實驗二離子及藥物對離體蛙心臟活動的影響

1、大學學生實驗報告大學學生實驗報告開課學院及實驗室：開課學院及實驗室：生科院生化樓6032015年3月1717日學院學院生命科學學院年級、年級、專業(yè)、專業(yè)、班生技131姓名姓名學號學號實驗課程名稱實驗課程名稱動物生理學實驗成績成績實驗項目名稱實驗項目名稱實驗二離子及藥物對離體蛙心臟活動的影響指導指導老師老師[實驗目的實驗目的]1學習離體蛙心灌流的實驗方法。2觀察Na、K、Ca三種離子及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。[實驗原理實

2、驗原理]1心臟的正常節(jié)律性活動需要一個適宜的內環(huán)境，內環(huán)境的變化直接影響著心臟的正常活動。本實驗在蛙心的灌流液內人為地加入一些物質而改變心臟活動的內環(huán)境，觀察心臟活動有何變化。2心肌細胞的生理特征：電生理特征：自律性，興奮性，傳導性機械生理特征：收縮性[實驗對象實驗對象]青蛙[實驗器材和藥品實驗器材和藥品]1器材器材生物信號采集系統(tǒng)、張力換能器(10g)、蛙類手術器械1套、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、雙凹夾、萬能支架、滴管、150ml小燒

3、杯4個、任氏液。2藥品藥品0.65％氯化鈉、2％氯化鈣、1％氯化鉀、1：10000腎上腺素、1：10000乙酰膽堿等。[實驗步驟實驗步驟]1離體蛙心的制備2觀察項目(1)記錄心臟在僅有任氏液時的收縮曲線，觀察心率及收縮幅度，作為正常對照。(2)吸去管內的任氏液，換以等量0.65％NacCl，觀察并記錄心跳的變化。(3)等量任氏液換洗，待心跳恢復正常后，加入5%NaCI1—2滴，記錄觀察心跳的變化。(4)等量任氏液換洗，待心跳恢復正常后，

4、加入2％CaCl21—2滴，記錄觀察心跳的變化。(5)等量任氏液換洗，待心跳恢復正常后，加入l％KCl1～2滴，記錄觀察心跳的變化。(6)等量任氏液換洗，待心跳恢復正常后，加入1：l0000腎上腺素1～2滴，記錄并觀察心跳的變化。(7)吸去管內的任氏液，換以等量4攝氏度任氏液，觀察并記錄心跳的變化。(8)等量任氏液換洗，待心跳恢復正常后，加入2.5%NaHCO31—2滴，記錄觀察心跳的變化。因可能是因為做完鈣離子對心臟活動影響后，用任氏

5、液沖洗心臟不徹底，導致有鈣離子殘留，也可能是其他因素，影響實驗結果。6、滴加、滴加0.01%Adr0.01%Adr溶液溶液滴加腎上腺素后，蛙心收縮增強，心臟舒張完全，描記的心搏曲線幅度明顯增大。其作用機理是：腎上腺素可與心肌細胞膜上的B受體結合，提高心肌細胞和肌漿網(wǎng)膜Ca2通透性，導致肌漿中Ca2濃度增高，使心肌收縮增強。另外，理論上，腎上腺素還有降低肌鈣蛋白與Ca2親和力，促使肌鈣蛋白對Ca2的釋放速率增加，提高肌漿網(wǎng)膜攝取Ca2的速

6、度，刺激Na與Ca2交換，使復極期向細胞外排出Ca2的作用加速。這樣將使心肌舒張速度增快，整個舒張過程明顯增強。但是，所測得的心率變化減弱，可能是其他因素所造成的。7、置換置換4攝氏度任氏液攝氏度任氏液當置換成低溫的任氏液時，細胞活性下降，導致其興奮性和收縮強度均減弱。8、滴加滴加2.5%NaHCO32.5%NaHCO3溶液溶液加入堿性溶液，可使細胞內氫離子外逸，與胞外鉀離子進行H—K交換，鉀離子外流減少，細胞膜電位減少。另外，堿也使細

7、胞液中鈣離子濃度降低，比如形成碳酸氫鈣沉淀，內流的鈣離子減少，從而導致心肌收縮力減弱。9、滴加、滴加3%3%乳酸乳酸加入酸性溶液，加速胞外氫離子進入胞內，使得去極化程度加強，從而導致心肌收縮加強。1010、滴加、滴加0.01%Ach0.01%Ach溶液溶液滴加乙酰膽堿后，蛙心收縮減弱。其機理為：乙酰膽堿與心肌細胞膜M受體結合；一方面提高心肌細胞膜K通道的通透性，促使K外流，復極過程中K外流增加，動作電位2、3期縮短，Ca2進入細胞內減少

8、，使心肌收縮減弱；另一方面乙酰膽堿可直接抑制Ca2通道，減少Ca2內流，進而使心肌收縮減弱。1111、加、加2滴0.01%0.01%阿托品和阿托品和0.01%Ach0.01%Ach與只加乙酰膽堿相比與只加乙酰膽堿相比加了阿托品后再加乙酰膽堿的牛蛙心臟跳動無明顯變化。因為阿托品能與心肌細胞膜的M膽堿受體結合，妨礙乙酰膽堿與其結合，從而起抗膽堿作用。但由于心臟本身的緣故使每次收縮的時間增加了。附：圖1開始時，心率變化圖20.65%NaCl