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1、疑難血型淺析,佛山市第一人民醫(yī)院輸血科 蔡葵,主要內(nèi)容,常見(jiàn)結(jié)果解析 吸收放散試驗(yàn) 疑難案例分析,2,常見(jiàn)血型檢測(cè)疑難結(jié)果,血型結(jié)果與歷史結(jié)果不符合ABO正反血型結(jié)果不吻合(常見(jiàn))Rh血型反應(yīng)弱混合視野,導(dǎo)致疑難的因素,技術(shù)因素不規(guī)則抗體疾病因素亞型其它,1. 主觀技術(shù)因素:,(1) 試劑貯存不當(dāng) (2) 使用技術(shù)錯(cuò)誤
2、 (3) 使用錯(cuò)誤的試劑 (4) 使用污染或失效的試劑 (5) 離心速度不當(dāng),2. 存在IgM性質(zhì)的自家冷抗體,由于冷抗體而導(dǎo)致自身溶血的病人,在低于37℃時(shí)血細(xì)胞自發(fā)凝集,影響正反定型??捎肈TT(二硫蘇糖醇)或2-ME (二巰基乙醇 )來(lái)處理細(xì)胞及血清來(lái)解除此種IgM抗體引起的干擾。血清的反定型可在37℃進(jìn)行,用O型紅細(xì)胞作為對(duì)照。,3. 抗原表達(dá)弱或缺失:,部分白血病引起A、B抗原表達(dá)太弱:由于A、B抗原表
3、達(dá)太弱,與抗-A或抗-B不反應(yīng),但確實(shí)存在A或B抗原,因此血清中無(wú)相應(yīng)的抗體;亞型。,4. 高水平可溶性血型物質(zhì)的病人:,極少數(shù)有卵巢囊腫的婦女,由于含高濃度的可溶性血型物質(zhì),使抗原減弱或消失,此血型物質(zhì)分泌進(jìn)入血液可以中和抗-A或抗-B。當(dāng)使用未洗滌的RBC用于ABO 定型時(shí),血型物質(zhì)就會(huì)中和抗-A或抗-B,引起假陰性反應(yīng)。,5. 混合視野:,來(lái)自近期輸注非ABO同型紅細(xì)胞病人的血樣 骨髓移植后不久 Tn或A3型紅細(xì)胞,可引起
4、血清學(xué)問(wèn)題的一些臨床疾病,表現(xiàn) 生理及疾病情況A/B抗原表達(dá)減弱 部分白血病溶血 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、 紅細(xì)胞酶缺乏溫性自身抗體
5、 癌癥、低血糖腦病冷性自身抗體 冷凝集素疾病、淋巴瘤、 梅毒、病毒感染串錢(qián)狀凝集 多發(fā)性骨髓瘤ABO同種抗體缺乏或減弱 低(
6、無(wú))丙種球蛋白血癥免疫性ABO抗體 新生兒、妊娠ABO同種抗體的缺乏或減弱 新生兒,〉70歲老年人ABO異常* 分泌腺卵巢囊腫獲得性B抗原* 細(xì)菌感染、結(jié)腸癌、腸梗阻,藥物的使用與血型血清學(xué)疑難問(wèn)題,
7、表現(xiàn) 藥物假凝集 血漿擴(kuò)張劑串錢(qián)狀凝集 右旋糖酐混合外觀紅細(xì)胞 輸異型紅細(xì)胞、骨髓移植獲得額外抗原 同上DAT陽(yáng)性
8、 輸注/注射免疫球蛋白意外的同種抗體 輸注含同種抗體的血漿、 輸注過(guò)免疫球蛋白 以往輸紅細(xì)胞免疫意外的ABO
9、同種抗體 輸注冷沉淀、 因子Ⅷ濃縮劑、血小板,解決ABO正反血型不合的基本原則,12,重復(fù)試驗(yàn)、紅細(xì)胞洗滌后再測(cè)檢查技術(shù)或抄寫(xiě)、甚至抽血環(huán)節(jié)是否存在錯(cuò)誤需要考慮弱反應(yīng)檢查抗體篩查的結(jié)果檢查病人的年齡檢查臨床診斷(疾病和用藥因素),弱反應(yīng)包括抗體減弱與抗原減弱,,加大待檢血清量與抗體減弱
10、 Ac, Bc, Oc, 自身血球?qū)φ?4℃反應(yīng)5分鐘 抗原減弱 吸收放散試驗(yàn),,,,常見(jiàn)結(jié)果解析吸收放散試驗(yàn)疑難案例分析,15,,,,吸收試驗(yàn),放散試驗(yàn),,,試 驗(yàn) 原 理試 劑操 作 步 驟注 意 事 項(xiàng)臨 床 應(yīng) 用,,,,加熱放散法(ABO血型系統(tǒng)),乙
11、醚放散法(Rh血型系統(tǒng)),,試 驗(yàn) 原 理操 作 步 驟注 意 事 項(xiàng)臨 床 應(yīng) 用,吸收放散實(shí)驗(yàn),吸收試驗(yàn)原理,待檢紅細(xì)胞,抗A或抗B血清,,4℃超過(guò)4小時(shí),熱放散試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理,待檢紅細(xì)胞,經(jīng)過(guò)吸收的紅細(xì)胞,,物理?xiàng)l件的改變(加熱),抗體,紅細(xì)胞,試 劑紅細(xì)胞,,,通過(guò)判定抗體性質(zhì)鑒定待檢紅細(xì)胞上抗原的型別,放散,凝集或致敏,,4℃生理鹽水洗滌,,試劑,抗A及抗B分型血清。2%A型及B型紅
12、細(xì)胞。受檢紅細(xì)胞。,操作步驟,1、吸收試驗(yàn): 取受檢紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次,末次洗滌后將鹽水倒盡,取壓實(shí)紅細(xì)胞1份,與等量抗A血清混合,另取1份與等量抗B血清混合,置4℃冰箱超過(guò)4小時(shí),每30分鐘搖動(dòng)試管1次(紅細(xì)胞充分吸收抗體。,離心去掉上清液,以4°C冷鹽水洗滌紅細(xì)胞3~4次,傾去洗滌液,留取壓實(shí)紅細(xì)胞。用1/2容積的生理鹽水, 置56°C水浴10分鐘,每隔15秒振搖1次,使吸附在紅細(xì)胞上的抗體充分放散
13、。,2 、熱放散試驗(yàn),立刻以3000rpm離心,離心式套管內(nèi)放溫水,使溫度盡量保持在56℃,分離得到的上清液即為放散液。將放散液用2%A型和B型試劑紅細(xì)胞鑒定抗體,即可檢出受檢紅細(xì)胞的血型。,結(jié)果判定,懷疑A抗原減弱 :用標(biāo)準(zhǔn)A球與放散液反應(yīng),判定受檢紅細(xì)胞是否含有A抗原。懷疑B抗原減弱:用標(biāo)準(zhǔn)B球與放散液反應(yīng),判定受檢紅細(xì)胞是否含有B抗原。,1、為了獲得最大量的抗體,應(yīng)加大吸收血清量。2、放散時(shí),應(yīng)嚴(yán)格注意溫度和時(shí)間。溫
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