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1、神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)、傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期的測(cè)定,,實(shí)驗(yàn)安排,理論知識(shí)回顧實(shí)驗(yàn)原理講解實(shí)驗(yàn)方法和步驟,教員講解,討論、總結(jié),教員示教,學(xué)員操作,實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)服實(shí)驗(yàn)中 實(shí)驗(yàn)用品,團(tuán)結(jié)協(xié)作實(shí)驗(yàn)后 器械洗凈入盒,清點(diǎn)本組的儀器 和器材,登記儀器設(shè)備使用情況,實(shí)驗(yàn)要求,理論課與實(shí)驗(yàn)課的關(guān)系,生理學(xué)的特點(diǎn)理論與實(shí)驗(yàn)相輔相成、不可分割,生物電的發(fā)現(xiàn) Galvani(1786)
2、 生物體具有生物電存在 最早證明生物電存在的實(shí)驗(yàn),本次實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容,神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)神經(jīng)干動(dòng)作電位不應(yīng)期的測(cè)定神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度的測(cè)定,目 的,學(xué)會(huì)坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備學(xué)會(huì)記錄神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位的方法識(shí)別和分析坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的波形,測(cè)量其潛伏期、幅值以及時(shí)程,,神經(jīng)纖維的興奮表現(xiàn)為動(dòng)作電位的產(chǎn)生和傳導(dǎo)神經(jīng)的興奮部位對(duì)于未興奮部位之間出現(xiàn)電位差,+ + + + + + + + + + + + + + + + -
3、- - - - - - - - - - - - - - -,- - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + +,- - - -+ + + ++ + + +- - - -,,,,,,,局部電流,原 理,,,興奮區(qū),,,,引導(dǎo)電極,檢流計(jì),,,原 理,,,,,雙相動(dòng)作電位 (biphasic action potential),雙相動(dòng)作電位 (bipha
4、sic action potential),,原 理,刺激偽跡,刺激偽跡,AP,,刺激器正極發(fā)出的刺激電流,經(jīng)標(biāo)本的導(dǎo)電介質(zhì)絕大部分從負(fù)極回流入地,部分從地電極回流入地,尚有小部分電流彌散至兩引導(dǎo)電極并在兩引導(dǎo)電極間產(chǎn)生一電流差信號(hào)。該電流差信號(hào)稱刺激偽跡。,,,潛伏期,,原 理,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,蟾蜍一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物類似離體組織生活條件易于掌握在任氏液的浸潤(rùn)下,神經(jīng)肌肉標(biāo)本可較長(zhǎng)時(shí)間保持生理活性,,實(shí)驗(yàn)器材,實(shí)驗(yàn)步驟
5、,(一)標(biāo)本制備(二)儀器連接(三)觀察與記錄,標(biāo)本制備,破壞腦脊髓 剝皮去內(nèi)臟 分離坐骨神經(jīng) 活性檢測(cè),,,,,,,,,,,,,,+,-,C1,C2,,,,,,,,,,,,,,,,信號(hào)輸入,刺激輸出,神經(jīng)屏蔽盒,,坐骨神經(jīng)標(biāo)本,連接裝置,保持組織活性(任氏液) 神經(jīng)干與電極密切接觸 刺激強(qiáng)度漸增(0.1 V起)、時(shí)間不宜過久,,,,,生理信號(hào)采集系統(tǒng),,動(dòng)作電位波形與刺激強(qiáng)度的關(guān)系,測(cè)量閾強(qiáng)度和最大刺激
6、強(qiáng)度數(shù)值動(dòng)作電位的潛伏期、時(shí)程和幅值觀察雙相動(dòng)作電位和單相動(dòng)作電位波形,觀察與記錄項(xiàng)目,閾強(qiáng)度最大刺激強(qiáng)度,刺激強(qiáng)度與幅值,項(xiàng)目1,記錄,觀察,,,潛伏期,時(shí) 程,,,幅 值,,,項(xiàng)目2,記錄,潛伏期、幅值和時(shí)程,單相動(dòng)作電位(monophasic action potential),項(xiàng)目3,觀察并記錄,本次實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容,神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)神經(jīng)干動(dòng)作電位不應(yīng)期的測(cè)定神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度的測(cè)定,神經(jīng)干不應(yīng)期的測(cè)定,目的和原理,
7、,,驗(yàn)證神經(jīng)干動(dòng)作電位后興奮性的規(guī)律性變化,測(cè)定絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期。,超常期,低常期,相對(duì)不應(yīng)期=不應(yīng)期-絕對(duì)不應(yīng)期,,方法:雙脈沖刺激法,即先給予“條件刺激”,使神經(jīng)產(chǎn)生興奮,按不同的時(shí)間間隔再給予一個(gè)“測(cè)試刺激”,觀察“測(cè)試刺激”是否引起動(dòng)作電位以及動(dòng)作電位的大小,以此來(lái)反應(yīng)神經(jīng)興奮性的變化,測(cè)出相對(duì)不應(yīng)期和絕對(duì)不應(yīng)期。,神經(jīng)干不應(yīng)期的測(cè)定,,,,,,,,,,,,,+,-,C1,C2,,,,,,,,,,,,,,,,信號(hào)輸入,刺激
8、輸出,神經(jīng)屏蔽盒,,坐骨神經(jīng)標(biāo)本,連接裝置,保持組織活性(任氏液) 神經(jīng)干與電極密切接觸 刺激強(qiáng)度漸增(0.1 V起),,,,軟件運(yùn)用,,,進(jìn)入相對(duì)不應(yīng)期;兩刺激之間時(shí)間間隔為不應(yīng)期。,軟件運(yùn)用,,絕對(duì)不應(yīng)期,本次實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容,神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)神經(jīng)干動(dòng)作電位不應(yīng)期的測(cè)定神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度的測(cè)定,神經(jīng)興奮傳導(dǎo)速度的測(cè)定,,,,,,,,+,-,C1,,,,,,,,,,神經(jīng)屏蔽盒,,,,,,坐骨神經(jīng)標(biāo)本,,,,,C3,,,,
9、,,,,,通道1,刺激輸出,,C2,通道2,儀器連接,保持組織活性(任氏液) 神經(jīng)干與電極密切接觸 刺激強(qiáng)度漸增(0.1 V起),,數(shù)據(jù)處理→區(qū)間測(cè)量,t1,t2,,,,,,,,+,-,C1,,,,,,,,,,神經(jīng)屏蔽盒,,,,,,坐骨神經(jīng)標(biāo)本,,,,,C3,,,,,,,,,通道1,刺激輸出,,C2,通道2,△S= C2 - C1,儀器連接,,,△t = t2 - t1△S = C2 C1間距 V = ——————
10、,C2 C1間距兩潛伏期之差,傳導(dǎo)速度計(jì)算公式,標(biāo)本制備,破壞腦脊髓 剝皮去內(nèi)臟 分離坐骨神經(jīng) 活性檢測(cè),思 考 題,通常記錄到的雙相動(dòng)作電位為何在波形、幅值上不對(duì)稱?隨著刺激強(qiáng)度的增加,神經(jīng)干動(dòng)作電位的幅值有何變化? 是否符合動(dòng)作電位的“全或無(wú)”規(guī)律?為什么?如果用刺激電極與引導(dǎo)電極間的距離(s)除以時(shí)如果神經(jīng)干標(biāo)本足夠長(zhǎng),將刺激電極與引導(dǎo)電極距離加大,動(dòng)作電位可出現(xiàn)數(shù)個(gè)波峰或突起,試解釋其原因?如果用刺
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