愛必維產(chǎn)品知識sop標準操作方法

1、,需氧菌陰道炎/細菌性陰道病五項聯(lián)合測定技術(shù) 簡介、sop操作與注意事項 中國科學院生物物理研究所,,一、技術(shù)簡介 1、技術(shù)名稱 2、科技技術(shù) 3、技術(shù)特點 4、技術(shù)原理 5、技術(shù)配置組成二、適宜人群三、使用注

2、意事項四、 樣品采集和處理五、 操作步驟六、檢驗結(jié)果的解釋七、產(chǎn)品技術(shù)參數(shù),,一、技術(shù)簡介,,1、技術(shù)名稱 名 稱：需氧菌陰道炎/細菌性陰道病五項聯(lián)合測定試劑盒 商品名：愛必維 簡 稱：ABV,構(gòu)架完善的陰道菌群結(jié)構(gòu)分析,白帶常規(guī)檢測分泌物的清潔度、滴蟲、假絲酵母菌,愛必維檢測陰道微生態(tài)、BV、AV、炎癥,愛必維（ABV）

3、 “愛必維”是全國領(lǐng)先、獨家的陰道微生態(tài)檢測項目，夠檢測出目前國內(nèi)、外的體外診斷技術(shù)無法檢測的需氧菌陰道炎和各種混合型陰道炎。有效提高婦科感染診斷率，將給現(xiàn)有的陰道炎的診斷帶來革命性的進步。,,國內(nèi)外最新研究發(fā)現(xiàn)GTI不僅僅是TV、VVC、BV，且常常不是單一感染 包含需氧菌AV、厭氧菌BV、真菌VVC、滴蟲TV、胞溶性CV等， 且混合感染高達50%?。?/p>

4、 Sebastian Faro ,《陰道炎的鑒別診斷和管理》 “愛必維”（ABV），不僅明顯提高醫(yī)生對目前臨床上較難診斷的混合性陰道感染的診斷率，同時能了解病患陰道內(nèi)乳酸桿菌的生態(tài)狀況，分析陰道微生態(tài)是否正常，為臨床重建陰道微生態(tài)平衡提供實驗室指標。 “愛必維”（ABV），與臨床白帶常規(guī)檢查聯(lián)合使用，構(gòu)建和完善女性陰道分泌物檢測系統(tǒng)。不僅在全國多個省市的三甲醫(yī)院

5、及婦產(chǎn)醫(yī)院廣泛應(yīng)用，同時多次在全國性的婦產(chǎn)科學術(shù)會上得到介紹和推薦。,,2、科技技術(shù)1、“愛必維”是國家“十一五科技支撐計劃” “農(nóng)村與城市社區(qū)適宜技術(shù)的研究”轉(zhuǎn)化 成果?！　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　?/p>

6、　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2、國家科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新基金項目。3、“愛必維” ABV五聯(lián)檢測試劑盒及其制備

7、方法已獲得國家發(fā)明專利。ABV五聯(lián)檢測中 的β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶測定為國家 發(fā)明專利。4、11.5攻關(guān)成果：衛(wèi)生部、科技部、計生委、 中醫(yī)藥管理局聯(lián)合推廣項目。,3、技術(shù)特點“愛必維”五聯(lián)酶譜分析一次呈現(xiàn)：,,檢測項目包括五聯(lián)酶譜分析：1)過氧化氫 反映正常陰道菌群生態(tài)狀況2)唾液酸苷酶 反映BV致病菌進居狀態(tài)3)白細胞酯酶

8、 反映陰道炎癥的狀況4) β-葡萄糖醛酸苷酶 反映AV致病菌進居狀態(tài)5)凝固酶 反映AV致病菌進居狀態(tài) 五項指標同時進行測定聯(lián)合白帶常規(guī)檢查，可構(gòu)建新型陰道疾病評價系統(tǒng)。 全國婦產(chǎn)科感染協(xié)作組推薦診斷方案------ 形態(tài)學（白帶常規(guī)）+功能學檢查（愛必維） “愛必維

