藥物對離體豚鼠回腸收縮的作用

1、目 的,學習離體小腸平滑肌的制備和灌流。觀察小腸平滑肌的自律性收縮，理解其原理。觀察藥物acetylcholine (Ach、乙酰膽堿），histamine (His、組胺），BaCl2分別對離體豚鼠回腸平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、撲爾敏）為工具藥，初步分析以上藥物的作用原理。,原 理（1）,胃腸平滑肌收縮的自動節(jié)律性（慢波理論：Cajal細胞的生電性鈉泵活動的結果）

2、。,原 理（2）,乙酰膽堿：M膽堿能受體激動藥。Ach與M受體結合，使平滑肌Ca2+通道開放，Ca2+內流↑，肌漿[Ca2+]↑，平滑肌收縮幅度增高。阿托品：M膽堿能受體阻斷藥。阿托品與平滑肌細胞膜M受體結合，阻斷乙酰膽堿與M受體結合，阻斷乙酰膽堿與M受體的激動作用。,原 理（2）,組胺：激動平滑肌細胞膜H1受體，通過激活G蛋白-磷脂酶C系統(tǒng)，使細胞內Ca2+增高，導致平滑肌收縮。撲爾敏：H1受體阻斷藥。撲爾敏與平滑肌細胞膜H1

3、受體結合，阻斷組胺與H1受體結合，從而阻斷組胺對H1受體的激動作用。,原 理（3）,氯化鋇：肌肉興奮劑。Ba2+經鈣通道進入胞漿，使肌漿[Ba2+]↑，平滑肌收縮幅度增高，但泵出障礙；另一方面BaCl2能興奮膽堿能受體，使平滑肌收縮幅度增高。,材 料,豚鼠1只：WT為300 g左右麥氏浴槽，生物信號采集系統(tǒng)，張力換能器。臺氏液， 10-2 g/L乙酰膽堿 、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L組胺， 10-3 g/L撲爾敏、

4、10 g/L BaCl2 溶液。,方 法,1. 實驗裝置準備：打開恒溫水浴37℃---加臺氏液于麥氏浴槽中---95% O2+5%CO2持續(xù)通氣（氣泡一個個逸出為宜）。2. 標本準備：擊昏豚鼠---開腹---減取回腸---沖洗內腔---截取腸段--- 腸段兩端對角穿線--- 固定于麥氏浴槽和換能器上。3. 實驗記錄：打開配置（藥物對離體豚鼠回腸的作用）---零點設置---調節(jié)換能器張力2 g ---穩(wěn)定10-30分鐘（基線和

5、收縮幅度穩(wěn)定）,,,找到盲腸，在離回盲部1cm處剪斷，取出回腸約10cm左右一段，置于盛有冰冷臺氏液的培養(yǎng)皿中，沖洗干凈，將回腸剪成1-1.5cm的幾小段。,標本準備（1）,標本準備（2）,取一段腸管置于盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中，在其兩端對角處分別用縫針穿線，并打結。一端系于浴槽固定鉤上，另一端系在張力換能器的懸臂梁上。,換能器,腸管,,觀察項目,記錄腸段基礎張力，收縮張力，收縮頻率。加入10-2 g/L Ach 0.2ml，觀察并記錄曲

6、線，作用明顯時換液。重復以上Ach劑量，待收縮到最高點時加入1 g/L阿托品 0.2ml，觀察曲線，此時不換液，待曲線基本穩(wěn)定后，再加入相同量的Ach，觀察并記錄收縮曲線，換液。加入10-2 g/L組胺 0.3ml，作用明顯時迅速換液。預先加入10-2 g/L撲爾敏0.2 ml，5 min后（不換液）加入同量組胺，觀察并記錄收縮曲線 ，換液。加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，當作用達到最高點，加入1 g/L阿托品 0.2

7、 ml，觀察并記錄收縮曲線。,實驗結果,Ach 換液 Ach 阿 Ach 換液 His 換液 撲 His Bacl2 阿 (每次換液后穩(wěn)定15m

8、in),,,,,,,,,,,,,,,,,,穩(wěn)定20min,,,,注意事項,注意保持腸管通暢，勿使其封閉。不要把藥物直接滴加到回腸上。每次加的臺氏液量保持相等。加的臺氏液量必須預先加熱到37℃。藥物作用明顯后，盡早沖洗。每次換液后穩(wěn)定10－20min。,實驗結果（1）,曲線描記：標上加藥時間點，藥物名，洗脫時間點。對曲線進行測量：基礎張力，收縮張力。填入表格。,實驗結果（2）,表3. 藥物對離體豚鼠回腸平滑肌張力的影響組

9、別 標本數 基礎張力（g） 收縮幅度（g）乙酰膽堿阿托品+乙酰膽堿組胺撲爾敏+組胺BaCl2BaCl2+阿托品,,,,實驗報告,針對實驗數據，進行結果描述 總結Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2分別對離體豚鼠回腸有什么作用。2. 討論和結論 分析Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2對離體豚鼠回腸平滑肌的作用