藜蘆定增強(qiáng)反向INCX誘導(dǎo)家兔心室肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載和動(dòng)作電位異常延長(zhǎng).pdf

1、目的:
　　 研究藜蘆定(veratridine,VER)對(duì)家兔心室肌細(xì)胞持續(xù)鈉電流(persistent sodiumcurrent,INa.P)、Na+/Ca2+交換電流(Na+/Ca2+ exchange current,INCX)、鈣瞬變及動(dòng)作電位(action potential,AP)的影響,并探討其引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載和增強(qiáng)心肌收縮的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法:
　　 應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗記錄技術(shù)、可視化

2、動(dòng)緣探測(cè)系統(tǒng)及細(xì)胞內(nèi)鈣測(cè)定系統(tǒng)和多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng),分別記錄INa.P、INCX、鈣瞬變及AP,并用河豚毒素和雷喏嗪進(jìn)行干預(yù)。
　　 結(jié)果:
　　 給予心室肌細(xì)胞10、20μmol/L VER后,INa.P和反向INCX電流密度均增大,INa.P電流密度由-0.221±0.1248增至-0.610±0.1293和-2.151±0.1360 pA/pF(P＜0.01,n=10),反向INCX電流密度由1.623±0.

3、1235增至2.189±0.0901和2.576±0.1134 pA/pF(P＜0.05,n=10),再加入4μmol/L河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)后,上述兩項(xiàng)指標(biāo)均明顯回復(fù),INa.P和反向INCX電流密度分別回復(fù)到-0.074±0.1405和1.688±0.1508 pA/pF(P＜0.05,n=10)。在另一組實(shí)驗(yàn)中,特異性INa.P阻斷劑,雷喏嗪(ranolazine,RAN)也明顯的抑制由VER誘發(fā)增大的IN

4、a.P和反向INCX。加入2.5μmol/L VER后,心室肌細(xì)胞最大收縮速率,收縮幅度和鈣瞬變基線(舒張期Ca2+濃度)均增大,心室肌細(xì)胞最大收縮速率由-0.91±0.29增至-1.53±0.29μm/s(P＜0.01,n=7),收縮幅度由0.10±0.04增至0.16±0.04μm(P＜0.05,n=7),鈣瞬變基線由1.21±0.08增大為1.37±0.12(P＜0.05,n=7),加入2μmol/L TTX后上述三項(xiàng)指標(biāo)均明顯減

5、小,心室肌細(xì)胞最大收縮速率減小到-0.86±0.24μm/s(P＜0.01,n=7),收縮幅度減小到0.09±0.03μm(P＜0.01,n=7),鈣瞬變基線降低為1.17±0.09(P＜0.05,n=7)。VER(20μmol/L)可使心室肌細(xì)胞AP復(fù)極至50％(action potential duration at50% repolarization,APD50)和90%的時(shí)間(action potential duration

6、at90% repolarization,APD90)延長(zhǎng),APD50和APD90分別由123.177±23.7016和146.938±24.1505 ms增大到271.896±32.8141和429.793±32.0430 ms(P＜0.01,n=6),其中3例出現(xiàn)早期后除極(early aflerdepolarizations,EADs),加入4μmol/L TTX后APD50和APD90均明顯縮短,分別減小到99.072±22.8

7、141和163.838±26.0647 ms(P＜0.01,n=6),3例EADs均消失。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:(1)VER作為特異性INa.P的開放劑,可引起心室肌細(xì)胞INa.P增大而產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)Na+超載,繼而通過反向INCX的增大導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載。(2)由VER誘導(dǎo)增大的心室肌細(xì)胞INa.P還可引起心室肌細(xì)胞APD延長(zhǎng),誘發(fā)EADs。(3)TTX對(duì)由VER引起的上述指標(biāo)的異常變化均有明顯抑制作用,說明上述指標(biāo)的異常變化是由INa.P增