什么是檢監(jiān)測？如何在豬場中開展檢測？

1、什么是檢測？什么是監(jiān)測？ 如何在養(yǎng)豬生產(chǎn)中開展血清學(xué)檢測？ 北京愛德士元亨生物科技有限公司 吳俊,溫氏講座,對溫氏而言最重要的是： 產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展！,1.創(chuàng)造價值； 2.符合企業(yè)和員工的利益； 3.選擇適合自身的發(fā)展之路。,有人認(rèn)為：干了規(guī)?；?， 做了產(chǎn)業(yè)化就可以實(shí)現(xiàn)價值。,錯了！,規(guī)?；l(fā)展過程中出現(xiàn)的諸多問題,人難請、急需人才的培養(yǎng)、人難留。豬病多。豬難養(yǎng)。

2、群體健康動態(tài)的變化、效益低下。污染嚴(yán)重、環(huán)保有壓力。對大型養(yǎng)豬企業(yè)認(rèn)識的嚴(yán)重不足：規(guī)?；瘺Q不是傳統(tǒng)規(guī)模豬場規(guī)模、經(jīng)驗(yàn)的累加。缺乏從養(yǎng)豬生產(chǎn)體系上來規(guī)劃、建設(shè)和管理一個需要安全、高效和環(huán)保的綜合系統(tǒng)。,養(yǎng)豬業(yè)管理的系統(tǒng)思考—人管人,當(dāng)你管理3-20個人的時候：靠的是你的能力；當(dāng)你管理20-50個人的時候：可以依靠教育和培訓(xùn)；當(dāng)你管理50個以上員工的時候：需要良好的企業(yè)文化；當(dāng)你管理更多更多的員工、更多豬場的時候：則需要系統(tǒng)。

3、社會資源管理系統(tǒng)；環(huán)境管理系統(tǒng)；人力資源管理系統(tǒng)；生產(chǎn)資料采購管理系統(tǒng)；財(cái)務(wù)管理系統(tǒng)；疾控管理系統(tǒng)；目標(biāo)和過程管理系統(tǒng)；遺傳育種管理系統(tǒng)、愿景激勵管理系統(tǒng)等,養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的系統(tǒng)思考—發(fā)展思路,當(dāng)企業(yè)養(yǎng)殖規(guī)模不斷增大、企業(yè)建設(shè)快速發(fā)展時； 解決發(fā)展方向、開拓、思路的問題； 解決快速發(fā)展中的計(jì)劃、基礎(chǔ)建設(shè)問題； 最重要的是 - 必須同時解決穩(wěn)定、增效的盈利能 力問題。,養(yǎng)豬業(yè)管理的管理思考—三種模式,導(dǎo)向

4、式管理：考核式管理：經(jīng)營式管理：,創(chuàng)造價值,有創(chuàng)造價值的意愿只是一方面。具備和學(xué)習(xí)創(chuàng)造價值的能力才是最重要的。價值是靠養(yǎng)豬企業(yè)中的“所有的人”創(chuàng)造的。企業(yè)的文化、老板的價值取向又決定了“所有的人”創(chuàng)造價值的能力。,,1. 系統(tǒng)能力：2. 對人的尊重：責(zé)任和快樂,了解豬群和環(huán)境和諧的重要性；認(rèn)識豬群福利管理的意義；建立善以待豬的養(yǎng)豬文化（人豬和諧）；協(xié)調(diào)群體和個體之間的社會關(guān)系；挖掘豬群生產(chǎn)潛力及產(chǎn)品的“場情”價值；

