土壤中解磷微生物的篩選及誘變育種.pdf

1、磷是影響植物生長的最重要的元素之一，磷肥施入土壤后，大部分可溶性磷酸鹽迅速被固定，變成植物不能利用的形式。同時，大量施用磷肥已經(jīng)帶來資源浪費、環(huán)境污染等諸多弊端。國內(nèi)外大量的研究證明土壤中存在許多微生物，能夠依靠自身的代謝產(chǎn)物或其他生物協(xié)同溶解土壤中的難溶無機磷，將植物難以吸收利用的磷轉(zhuǎn)化為可吸收利用的形態(tài)，具有這種能力的微生物叫做解磷菌或溶磷菌(phosphate-solubilizing microorganisms, PSM)。<

2、br>　　石灰性土壤的特性是含有大量游離的碳酸鈣，土壤中的大部分磷轉(zhuǎn)化成難溶性的磷酸鈣鹽，使磷有效性降低。本文從山西的三個石灰性土樣中進行了解磷細菌的分離和篩選，根據(jù)溶磷圈大小，獲得了7株解磷細菌，并最終篩選到2株具有高效解磷能力的菌株P(guān)W201和PY203。根據(jù)其形態(tài)特征，生理生化特性和16S rDNA序列，將菌株P(guān)W201和PY203分別鑒定為假單胞菌和芽孢桿菌。
　　為了提高菌株的解磷能力，我們利用紫外線和氯化鋰復(fù)合誘變方法

3、對解無機磷假單胞菌PW201和解有機磷芽孢桿菌PY203進行兩次誘變處理，誘變致死率與UV照射時間和LiCl濃度都呈現(xiàn)劑量效應(yīng)，其中UV90s+1％LiCl致死率達99％。經(jīng)解磷圈和測液體培養(yǎng)基中有效磷含量兩種方法反復(fù)篩選，得到突變株P(guān)W201-6-21，PY203-6-13，其解磷能力分別比原始菌株提高了12.6倍和15.2倍。通過傳代實驗，確定它們具有良好的遺傳穩(wěn)定性。
　　影響微生物解磷的因素很多，我們以菌株P(guān)W201-6-

4、21和PY203-6-13為主要研究對象，采用液體培養(yǎng)對其解磷的培養(yǎng)條件碳源、氮源、搖床轉(zhuǎn)速，初始pH進行單因素實驗和響應(yīng)面實驗。發(fā)現(xiàn)各種組合對菌株生長量都有較大影響，其中pH變化是影響菌株生長的主要因素，碳源對菌株生長的影響次之，再次是氮源，搖床轉(zhuǎn)速的影響作用最小。確定了最佳培養(yǎng)條件及組分，PW201-6-21解磷效果最佳條件為:D-果糖14.4g FeSO4.7H2O0.03g MgSO4.7H2O0.3g NaCl0.3g KCl