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文檔簡介
1、目的:通過建立離體幼兔心臟順行灌注模型,研究妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)孕婦血清總膽汁酸濃度水平范圍內(nèi)的結(jié)合膽酸對未成熟心臟功能的影響及可能機(jī)制。探討ICP胎兒心臟損傷及猝死原因。 方法:利用Langendorff離體心臟灌流系統(tǒng)建立幼兔心臟順行灌注模型。42只新西蘭幼兔(兔齡2~3周)隨機(jī)分為7組(n=6),各組K-H液平衡灌注10min,心臟穩(wěn)定跳動后,對照組用K。H液持續(xù)灌注120min;GCo.05、GC0.3、Gc3.
2、0組分別用含甘氨膽酸鈉0.05mm、0.3mM、3.0mm的K.H液持續(xù)灌注120min;TC0.05、Tc0.3、TC3.0組分別用含?;悄懰徕c0.05mM、0.3mm、3.0mm的K.H液持續(xù)灌注120min。平衡建立、實驗開始時刻記為0min,分別在0min、60min、120min時刻點(diǎn)通過ALC-MPA多道生物信號分析系統(tǒng)測量各組心功能指標(biāo):心率(HR)、左心室收縮峰壓(LVPSP)、左心室內(nèi)壓上升最大速率(+dp/dtmax
3、)及冠脈流量(CF),測定冠脈流出液肌酸激酶(CK)值;全程記錄左室搏動圖形,行心律失常評分(AS);灌注末取左心室組織測定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、三磷酸腺苷(ATP)含量,電鏡觀察心肌超微結(jié)構(gòu)變化并采用TUNEL法測定凋亡心肌細(xì)胞,計算凋亡指數(shù)(apoptoticindex,AI)。 結(jié)果:1.幼兔心臟隨結(jié)合膽酸鹽濃度升高,出現(xiàn)不同程度的功能損害。表現(xiàn)為CK漏出量升高、心
4、率減慢、出現(xiàn)心律失常、心肌收縮能力減弱,心輸出量降低。GCo.05、GCo.3、TCo.05組與對照組相比各時刻點(diǎn)HR、LVPSP、+dp/dtmax、CF及Ck值無明顯差別(P>O.05);GC3.o、TCo.3組HR、LVPSP、+dp/dtmax、CF明顯降低(P 5、高(P<0.01)更有較為嚴(yán)重的室速和室顫發(fā)生。2.結(jié)合膽酸鹽損傷幼兔心肌細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能,ATP合成能力下降,心肌細(xì)胞的能量代謝受到影響。同時誘發(fā)氧自由基增多,觸發(fā)脂質(zhì)過氧化,導(dǎo)致未成熟心肌細(xì)胞受損。GCo.05、GCo.3、TCo.05組與對照組相比MDA、SOD、GSH-PX、ATP值無統(tǒng)計學(xué)差異(P>O.05),而GC3.o、TCo.3組和TC3.o組差異顯著(P 6、亡發(fā)生。GCo.05、GC0.3、TC0.05和對照組僅見個別凋亡細(xì)胞,凋亡率(AI)也無統(tǒng)計學(xué)差異(P>O.05)。Gc3.0、Tc0.3、TC3.。組均見明顯心肌細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。Gc3.0、Tc0.3與對照組相比,AI差異明顯(P 7、結(jié)構(gòu)正常;Gc3.0、Tc0.3組心肌肌絲欠整齊,部分肌絲間水腫,線粒體存在輕、中度腫脹,肌漿網(wǎng)擴(kuò)張,可見核濃縮;TC3.。組心肌細(xì)胞明顯腫脹,心肌纖維排列紊亂,肌絲、肌節(jié)溶解破壞嚴(yán)重,線粒體腫脹、空泡化,肌漿網(wǎng)擴(kuò)張,并可見核凋亡現(xiàn)象。 結(jié)論:在ICP孕婦血清總膽汁酸濃度數(shù)量級水平范圍內(nèi),隨結(jié)合膽酸鹽濃度升高,幼兔心臟出現(xiàn)不同程度的功能障礙,心肌細(xì)胞受到不同程度的損傷。未成熟心肌細(xì)胞能量代謝受到影響,誘發(fā)氧自由基增多,觸發(fā)脂質(zhì)過
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