5、建立貫徹執(zhí)行管理目的的體系。,養(yǎng)豬業(yè)最重要的需求,現(xiàn)在中國養(yǎng)豬業(yè)最欠缺的是：技術(shù)經(jīng)濟(jì)和系統(tǒng)能力兩大領(lǐng)域的宏觀突破力和把控力。,如何在養(yǎng)豬生產(chǎn)流程中 建立疾病的技術(shù)控制體系,,,2.生物安全體系,,3.豬只免疫力及抗應(yīng)激,,4.預(yù)防接種,,5.抗生素治療,疾病防控的合理體系,1.環(huán)境及隔離,,,,同樣是養(yǎng)豬!!!差別咋這么大呢？？,免疫接種次數(shù)：種豬:70次以上商品豬:10次以上,我們應(yīng)該醒悟了！！,■中國是抗

6、生素生產(chǎn)大國，也是抗生素使用大國：年產(chǎn)抗生素原料大約21萬噸，出口3萬噸給世界人民，其余18萬噸留給自己用（包括醫(yī)療與農(nóng)業(yè)使用），人均年消費(fèi)量138克左右（美國13克，歐洲7國僅10克）■畜牧業(yè)中抗生素的大量無序使用： 占全球抗生素飼料添加劑使用量的50%左右。,是豬場管理者不夠智慧或不想把生產(chǎn)搞好嗎？,其實(shí)大家都在做最容易做到的、最經(jīng)濟(jì)的選擇?。庖咚幬铩⑹萑饩?、有毒食品、生產(chǎn)的種種問題）問題的答案在領(lǐng)導(dǎo)者、人的思想和態(tài)

7、度。,豬場管理和操守最重要的是什么？,“四化”■豬場操作---標(biāo)準(zhǔn)化 標(biāo)準(zhǔn)化操作，無論是誰都按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行?！鲐i場管理---模塊化飼料營養(yǎng)、生物安全、疾病防控、后備豬管理、產(chǎn)房管理、、、、■豬場方案---固定化 有利于正常生產(chǎn)、可控、、■豬場產(chǎn)品---品牌化 品牌化的產(chǎn)品，確保以上方案有效。,豬場必須要有一系列嚴(yán)格執(zhí)行的16條管理方案,列出工作安排的日志，記錄需采取的每一步行動。生產(chǎn)工藝流程及主要生產(chǎn)技術(shù)指

8、標(biāo)。生物安全管理（流行病學(xué)特點(diǎn)、疾病安全、生產(chǎn)環(huán)境清潔和消毒方案）。豬群福利管理（豬的行為、衛(wèi)生條件、采食、飲水、休息條件、通風(fēng)、溫濕度、光照、噪聲、人豬和諧、應(yīng)激等）。飼料生產(chǎn)及各類豬群飼養(yǎng)給食投料管理。各個階段豬只的飼養(yǎng)管理（目標(biāo)與管理要點(diǎn)、管理程序、飼養(yǎng)管理）。種豬選育（選育目標(biāo)、核心場選育、擴(kuò)繁場選育、商品場選育）。豬的人工受精。疫苗接種方案。清潔和消毒接種器材、手術(shù)器械、針頭、接生器具的方案。標(biāo)準(zhǔn)化疾病治療和

9、處理方案?？辜纳x方案?？股乇＝≈委煼桨?。實(shí)驗(yàn)室檢(監(jiān))測方案。食品安全控制。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及報(bào)表管理。,做成技術(shù)管理手冊,落實(shí)創(chuàng)新的技術(shù)通訊,豬場管理者能把這些因素考慮周全并做好嗎？,員工所處的環(huán)境、精神和身體是否處于完全健康的狀態(tài)？豬群福利健康管理的觀念？豬的生理行為、豬的采食、清潔衛(wèi)生條件、清潔充足的自由飲水、休息條件、自由空間、通風(fēng)和新鮮的空氣、溫度和濕度、光照、噪聲等等；生物安全、群體與群體關(guān)系、個體與個體關(guān)系；

