硫化氫對離體大鼠心臟的保存作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:心臟移植是目前解決終末期心臟病的最好方法，但是心臟移植的開展，很大程度上受到供心保護(hù)條件的限制。目前心臟的冷保存時間僅為4-6h，而且臟器長時間的缺血會嚴(yán)重影響移植后受體的生存效果。Eric等[1]發(fā)現(xiàn)將小鼠置于不同濃度（0～80ppm ）的H2S 氣體中，小鼠出現(xiàn)了類假死（ suspendedanimation-like）現(xiàn)象，與某些動物生理條件下自然發(fā)生的冬（夏）眠很相似。我們認(rèn)為此發(fā)現(xiàn)對提高器官保存時間和效果有很大的價值，本

2、實驗的目的是研究H2S對離體大鼠心臟的保存作用，以尋求一種新的供心保存方法，解決心臟移植中的供體保存問題。 方法:成年健康雄性SD大鼠24 只，隨機(jī)分為4 組。戊巴比妥麻醉后迅速取下心臟，懸掛于Langendorff裝置，在37℃下，以95％O2和5％CO2飽和的KH液進(jìn)行灌注，30 分鐘后測定左室壓力增高率(dp/dt)、左室收縮峰壓(LVPSP)、左室舒張末壓（LVEDP）,計算左室發(fā)展壓LVDP=LVPSP-LVEDP。

3、然后將心臟用30ml的4℃心臟心臟保存液（共4 種，詳見下文），以75mmHg壓力經(jīng)主動脈進(jìn)行灌注停跳。自Langendroff裝置取下心臟后置入100ml相同的心臟保存液中，4℃下保存6 小時。取出心臟再次置于Langendorff裝置進(jìn)行灌注，灌注條件同前，記錄心臟自再灌注到復(fù)跳的時間、再灌注30 分鐘后心率(HR)、左心室壓力增高率(dp/dt)、LVPSP、LVEDP,及LVDP。最后取下心臟留取標(biāo)本。4 組心臟保存液為:組1（

4、對照組）：采用未經(jīng)氣體飽和的KH液進(jìn)行停搏、保存；組2 在KH液中加入1 μmol/L NaHS；組3 在KH液中加入1 μmol/L NaHS及10 μmol/L 格列本脲；組4 為St . Thomas Ⅱ液(STH)。留取的心肌標(biāo)本分別進(jìn)行電鏡檢查、心肌含水率測定、ATP含量測定和TUNEL染色。 結(jié)果:1、2、3 和4 組心臟再灌注后+dp/dtmax 恢復(fù)率分別為36.95±10.05％，57.32±10.10％，2

5、7.97±10.48％，56.38±13.90％；-dp/dtmax 恢復(fù)率分別為33.88±6.60％，56.12±8.18％，28.89±16.83％，56.59±6.31％；LVDP 恢復(fù)率分別為37.89±6.69％，62.96±10.24％，29.67±13.61％，61.25±12.20％。組2 及組4 +dp/dtmax、-dp/dtmax、LVDP 恢復(fù)率顯著高于組1 及組3（P<0.001）。1、2、3 和4 組心臟復(fù)

6、跳時間分別為1080.5±427.8 秒，431±119 秒，173±56 秒，7±5 秒，4 組間復(fù)跳時間有顯著差異（P<0.001）；組4 立即復(fù)跳，其余三組均有不同程度室顫發(fā)生。1、2、3 和4 組心臟的心肌含水率分別為84.7±0.9 ％、84.2±1.9％、85.2±1.2％和84.4±0.8％，組間無顯著差異。心肌透射電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察，組2 心肌保存最好，組4 次之，組1 及組3 心肌損傷嚴(yán)重。再灌注后1、2、3 和4 組大

7、鼠心臟心肌ATP 含量（μg/g）分別為155±45，388±40，145±26 和187±28。組2 顯著高于其它三組(P<0.001)，其余三組間無顯著差異(P>0.05)。1、2、3 和4 組心臟心肌調(diào)亡指數(shù)（％）分別為34.2±6.3，11.2±3.3，38.8±5.7和25.2±6.4；組2 心肌細(xì)胞凋亡率顯著低于其它三組（P<0.001）；組1 和組3 顯著高于組4（P<0.05）。 結(jié)論:1、含1 μmol/L