9、”五聯(lián)酶譜分析一次呈現(xiàn)，不僅快速篩查、診斷需氧菌陰道炎、細菌性陰道病、混合感染和其它陰道疾病，也可從女性陰道微生態(tài)、清潔度角度評價陰道炎是否治愈，提高合理用藥的程度，降低復(fù)發(fā)率。,臨床意義,分析組合----形態(tài)學/功能學檢查,形態(tài)學分析可發(fā)現(xiàn)所有致病微生物,功能學分析可鑒定這些微生物是?,唯一全面、系統(tǒng)、規(guī)范、準確、標準,全國婦產(chǎn)科感染協(xié)作組推薦診斷方案,+,=,,微生態(tài)病原體,,4、技術(shù)原理 本品檢測包括五項指標。

10、 過氧化氫H2O2 —陰道乳酸桿菌的標志物 唾液酸苷酶 —加德納菌、游動彎曲桿菌等BV致病菌的標志物 白細胞酯酶 —炎性細胞的標志物 β-葡萄糖醛酸苷酶—大腸埃希菌、B族鏈球菌等AV致病菌的標志物 凝固酶 —金黃色葡萄球菌、糞腸球菌和大腸埃希菌等 AV致病菌的標志物,,5、技術(shù)配置組成 AV/BV Se

11、t反應(yīng)裝置（含保護貼條和包裝袋）：由塑料基板和反應(yīng)墊組成，塑料基板上設(shè)有過氧化氫孔、唾液酸苷酶孔、白細胞酯酶孔、β-葡萄糖醛酸苷酶孔和凝固酶孔，規(guī)格為20人份/盒。 配  置反應(yīng)裝置20人份/盒稀釋液 1瓶， ≥8ml/瓶顯色液A 1瓶， ≥1ml/瓶顯色液B 1瓶， ≥1ml/瓶無菌棉簽 20支（物理消毒）

12、軟塑料試管 20個使用說明書 1份套孔比色板 1份,,,,二、適宜人群 什么情況下該做此項檢查？,,1、有陰道感染癥狀的患者 所有的陰道感染都伴有不同程度的陰道微生態(tài)破壞，在治療中使用抗生素、消炎藥和陰道沖洗等都可加重微生態(tài)失衡，而陰道炎的程度與陰道微生態(tài)破壞的程度密切相關(guān)，因此，陰道微生態(tài)狀況與陰道炎的治療方案和療程、療效有

13、密切關(guān)系， 在陰道分泌物常規(guī)檢查中增加愛必維檢查，有利于選擇適宜的治療方案，縮短療程、提高陰道炎的療效。,,2、經(jīng)常規(guī)治療方案治療后的各類陰道炎患者 在我國，目前判斷陰道炎是否治愈主要根據(jù)三項指標，即：癥狀消失、體征消失、病原體消失，在基層則主要是根據(jù)癥狀和體征是否消失作為陰道炎是否治愈的指標。 如果陰道微生態(tài)沒有恢復(fù)正常，即使上述三項指標都已恢復(fù)正常的病例在半年內(nèi)的復(fù)發(fā)率可達60

14、%。 造成陰道炎復(fù)發(fā)率高的重要原因是現(xiàn)有陰道炎的療效評價標準不適宜。,,上世紀90年代初，國外已將陰道微生態(tài)評價列為陰道炎診斷的常規(guī)手段，被列為陰道炎診療方面的一次革命性進展。 對經(jīng)常規(guī)治療方案治療后的各類陰道炎患者做“愛必維”檢查并配合陰道分泌物常規(guī)檢查，可了解陰道生態(tài)恢復(fù)情況，確定是否對患者做生態(tài)治療，達到提高陰道炎的診療效率、降低陰道炎復(fù)發(fā)率的目的。,,3、產(chǎn)后何時恢復(fù)性

15、生活評價 分娩、消毒、沖洗、使用抗生素、激素等原因使陰道乳酸桿菌數(shù)量急劇減少，導(dǎo)致菌群失調(diào)，性生活可加重這種失調(diào)，易造成陰道感染。 北京大學廖秦平等教授研究發(fā)現(xiàn)：微生態(tài)不正常患病治愈后的復(fù)發(fā)率為 43.6%，而微生態(tài)正常者僅為 10.0%。 對產(chǎn)婦做愛必維檢查并配合陰道分泌物常規(guī)檢查，可了解陰道生態(tài)恢復(fù)情況，確定是否恢復(fù)性生活，避免造成產(chǎn)后陰道感染。,,4、妊娠期無癥狀體