10、應(yīng)激、保??；減輕個體疾苦、科學(xué)淘汰非正常個體；真正試著去了解豬只“內(nèi)部和外部”的關(guān)聯(lián)。,成功的養(yǎng)豬事業(yè) 就是在正確的時間做正確的事,時刻發(fā)現(xiàn)“豬的信號”,什么是豬的信號？,外部信號：生產(chǎn)性能指標(biāo)、體況肥瘦狀態(tài)、殘疾行為障礙（腿的狀態(tài)）、冷熱反應(yīng)、排泄物、分泌物、喘氣咳嗽、死胎流產(chǎn)、泌乳行為、豬只轉(zhuǎn)運(yùn)、生產(chǎn)操作情況、進(jìn)攻性行為等。內(nèi)部信號：分子生物學(xué)指標(biāo)、病理學(xué)變化、血液學(xué)指標(biāo)、血清學(xué)指標(biāo)等。信號獲取的手段：現(xiàn)場及臨床觀察

11、、剖檢及病理實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)性能測定、微機(jī)管理系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)室檢測。,活動性興奮性攻擊行為空氣通風(fēng)情況豬的警示聲音分娩去勢咬架公豬的叫聲體溫變化特別需要關(guān)注的群體體況排泄區(qū)與平均值的偏差腹瀉信號懷孕母豬的運(yùn)動性皮膚壞死群體一致性嘔吐物斷奶尿液乳房炎癥產(chǎn)道炎癥尿道炎癥,細(xì)分管理列表填寫情況群體優(yōu)勢等級排序糞便情況飼料狀態(tài)采食量采食區(qū)授精過程寄養(yǎng)行為種豬肢蹄問題探究行為豬只的處理損傷

12、程度指示或標(biāo)記豬肌肉注射免疫及免疫管理仔豬采食感染死亡率成功的因素值得注意的觀察點(diǎn)配種過程返情及流產(chǎn)非生產(chǎn)天數(shù)仔豬擠壓,空間不足豬群的構(gòu)成泌乳期抓豬趕豬光照躺臥行為母體免疫平均水平僵豬本能行為新生仔豬腹瀉發(fā)情病原體豬的路徑電氣控制安靜平和引進(jìn)的豬只稱重消毒過程驅(qū)蟲檢查溫暖-寒冷的信號員工交流會議追蹤,飼養(yǎng)飼喂豬舍隔離轉(zhuǎn)向行為呼吸器官繁殖器官呼吸次數(shù)做出有效

13、的反應(yīng)豬舍小氣候風(fēng)險期風(fēng)險的群體疾病背景檢查皮膚母豬刺激飽腹感應(yīng)激呼叫站立乳房治療效果生產(chǎn)報(bào)表的收集………,管理中的“外部信號”觀察點(diǎn),每天12項(xiàng)健康豬群的觀察信號,吃料、體溫38-39.5度、排便：皮毛：皮毛光亮、不粗亂、體表無寄生蟲、無紅點(diǎn)或紅斑。睡覺：側(cè)臥非趴臥、自然而舒適。飲水：不出現(xiàn)長時間飲水現(xiàn)象；飲水器位置合適；流量合理。尿液：呈較透明的褐黃色；無紅色或其它異常顏色。外陰：陰戶無白色或

14、膿性分泌物；干凈而色澤自然。咳嗽：緩和的咳嗽、間歇性輕微咳嗽、站立用力干咳等，需做進(jìn)一步的診斷和對應(yīng)措施。呼吸：呼吸均勻正常；無腹式呼吸。噴嚏：是否連續(xù)噴嚏、流鼻血、膿性鼻涕。眼睛：明亮、無結(jié)膜炎、無眼屎、無淚斑。肢蹄：無跛行、無外傷；未見蹄裂。乳房：呈杯錐狀、充實(shí)富有彈性；無硬塊、組織增生和腫大。,豬群管理的首要方向,風(fēng)險發(fā)生的位置：任何引發(fā)疾病和應(yīng)激的地點(diǎn)（分娩舍、保育舍、群體移動的豬舍）。風(fēng)險期：豬只最容易出現(xiàn)問題的

