實(shí)驗(yàn)六細(xì)菌生理生化實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)六 細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)?zāi)康撵柟涛⑸餆o菌接種技術(shù)；了解細(xì)菌鑒定中常用的生理生化實(shí)驗(yàn)的原理和方法,微生物的生理生化反應(yīng),微生物細(xì)胞在酶的催化下進(jìn)行各種各樣的生理生化反應(yīng)把微生物細(xì)胞在一定的條件下培養(yǎng)，通過觀察生理現(xiàn)象和檢查代謝產(chǎn)物，可以了解微生物的代謝過程和代謝的特點(diǎn)由于不同的微生物可能具有不同的酶，代謝途徑和代謝產(chǎn)物可能也有不同，生理生化反應(yīng)是微生物分類鑒定的重要指標(biāo)之一。,淀粉水解實(shí)驗(yàn),,,淀粉培養(yǎng)基,,+,淀粉培養(yǎng)

2、基,+,接種,,,+,,,,,,,變色圈，水解圈,培養(yǎng)24h,,加盧哥氏碘液I-KI,結(jié)果： 有水解圈—淀粉水解實(shí)驗(yàn)陽性，用 + 表示； 無水解圈—淀粉水解實(shí)驗(yàn)陰性，用 - 表示；,糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),原理：丙酮酸裂解生成乙酰CoA與甲酸，甲酸在酸性條件下在甲酸氫解酶作用下可進(jìn)一步裂解生成H2和CO2——產(chǎn)酸產(chǎn)氣缺少甲酸氫解酶——產(chǎn)酸不產(chǎn)氣步驟：配制糖發(fā)酵培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h)——觀察結(jié)果結(jié)果：紫色無氣泡，既不產(chǎn)酸也

3、不產(chǎn)氣用 - 表示；黃色無氣泡，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，用 + 表示；黃色且有氣泡，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，用 0 表示。,甲基紅實(shí)驗(yàn)（M.R實(shí)驗(yàn)）,原理微生物進(jìn)行混合酸發(fā)酵，產(chǎn)生各種有機(jī)酸——pH下降——加入指示劑甲基紅——紅色步驟：配制蛋白胨水培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h) ——加入指示劑甲基紅1~2滴——觀察結(jié)果結(jié)果： 紅色——M.R實(shí)驗(yàn)陽性，用 + 表示； 不變色——M.R實(shí)驗(yàn)陰性，用 - 表示；,V.P實(shí)驗(yàn),V.P實(shí)驗(yàn),步驟：

4、配制蛋白胨水培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h) ——5~10d 40%KOH, 5~10d 5%a-奈酚和少量肌 醇 ，取出塞子，用力震蕩，保溫（37度15~30min）——觀察結(jié)果結(jié)果： 紅色——V.P實(shí)驗(yàn)陽性，用 + 表示； 不變色——V.P實(shí)驗(yàn)陰性，用 - 表示。,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,以組為單位進(jìn)行淀粉水解實(shí)驗(yàn)、糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、 V.P實(shí)驗(yàn)和M.R實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)菌種：淀粉水解實(shí)驗(yàn)、糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)：大腸桿菌、蘇云金芽孢桿菌V.P實(shí)驗(yàn)和

5、M.R實(shí)驗(yàn)：大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)報(bào)告：1、列表記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果2、思考題：第4小題,四大類細(xì)胞型微生物菌落的鑒定,初步鑒定,確證：顯微鏡觀察,微生物菌落特征的記錄和描述,菌落形態(tài)：形狀，邊緣情況大小：表面狀況：濕潤、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或薄，是否粉末狀質(zhì)地：致密或疏松蔓延程度：與培養(yǎng)基結(jié)合程度顏色（正面、反面、邊沿、中心）氣味,示例,將菌株在查氏瓊脂平板上25 ℃培養(yǎng)7d 后菌落直徑18~19mm ，