16、征者 妊娠期陰道生態(tài)失調(diào)狀態(tài)可引起不良妊娠結(jié)局。妊娠期感染可直接導(dǎo)致包括自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、足月前胎膜早破、羊水感染、產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎和剖宮產(chǎn)后切口感染和圍產(chǎn)兒并發(fā)癥。 在妊娠期無陰道炎的癥狀和體征者中，有36.7%已處于微生態(tài)失調(diào)狀態(tài)。 定期對孕婦進行陰道微生態(tài)評價，可保證孕婦與胎兒的健康，提高生殖健康水平。,,三、使用注意事

17、項,,注意把握四個環(huán)節(jié) 1）正確取樣，部位、量、方法 2）樣品處理（充分混勻、防止過度稀釋） 3）顯色時間、溫度（推薦使用干浴器、48℃、13min） 4）結(jié)果判讀,,四、 樣品采集和處理,,樣品采集和處理1 、受檢者的準備     取樣品前24小時應(yīng)禁止性交、盆浴、陰道灌洗及局部上藥等，以免影響檢查結(jié)果。經(jīng)期樣品會對結(jié)果判讀有影響，所以不宜

18、做該項檢測。2 、樣品的采集     受檢者取婦科檢查常規(guī)體位，使用專用棉簽于陰道后穹窿處旋轉(zhuǎn)10-20秒，以清晰見到棉簽上有分泌物附著為準。如果使用的棉簽太短或棉球太小都不能保證取得適宜的樣品，這些都會影響到檢測結(jié)果。 應(yīng)使用廠商配送的棉簽，取樣前棉簽不得做任何處理，包括使用消毒劑及任何液體,如生理鹽水等。不要取膿性、血性樣品。

19、 如不使用廠商配送的棉簽，則必須保證棉簽長度、棉球大小與廠商贈送的盡可能相同；應(yīng)保證棉簽是經(jīng)過高溫消毒的，不能用環(huán)氧乙烷消毒，后者影響結(jié)果。,,3 、樣品的處理 將帶有樣品的棉簽放入廠商贈送的軟塑料試管中，加入400μl稀釋液（或用稀釋液滴瓶），垂直滴加15滴，反復(fù)擠壓棉簽，使分泌物溢出。樣品應(yīng)及時檢測，不能及時檢測的樣品應(yīng)保存在2-8℃，但應(yīng)在8小時內(nèi)完成檢測。 膿性、血性

20、樣品如何判讀結(jié)果？ 在反應(yīng)孔中滴加兩滴蒸溜水，輕輕晃動反應(yīng)板， 用吸管吸去孔中的液體，觀察反應(yīng)墊的顏色。,,有關(guān)儀器、設(shè)備的說明 1、 微量移液器（100µl、1000µl） 2、 應(yīng)使用恒溫干浴器。 使用干浴器則嚴格按如下要求操作：使用的環(huán)境溫度： 18-25℃設(shè)定溫度48℃開機預(yù)熱不少于10分鐘反應(yīng)時間13分鐘,,五、&#

21、160;操作步驟,1,2,3,,,,將試劑盒從2-8℃取出，平衡到室溫，取出反應(yīng)裝置開始使用. 撕開鋁箔包裝，取出反應(yīng)裝置，輕輕揭掉反應(yīng)孔上的鋁箔條。,在反應(yīng)裝置的五個孔中每孔滴加一滴處理過的樣品，約35µl，以沒過反應(yīng)孔1/2為宜，之后在“唾液酸苷酶”反應(yīng)孔中滴加一滴“顯色液A”。,將反應(yīng)裝置放在37℃水浴箱或恒溫干浴器（48℃）中顯10分鐘后在“凝固酶”反孔加滴加一滴“顯色液B”，繼續(xù)反應(yīng)3分鐘后判讀結(jié)果。,S

