高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素a含量的不確定度評(píng)定

1、高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素A含量的不確定度評(píng)定第1頁(yè)共9頁(yè)高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素A含量的不確定度評(píng)定含量的不確定度評(píng)定黃成安黃康惠潘拾朝張喜金（湯臣倍健股份有限公司，廣東珠海519040）【摘要】目的：目的：全面地分析高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素A含量的不確定度來(lái)源和影響不確定度的因素。方法：方法：根據(jù)檢測(cè)過(guò)程，建立數(shù)學(xué)模型，分析影響不確定度因素的來(lái)源，通過(guò)對(duì)不確定度進(jìn)行量化分

2、析，得出擴(kuò)展不確定度。結(jié)果：結(jié)果：高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素A含量的擴(kuò)展不確定度為1.843%。結(jié)論：結(jié)論：高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素A含量的不確定度主要由標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度校正、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和方法總重復(fù)性引入?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜法；維生素A；數(shù)學(xué)模型；不確定度AssessmentofcontentuncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLCHuangChenganHuangKanghu

3、iPanShichaoZhangXijin(ByHealthCoLtdGuangdongZhuhai519040)【Abstract】Objective:ComprehensivetoanalyzethesourcesinfluencingfactsofcontentuncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLC.Methods:Accdingtothetestingprocessamathematica

4、lmodelwasestablishedtoanalyzethesourcesinfluencingfactsinuncertaintythroughthequantitativeanalysisofuncertaintyobtainedtheexpeduncertainty.Result:TheexpeduncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLCwas1.843%.Conclusion:Themai

5、nsourcesofuncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLCwasregulatingtheconcentrationofstardsolutionpreparationofstardsolutiontherepeatabilityofmethod.【Keywds】HPLCVitaminAMathematicalmodelUncertainty引言維生素A能夠調(diào)節(jié)人體的多種生理機(jī)能，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力

6、，在調(diào)節(jié)體內(nèi)各方面的代謝及促進(jìn)骨骼的生長(zhǎng)發(fā)育上有著極其重要的作用，同時(shí)它也參與視網(wǎng)膜視紫質(zhì)的合成與再生，維持正常的視覺(jué)反應(yīng)，以降低夜盲癥和視力減退的發(fā)生[12]。而維生素A攝入過(guò)量也會(huì)引起副作用，可損害腦組織等，因此維生素A制劑含量的控制十分重要[3]。本文根據(jù)JJF1059.12012《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》[4]，并參考JJG1962006《常用玻璃量器檢定規(guī)程》[5]，結(jié)合檢測(cè)方法和數(shù)學(xué)模型，對(duì)高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素

7、A的含量進(jìn)行不確定度評(píng)估，找出不確定度主要來(lái)源，為方法的優(yōu)化和評(píng)定測(cè)量結(jié)果提供依據(jù)。高效液相色譜法測(cè)定保健食品中維生素A含量的不確定度評(píng)定第3頁(yè)共9頁(yè)精密加入內(nèi)標(biāo)溶液3mL，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度校正精密量取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備母液至50mL容量瓶中，加入適量乙醇搖勻并定容至刻度以乙醇為空白，在325nm波長(zhǎng)處測(cè)定，其平均吸光度為0.4376。維生素A的吸光系數(shù)為1835。2.3.5樣品處

8、理2.3.5.1皂化本實(shí)驗(yàn)樣品為維生素A維生素D軟膠囊(兒童型)。取20粒樣品，擠出內(nèi)容物，攪拌均勻。精密稱取試樣0.1g，置于250mL錐形瓶中，用約50mL乙醇使其溶解，直到顆粒物分散均勻?yàn)橹?。加?5mL10%抗壞血酸水溶液、3mL內(nèi)標(biāo)溶液、10mL氫氧化鉀水溶液(1:1)，混勻。于沸水浴回流60min，使皂化完全。取出立刻冷卻至室溫。2.3.5.2提取及濃縮用50mL的水分兩次將皂化液全部轉(zhuǎn)入500mL分液漏斗中，加入100mL

9、乙醚，輕輕搖動(dòng)，排氣后蓋好瓶塞，室溫下振蕩約10min后靜置分層，將水相轉(zhuǎn)入另一500mL分液漏斗中，按上述方法進(jìn)行第二次萃取。合并醚液，用水洗至近中性。醚液通過(guò)無(wú)水硫酸鈉過(guò)濾脫水，濾液收入500mL圓底燒瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上在50℃2℃充氮條件下蒸至近干(絕不允許蒸干)。殘?jiān)尤脒m量乙醇，超聲波提取溶解，將乙醇轉(zhuǎn)移到25mL容量瓶中，用乙醇洗滌圓底燒瓶數(shù)次，洗滌液全部轉(zhuǎn)移到同一25mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻，過(guò)濾，即得供試品

10、溶液。2.3.5.3測(cè)定待儀器穩(wěn)定后分別吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。3.數(shù)學(xué)模型數(shù)學(xué)模型=10式中：X—樣品中維生素A的含量，mg100g；M—樣品的質(zhì)量，g；V—樣品的稀釋體積，mL；C—樣品溶液中維生素A的濃度，μgmL。由實(shí)驗(yàn)過(guò)程和數(shù)學(xué)模型可以看出，影響維生素A測(cè)定結(jié)果的不確定度因素有：除了樣品的質(zhì)量，樣品的稀釋體積樣品溶液中維生素A的濃度之外，還有高效液相色譜儀進(jìn)樣的重復(fù)性，樣品處理過(guò)程的一致性和