甘草次酸對豚鼠單個心室肌細胞動作電位的影響.pdf

1、　　背 景：心律失常是指心臟沖動的頻率、節(jié)律、起源部位、傳導速度或激動次序的異常,其為臨床心血管系統(tǒng)常見病、多發(fā)病,病機錯綜復雜,種類繁多,甚至造成猝死,嚴重危害患者的身體健康。臨床醫(yī)師在臨床工作中對心律失常的有效處理是一項重要任務。心律失常治療目前仍以藥物治療為主,但是這些藥物在臨床治療心律失常的同時也有不同程度的致心律失常的作用。研究能夠多靶點干預、恢復離子通道正常生理功能的藥物是今后藥物研發(fā)的方向。中醫(yī)藥以其悠久的歷史,確切的療效

2、,在臨床應用治療心律失常方面發(fā)揮了不錯的療效。甘草在臨床上被廣泛用于抗心律失常的中藥復方組成中,甘草次酸(Glycyrrhetinic acid 1 Gta)是甘草的主要有效物質(zhì),實驗研究證實 Gta具有對抗實驗性心律失常的作用,但是其抗心律失常機制尚不清楚。本實驗正是基于膜片鉗技術(shù),以期從離子通道水平探明Gta抗心律失常的藥理機制。
　　目 的： 通過應用膜片鉗技術(shù),進行豚鼠心肌細胞外灌流Gta單體藥液,觀察Gta單體藥液對豚

3、鼠單個心室肌細胞用藥前后以及洗脫后全細胞動作電位(AP)的變化,探討Gta是否通過影響心肌細胞的離子通道電流發(fā)揮抗心律失常作用,闡述Gta抗心律失常作用的藥理機制。
　　方 法： 實驗分為Gta 4.7×10-3g/L(大劑量組)、4.7×10-4g/L(中劑量組)和4.7×10-5g/L(小劑量組)三個劑量組,每組觀察五個離體豚鼠心室肌細胞用藥前后以及洗脫后的動作電位各項指標的變化。利用自制Langendorff體外心臟灌流系

4、統(tǒng)急性分離豚鼠心室肌細胞,分離所得細胞液用塑料離心管保存,放置于4℃冰箱中穩(wěn)定一小時以后待用。膜片鉗實驗中選擇桿狀,外形完整,透光度好,橫紋清晰無顆粒的細胞進行實驗研究。通過全細胞膜片鉗記錄技術(shù)進行全細胞記錄,細胞封接、破膜完成后,給予(1-2)nA刺激誘發(fā)動作電位。以相同方法分別誘發(fā)出細胞灌藥前后以及洗脫后的動作電位后記錄Gta單體溶液對單個豚鼠心室肌細胞用藥前后及洗脫后的動作電位,用美國Axon公司的 Clampex10.1軟件分析

5、實驗所得的動作電位圖形,比較用藥前后以及洗脫后動作電位幅值(APA)、復極50%的全細胞動作電位時程(APD50)、復極90%的全細胞動作電位時程(APD90)和復極50-90%的全細胞動作電位時程(APD50-90)的變化。
　　結(jié) 果：4.7×10-3g/L Gta單體溶液使APA從用藥前(122.1±4.7)mV減小至用藥后(107.9±6.6)mV(n=5,P<0.01), APD50從用藥前(508.5±84.8)ms

6、延長至用藥后(759.7±63.5)ms(n=5,P<0.05), APD90從用藥前(533.4±82.7)ms延長至用藥后(799.4 ± 56.3)ms(n=5,P<0.05), APD50-90從用藥前(24.9 ± 9.4)ms延長至藥后(38.3±12.1)ms(n=5,P<0.05)(表1)。4.7×10-4g/L Gta 單體溶液與各項指標的變化趨勢與4.7×10-3g/L Gta 單體溶液基本 一致(表2)。4.7×1

7、0-5g/L Gta 單體溶液對單個豚鼠心室肌細胞全細胞動作電位的各項指標的變化沒有明顯的影響作用。
　　結(jié) 論： ① Gta 單體藥液使豚鼠心室肌細胞APA減小,提示藥物可能會抑制0相INa+,通過抑制快鈉通道使傳導速度減慢,阻斷折返激動發(fā)揮抗心律失常作用。
　?、?Gta 單體藥液使豚鼠心室肌細胞APD90延長,提示藥物可能對豚鼠心室肌細胞的內(nèi)向鈣離子電流(ICa-L)有促進效應和外向鉀離子電流(IK+、IK1、IK

8、r)有抑制效應,延長動作電位的不應期,減慢心率,發(fā)揮對抗快速性心律失常的作用。
　?、?Gta 單體藥液使豚鼠心室肌細胞APD50延長,提示藥物可能對動作電位 2相平臺期ICa-L起促進效應或者對IK+有一定的抑制效應,從而使心肌細胞平臺期延長,減慢復極速率,延長有效不應期發(fā)揮抗心律失常作用。
　?、?Gta 單體藥液使豚鼠心室肌細胞APD50-90延長,提示藥物可能抑制3相外向的鉀離子電流IK1、IKr,延遲復極化過程