22、OP操作：步驟,,注： 開封后的反應(yīng)裝置，須避光放置，并在當天使用完畢。,,六、檢驗結(jié)果的解釋,檢驗結(jié)果的解釋,1. 過氧化氫（反映裝置第一個反應(yīng)孔）：過氧化氫濃度≥2μmol/L，顯紅色、紫色 或藍紫色為陰性，過氧化氫濃度＜2μmol/L，顯藍色為陽性。如顯灰色或灰藍色，則 為樣品稀釋過度，建議重新采樣或判讀為正常。 唾液酸苷酶（反應(yīng)裝置第二個反應(yīng)孔）：不顯色或黃色

23、為陰性，顯棕黃色為膿性 、血性樣品以及膿稠分泌物所致，應(yīng)判讀為唾液酸苷酶陰性；顯紅、紫色或藍色為陽 性，顯藍色表示唾液酸苷酶活性濃度很高。 白細胞酯酶（反應(yīng)裝置第三個反應(yīng)孔）：不顯色為陰性；顯藍色或綠色為陽性。參照標準比色板。“-”和“±”表示白細胞酯酶陰性，“+”、“++”、 “ +++”表示白細胞酯酶陽性。 β-葡萄糖醛酸

24、苷酶（反應(yīng)裝置第四個反應(yīng)孔）：不顯色為陰性，顯藍色或綠色為陽性。 凝固酶（反應(yīng)裝置第五個反應(yīng)孔）：不顯色或黃色為陰性，紫紅色為陽性。 注意：反應(yīng)結(jié)束后，應(yīng)立即判讀結(jié)果，時間在15-20分鐘內(nèi)。,SOP操作：結(jié)果判讀,結(jié)果判讀,臨床常見檢測結(jié)果類型及建議：SNa + H2O2陽性：，陰道微生態(tài)失衡、BV（厭氧菌感染）GADP或GUS陽性+白細胞酯酶(LE)陽性 + H2O2陽性：陰道微生態(tài)失衡，AV(需氧菌感染)

25、。全部指標異常：考慮混合性陰道炎.單純H2O2異常：陰道微生態(tài)失衡，存在陰道感染的高危因素，或陰道感染治療后陰道菌群尚未恢復(fù)，建議使用微生態(tài)制劑治療，并定期復(fù)查。如出現(xiàn)外陰瘙癢等臨床癥狀需及時就診。,,,七、產(chǎn)品技術(shù)參數(shù),產(chǎn)品技術(shù)參數(shù) 1、重復(fù)性： a）批內(nèi)重復(fù)性：≥90%； b）批間重復(fù)性：≥90%； 2、陰性參考品符合率≥90%；

26、 3、陽性參考品符合率≥90%； 有質(zhì)控品，是國內(nèi)唯一獲得批件的。,,最低檢出量過氧化氫≥2µmol/L、唾液酸苷酶≥7 U/L、白細胞酯酶≥9 U/L、β-葡萄糖醛酸苷酶≥15U/L、凝固酶≥20U/L檢出符合率陽性參考品符合率過氧化氫2µmol/L 符合率≥90%唾液酸苷酶7 U/L  符合率≥90%白細胞酯酶

27、9 U/L  符合率≥90%β-葡萄糖醛酸苷酶15U/L  符合率≥90%凝固酶20U/L  符合率≥90%陰性參考品符合率過氧化氫﹤2µmol/L  符合率≥90%唾液酸苷酶﹤7 U/L  符合率≥90%白細胞酯酶﹤9 U/L  符合率≥90%β-葡萄糖醛酸苷酶﹤

28、15U/L  符合率≥90%凝固酶﹤20U/L  符合率≥90%,,陰道分泌物測定的質(zhì)量控制,,,技術(shù)標準,第四部分,,,發(fā)明專利,建立“需氧菌陰道炎/細菌性陰道病五項聯(lián)合測定試劑盒”的企業(yè)標準，編號為YZB/京0057-2010,配套儀器,婦科感染、微生態(tài)評價系統(tǒng) 預(yù)計近期上市,陰道分泌物分析系統(tǒng)VFS--M,顯微圖像分析系統(tǒng),陰道分泌物結(jié)果分析終端,陰道分泌物生化分析儀,,結(jié)束語