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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文Nav1.5-E3抗體對(duì)豚鼠心室肌細(xì)胞鈉電流的影響姓名:史鈺芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):內(nèi)科學(xué)(心血管?。┲笇?dǎo)教師:程龍獻(xiàn)20070501華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 3第二部分 Nav1.5-E3 抗體對(duì)豚鼠心室肌細(xì)胞鈉電流的影響 目的 Nav1.5 是產(chǎn)生心室肌細(xì)胞鈉電流的主要成分;Nav1.5-E3 抗體是利用 E3靶向作用研制出的鈉通道亞型
2、特異性抗體。本實(shí)驗(yàn)部分旨在通過(guò)全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)了解該抗體對(duì)豚鼠心室肌細(xì)胞鈉電流的影響。 方法 用急性酶解法獲得成年豚鼠單個(gè)心室肌細(xì)胞,分別給予不同稀釋濃度的抗體(15 µg/ml)(室溫下)處理 10 min,并行實(shí)驗(yàn)分組:①1:100 抗體稀釋組:給予 0.15 µg/ml 抗體處理;②1:50 抗體稀釋組:給予 0.30 µg/ml 抗體處理;③1:25 抗體稀釋組:給予 0.60 µg/
3、ml 抗體處理及④對(duì)照組(未給予抗體處理) 。而后分別進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)測(cè)定鈉電流并計(jì)算電流密度。數(shù)據(jù)采用 one-way 方差分析及 SNK 檢驗(yàn)、Dunnett 檢驗(yàn)。 結(jié)果 與對(duì)照組(未加抗體處理)相比較,0.15、0.30 和 0.60µg/ml 的 Nav1.5-E3抗體分別使 INa 峰值從 (0.026 296±0.004 436) nA/pF 降至 (0.018 41±0.007 161
4、) nA/pF(P﹤0.01, n=10) 、 (0.013 484±0.002 933) nA/pF(P﹤0.01, n=9)和 (0.012 738±0.004 554)nA/pF(P﹤0.01,n=8),并使 INa 的 I-V 曲線上移,激活電位、峰電位和翻轉(zhuǎn)電位無(wú)明顯改變。但三個(gè)不同濃度抗體處理組之間的差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05) 。 結(jié)論 Nav1.5-E3 抗體可抑制心室肌細(xì)胞鈉電流,但
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