15、時刻，或者在以往豬只出現(xiàn)問題的時刻，特別是幾種風(fēng)險疊加的時期需要特別的警惕（如斷奶、轉(zhuǎn)豬、分娩、免疫注射等）。風(fēng)險群體：出現(xiàn)問題概率高的群體（批次），所以風(fēng)險群體是一個很好的控制點(diǎn)，如果風(fēng)險群體表現(xiàn)很好，則整個豬群就可能表現(xiàn)非常好的生產(chǎn)性能穩(wěn)定性（公豬、后備種豬、保育豬）。,風(fēng)險因素,風(fēng)險群體： 新引入豬群的母豬 初產(chǎn)母豬 缺乏運(yùn)動的懷孕母豬 消瘦或過度肥胖的母豬

16、 剛分娩和初生重偏輕的仔豬（﹤1公斤） 在分娩舍很少吃教槽料的仔豬 斷奶仔豬…風(fēng)險期： 斷奶時 飼養(yǎng)員更換 飼料更換 分娩 轉(zhuǎn)豬或后備豬進(jìn)入生產(chǎn)群 各種注射…,母豬前腔靜脈采血,ELISA血清學(xué)檢測是檢（監(jiān)）測豬只“內(nèi)部信號”快速高效的手段,,,ELISA血清學(xué)檢測是檢（監(jiān)）測

17、豬只“內(nèi)部信號”快速高效的手段,,疾病控制新思路,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理：提高人和組織的效率。加強(qiáng)生物安全：特別關(guān)注的是種豬群體、移動和流動的群體；核心是外部阻止和內(nèi)部消除；加強(qiáng)健康檢（監(jiān)）測、引種檢測（抗原和抗體）、隔離措施、閉群、群體馴化。群體逐步凈化（控制）CSF、PR?？茖W(xué)免疫預(yù)防：接種CSF、PR、PRRS、FMD、PCV2等，通過血清學(xué)方法進(jìn)行監(jiān)控和免疫管理。藥物預(yù)防，控制繼發(fā)感染。,技術(shù)中心,生產(chǎn)技術(shù)部,檢測中心,生 產(chǎn)

18、 部,生產(chǎn)計(jì)劃制定與安排,生產(chǎn)問題協(xié)調(diào)與處理,月季年績效分析管理,常規(guī)檢測與凈化,制定疾病防控管理策略,數(shù)據(jù)處理與分析,人工受精管理,風(fēng)險群體檢測,風(fēng)險期檢測,流行病學(xué)調(diào)查,生產(chǎn)工藝流程,生產(chǎn)技術(shù)指標(biāo),飼料生產(chǎn)及投料管理,生物安全管理落實(shí),配懷階段飼養(yǎng)管理,分娩階段飼養(yǎng)管理,生長肥育階段管理,保育階段飼養(yǎng)管理,食品安全管理,產(chǎn)品試驗(yàn)與評估,產(chǎn)品成本及綜合分析,場長,人員教育和培訓(xùn),指導(dǎo)、監(jiān)督和檢查,緊急防疫方案、措施,組織的定位和堅(jiān)韌

19、不拔的方向！,保持盈利能力和群體的穩(wěn)定性！,什么是檢測？,什么是監(jiān)測？,報(bào)告內(nèi)容,,,,,,如何在養(yǎng)豬生產(chǎn)中開展重要疾病的血清學(xué)檢測,什么是檢（監(jiān)）測？,,易感群,感染群,免疫群,,,,,,,,,疾病發(fā)生的通常模式,根據(jù)流行病學(xué)的質(zhì)量作用定律：R=RO×S/N R:有效重現(xiàn)率 RO:基礎(chǔ)重現(xiàn)率 S:感染的動物數(shù) N:總的動物數(shù)R＞1 發(fā)生疾病 R＜1 疾病減少R﹦1

