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1、離子與藥物對(duì)離體蟾蜍心臟活動(dòng)的影響厲旭云浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?Objectives):學(xué)習(xí)Straub法灌流蟾蜍離體心臟的方法。掌握K+、Ca2+離子濃度變化以及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對(duì)蟾蜍離體心臟的影響。,1. 材料與方法(materials and methods):,1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 蟾蜍,1.2 藥品與試劑 任氏液、0.65%NaCl、2% CaCl2、1% KCl、1:10000 腎上腺素、
2、1:10000 乙酰膽堿、0.1% 阿托品、 3%心得安。,任氏液:用于維持離體蛙心長(zhǎng)時(shí)間搏動(dòng)的生理鹽溶液,由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、碳酸氫鈉、磷酸二氫鈉和蒸餾水配置而成,其電解質(zhì)、晶體滲透壓、PH值與蛙的組織液相近。用于蛙類離體組織、器官的營(yíng)養(yǎng)和濕潤(rùn)。,1.3 儀器和裝置,1.3.1 器材,張力換能器,RM6240C微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng),1.3 儀器和裝置,1.3.1 儀器連接,1.4 離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備,1)蟾蜍毀腦毀脊
3、髓,2)仰臥位固定蟾蜍四肢,3)打開(kāi)蟾蜍胸腔,暴露心臟。,4)插管:在主動(dòng)脈根部剪一斜口,將插管插入動(dòng)脈圓錐, 在心室收縮時(shí)將插管插入心室,結(jié)扎固定。,1.4 離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備,蛙心起搏點(diǎn)的靜脈竇能按一定節(jié)律自動(dòng)產(chǎn)生興奮。因此,只要將離體失去神經(jīng)支配的蛙心保持在適宜的環(huán)境中,在一定時(shí)間內(nèi)仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮活動(dòng)。 蛙心臟沒(méi)有營(yíng)養(yǎng)性血管,斯氏蛙心灌流法,插管直接插入心室,心肌的營(yíng)養(yǎng)是通過(guò)心臟內(nèi)膜液體的直接滲透獲得
4、的。,2. 觀察項(xiàng)目,2.1 觀察正常蛙心搏動(dòng)曲線,記錄心率、心室收縮的幅度,2.2 更換任氏液為0.65%NaCl溶液,記錄心率和收縮幅度。沖洗。,2.3 滴加2%CaCl2 溶液1~2滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。,2.4 滴加1%KCl 溶液1~2滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。,2.5 滴加1:10000腎上腺素溶液1~2滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。,2.6 滴加心得安溶液1~2滴,觀察心跳變化。滴加1:10000
5、腎上腺素 溶液1~2滴記錄心率和收縮幅度。沖洗。,2.7 滴加1:10000乙酰膽堿溶液1~2滴,記錄心率和收縮幅度,沖洗。,2.8 滴加阿托品溶液1~2滴,觀察心跳變化。滴加1:10000乙酰膽堿 溶液1~2滴,記錄心率和收縮幅度。沖洗。,2. 觀察項(xiàng)目,數(shù)據(jù)測(cè)量:舒張期張力、收縮期張力、心率,,,收縮期張力,舒張期張力,3. 結(jié)果(Result):3.1 正常離體蛙心的舒張期張力為1.1g、收縮期張力為2
6、.5g,心率為34bpm。3.2 用0.65%NaCl溶液后灌流,蛙心舒張期張力為1.1g,收縮期張力為1.5g,心率為35bpm.3.2 滴加2%CaCl2溶液1~2滴前蛙心蛙舒張期張力為1.1g,心收縮期張力為2.5g,心率為34bpm,滴加后蛙心舒張期張力和收縮期張力均為3.5g,心率為0bpm。3.3 滴加1%KCl溶液1~2滴前心靜止張力為1.1g,心發(fā)展張力為1.5g,心率為34bpm,滴加后蛙心舒張期張力和收縮期張力
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