2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、心室纖顫(ventricular fibrillation)是引起心搏驟停(cardiac arrest)和心臟猝死(sudden cardiac death)最常見的原因,通過對病人的病因?qū)W、基因?qū)W研究和動物模型研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)生常常是由于心臟離子通道的異常而出現(xiàn)。特發(fā)性室顫是遺傳性室顫的一種類型,由于其病因未知和臨床癥狀隱蔽而具有極高的致死率。前期有研究提示一種家族特發(fā)性室顫的發(fā)生與二肽基肽酶樣蛋白(DPP)的亞型6(DPP6,又稱DP

2、PX)的表達(dá)升高密切相關(guān),DPP6的異常高表達(dá)可引起家族特發(fā)性室顫的病理機(jī)制目前未知。
  DPP6是一種公認(rèn)的Kv4通道調(diào)節(jié)亞基,而后者是介導(dǎo)心臟中瞬間外向鉀電流(Ito)的主要通道,對正常心律的維持起重要作用,但目前對DPP6在心臟中的作用尤其是對心律失常發(fā)生的影響很少有報道,目前認(rèn)為DPP6異常導(dǎo)致心臟(尤其是浦肯野纖維)Ito電流增大是導(dǎo)致室顫的一個主要原因。雖然DPP6是Kv4通道的調(diào)節(jié)亞基,但有研究在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)DPP

3、6除影響A型鉀電流外,對鈉通道也有影響,并且發(fā)現(xiàn)在沒有Kv4通道表達(dá)的區(qū)域也有DPP6的表達(dá)。由此我們提出一個重要的問題,DPP6是否對心臟其它的離子通道也具有調(diào)節(jié)作用進(jìn)而影響室顫的發(fā)生。為回答此科學(xué)問題,本研究將在豚鼠心室肌細(xì)胞成功過表達(dá)DPP6后,通過觀測過表達(dá)DPP6對豚鼠心室肌細(xì)胞動作電位以及相關(guān)離子通道(如鈉通道、L型鈣通道等)的影響來發(fā)現(xiàn)其可能的細(xì)胞電生理學(xué)機(jī)制,此研究將為揭示DPP6在某種特發(fā)性室顫的病因、病理機(jī)制、疾病的

4、預(yù)防和治療提供重要的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),具有重要的基礎(chǔ)研究和臨床意義。
  目的:(1)評價腺病毒介導(dǎo)的DPP6過表達(dá)載體在豚鼠心室肌細(xì)胞的過表達(dá)效果(2)過表達(dá)DPP6對豚鼠心室肌細(xì)胞的動作電位的影響。(3)過表達(dá)DPP6對豚鼠心室肌離子通道(鈉通道、L型鈣通道、IKr、IKs)的影響及機(jī)制。
  方法:(1)利用熒光顯微鏡觀測腺病毒攜帶的綠色熒光蛋白,實(shí)時定量PCR(qPCR)技術(shù),蛋白免疫印跡技術(shù)來評價腺病毒介導(dǎo)的DPP6過表達(dá)

5、載體在豚鼠心室肌細(xì)胞的過表達(dá)效率;(2)應(yīng)用全細(xì)胞電流鉗技術(shù)記錄培養(yǎng)后的豚鼠心室肌細(xì)胞的動作電位,觀察過表達(dá)DPP6對心室肌細(xì)胞動作電位的影響;(3)利用電壓鉗技術(shù)檢測在豚鼠心室肌細(xì)胞過表達(dá)DPP6對鈉通道、鈣通道以及IKr、IKs電流的影響及其機(jī)制。
  結(jié)果:(1)感染DPP6過表達(dá)腺病毒的豚鼠心室肌細(xì)胞培養(yǎng)48小時后,用熒光顯微鏡可觀測到心室肌細(xì)胞有綠色熒光蛋白的表達(dá);通過qPCR技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)DPP6 mRNA的表達(dá)水平明顯

6、提高;利用蛋白免疫印跡技術(shù)發(fā)現(xiàn)DPP6蛋白表達(dá)明顯提高;(2)過表達(dá)DPP6的豚鼠心室肌細(xì)胞與對照相比,動作電位時程顯著縮短,0相除極速率加快;(3)過表達(dá)DPP6的豚鼠心室肌細(xì)胞鈉電流密度顯著增加,激活曲線和失活曲線向超極化方向移動,且激活曲線移動更顯著,復(fù)活曲線無顯著變化;L型鈣電流密度顯著降低,激活曲線向去極化方向移動,失活曲線無變化;IKr和IKs無明顯變化。
  結(jié)論:(1)前期構(gòu)建的腺病毒介導(dǎo)的DPP6過表達(dá)載體能夠成

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