǎo)條件。,注意事項(xiàng),表：神經(jīng)干動作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度的測定實(shí)驗(yàn)結(jié)果,兩引導(dǎo)電極相隔較遠(yuǎn),上下相動作電位完全分離,思考題：,雙相動作電位與單相動作電位有何不同？為什么？神經(jīng)纖維的動作電位是“全或無”的，實(shí)驗(yàn)中為什么見到動作電位在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度的增加而增加？本實(shí)驗(yàn)所測出的傳導(dǎo)速度能否代表該神經(jīng)干所有神經(jīng)纖維的傳導(dǎo)速度？為什么？,來吧！,,書寫格式,,家兔呼吸運(yùn)動的

8、調(diào)節(jié),2003-4-5 室溫,目的：簡單明了,方法：可省略,結(jié)果：圖形 表格 繪圖 描述,討論：針對結(jié)果進(jìn)行分析,結(jié)論：與目的相應(yīng),結(jié)果：現(xiàn)象的描述，不加任何分析性語言 除圖形，表格外，還要有必要的文字說明 圖題，表題要簡單明了 圖1 大鼠正常心電圖 圖1 實(shí)驗(yàn)鼠心電圖變化 表1 利多卡因的抗心律失常作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,結(jié)果：現(xiàn)象的描述，不加任何分析性語

9、言 如附圖所示，大鼠舌下靜脈注射氯化鋇后，約5秒鐘后出現(xiàn)室性快速心律失常，實(shí)驗(yàn)鼠馬上給予利多卡因，心律很快恢復(fù)正常，（但心率仍比原來加快）。對照鼠給予生理鹽水注射后，5分鐘后心律沒有恢復(fù)正常，10分鐘后恢復(fù)到正常心律。,,2 討論：對結(jié)果的分析、解釋，非回答思考題 非實(shí)驗(yàn)過程的記錄，非實(shí)驗(yàn)總結(jié)報告 × 在實(shí)驗(yàn)開始時注射麻醉藥3-5分鐘后，老鼠的活動性減低，‥‥‥ &#

10、215; 注射藥量要控制得當(dāng)，過多可能會導(dǎo)致大鼠死亡，有一組就發(fā)生這樣的事，‥‥‥,2. 討論：對結(jié)果的分析、解釋，非回答思考題 非實(shí)驗(yàn)過程的記錄，非實(shí)驗(yàn)總結(jié)報告 主觀性詞語不能寫入討論中 例如：我們組因?yàn)椴僮鞑皇炀?，‥‥‥ × 本實(shí)驗(yàn)失敗，其原因有：‥‥‥ × 我們組的大鼠在半個小時后只是有點(diǎn)動作緩慢，×,,2 討論：對結(jié)果的分析、解釋，非

11、回答思考題 非實(shí)驗(yàn)過程的記錄，非實(shí)驗(yàn)總結(jié)報告 大鼠注射氯化鋇后出現(xiàn)心律失常，這是因?yàn)槁然^能增加‥‥‥，馬上給予利多卡因搶救的大鼠心律恢復(fù)了正常，利多卡因?qū)儆讪E‥‥。,,討論：對結(jié)果的分析、解釋 現(xiàn)象－說明什么－分析原因 對照鼠在注射生理鹽水后死亡，說明生理鹽水沒有抗心律失常作用。氯化鋇造成大鼠室性快速性心律失常，此時心臟失去正常泵血功能，如果藥物作用時間過長，大鼠就會因缺

12、血缺氧而死亡。,,2 討論： 對照鼠在注射生理鹽水后過了一段比較長的時間心律也恢復(fù)了正常，這是因?yàn)槁然^在體內(nèi)經(jīng)消除過程，藥物濃度已經(jīng)很低，不能再引發(fā)心律失常，‥‥‥,,3 結(jié)論：概括性總結(jié)，與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南嗪魬?yīng)，簡單明了 氯化鋇可致大鼠室性快速心律失常，利多卡因有抗室性快速心律失常作用。 （或）利多卡因有抗氯化鋇所致的大鼠室性快速心律失常作用。,可在報告寫完后附上本組實(shí)驗(yàn)失敗原因分析

13、 我們組‥‥‥簡單說明情況，再分析原因,離體蛙心的制備方法和實(shí)驗(yàn)方法各種因素對蛙心的影響和原理,預(yù)習(xí)內(nèi)容,動物操作基本要求1.能正確使用手術(shù)器械 2.手術(shù)操作要規(guī)范，要獨(dú)立完成 3.能對家兔的血壓、心電、呼吸等指標(biāo)進(jìn)行連接、引導(dǎo)、記錄等4. 不局限于手術(shù)操作，各不相同,4.操作時間,麻

14、 醉： 10min 氣管插管： 20min 頸外靜脈插管： 15min 動脈插管： 15min輸尿管插管： 15min,家兔基本操作,1.捉拿方法，徒手固定方法，手術(shù)臺固定方法2.家兔的耳緣靜脈注射的手法，注射器的使用，針頭的安裝，麻醉的觀察指標(biāo)及效果 3.家兔的剪毛方法，頸部