介孔二氧化硅納米顆粒SBA-15致人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性研究.pdf

1、目的：隨著納米技術(shù)的發(fā)展，納米材料的應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)大，已經(jīng)有許多納米粒子在不斷地進(jìn)入人類賴以生存的空間，與此同時，會有越來越多的人暴露于納米材料。因納米顆粒物特有的小尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等，當(dāng)其進(jìn)入生物體后可能引發(fā)特殊的生物效應(yīng)，因此納米材料的生物安全性引起了人們的廣泛關(guān)注。因介孔二氧化硅納米顆粒（MSN）優(yōu)良的結(jié)構(gòu)性能，目前正廣泛地用于藥物載體研究，其進(jìn)入臨床使用后，對人體的暴露更加直接，其生物學(xué)效應(yīng)更加不容忽視。血管

2、內(nèi)皮細(xì)胞是血管官腔與血管壁深層的第一道屏障，既往研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮的損傷是許多心血管疾病的先決條件。本研究選擇介孔二氧化硅SBA-15和人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）為研究對象，探索 SBA-15的心血管毒性效應(yīng)及其機(jī)制,以期為MSN作為藥物載體的安全使用提供理論依據(jù)。
　　方法：將HUVEC暴露于終濃度分別為0(空白對照)、25、50、100、200μg/ml SBA-15和100μg/ml微米二氧化硅(陽性對照)的RPMI1

3、640培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h，采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定SBA-15對HUVEC增殖的抑制作用，異硫氰酸熒光素FITC標(biāo)記膜聯(lián)蛋白Annexin V和核酸染料碘化丙啶（PI）雙染結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測SBA-15對HUVEC細(xì)胞凋亡的影響；二氯熒光乙酰乙酸鹽（DCFH-DA）探針結(jié)合激光共聚焦顯微鏡技術(shù)檢測SBA-15作用下HUVEC細(xì)胞活性氧(ROS)水平的變化，實時熒光定量PCR技術(shù)(qRT-PCR)檢測SBA-15對炎癥因子CR

4、P和MCP-1和細(xì)胞粘附因子ICAM-1和VCAM-1 mRNA表達(dá)水平的影響，Western Blot技術(shù)檢測細(xì)胞粘附因子ICAM-1和VCAM-1蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：與空白對照組比較，各濃度SBA-15均對HUVEC的增殖具有抑制作用，且隨著SBA-15染毒濃度的升高，細(xì)胞生存率下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與空白對照組比較，50、100和200μg/ml SBA-15染毒組HUVEC細(xì)胞凋亡率增高，差異

5、有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；隨著SBA-15染毒濃度的升高，細(xì)胞ROS水平升高；與空白對照組相比，SBA-15染毒組炎癥因子CRP和MCP-1 mRNA和細(xì)胞粘附因子ICAM-1和VCAM-1 mRNA及蛋白的表達(dá)水平均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且隨著SBA-15染毒濃度的升高，表達(dá)水平均呈上升趨勢。
　　結(jié)論：SBA-15具有內(nèi)皮細(xì)胞毒性作用，可抑制HUVEC的增殖；細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死是SBA-15致HUVEC死