20、 穩(wěn)定,馴化和免疫,免疫丟失,年齡差異外源引進(jìn),感染,康復(fù),疾病致死,耐過死亡,相比較病原不斷的感染，我們更加擔(dān)心傳染過程中病原的變化。,,豬個體的免疫力組成及相互關(guān)系,第一道防線：物理保護(hù)屏障（皮膚、黏膜、消化道、呼吸道、產(chǎn)道、尿道、耳道等各個管道上皮組織及分泌物）第二道防線：非特異性免疫系統(tǒng) 1.組胺 炎癥 阻止致病因子的擴(kuò)散 免疫因子（細(xì)胞介素）

21、 2. 肝臟產(chǎn)生補(bǔ)充系統(tǒng)的保護(hù)性蛋白 3. 血液中的白細(xì)胞(吞噬細(xì)胞\單核細(xì)胞)第三道防線：特異性免疫系統(tǒng) 對入侵的每一個特定抗原（病原體）產(chǎn)生特定的反應(yīng)。,,,36,群體免疫力（Herd immunity）,群體免疫力在不同的豬群中表現(xiàn)出差異性，與個體差異、年齡結(jié)構(gòu)、生產(chǎn)流程、群體病原種類和帶毒狀況等有密切關(guān)聯(lián)。有條件使環(huán)境變好了，疾病容易控制，使病原不發(fā)生疾病。如果環(huán)境改變不了，疾病如何控

22、制？,群體免疫力（Herd immunity）,個體免疫學(xué)已經(jīng)逐漸顯現(xiàn)出它在控制群發(fā)病上的局限性。在實(shí)際豬群中，尤其是經(jīng)過疫苗免疫的豬群中，當(dāng)有免疫力的豬只數(shù)量達(dá)到一定量的時候，群體中未免疫的豬只也不會發(fā)生該疫病的感染。自主免疫力強(qiáng)的豬只越多- 群體免疫力越強(qiáng)。,群體免疫力的閾值,從群體免疫力的理論來看：要想在一個豬群中建立起對特定病原的有效免疫預(yù)防，必須達(dá)到一定數(shù)量的合格免疫比例（群體免疫臨界值）。了解群體的免疫狀況比追求過高的

23、免疫密度更為重要。對部分特定病原，① 要降低陽性率和“凈化”，② 要了解其活動規(guī)律，建立穩(wěn)定的病原狀態(tài)。以上的問題僅僅通過獸醫(yī)經(jīng)驗(yàn)、肉眼、病理變化是無法正確解讀的。,,,,,階段一母源抗體血清學(xué)-免疫接種降低或者/和清除潛在的危險因素,階段二早期檢測和及時處理,最后階段（減少二次、并發(fā)感染、以及其它的潛在感染，避免發(fā)生慢性病，等等）,,臨床感染,感染初始,,臨床癥狀,降低生產(chǎn)參數(shù) 死亡率增加,,,,,,,,實(shí)驗(yàn)室檢測在臨

24、床實(shí)踐中的意義,檢測和監(jiān)測,一. 概念檢測：指采用實(shí)驗(yàn)室方法對樣品（包括全血、血清、淋巴液、白細(xì)胞、組織器官、等）進(jìn)行病毒、病毒抗體及相關(guān)免疫指標(biāo)檢測；包括監(jiān)測、檢疫檢驗(yàn)、自愿咨詢檢測、臨床診斷、血液及血液制品篩查工作中的檢測。,檢測的分類,病原學(xué)檢測 檢測感染野毒 抗體檢測 檢測感染

25、 免疫監(jiān)控,被動檢測,,,,,,主動檢測,檢測和監(jiān)測,監(jiān)測：是指定期或不定期、連續(xù)、系統(tǒng)地收集各類群體中相關(guān)疾病的相關(guān)因素的分布資料，對這些資料進(jìn)行綜合分析，為制定預(yù)防控制策略和措施提供及時可靠的信息和依據(jù)，并對預(yù)防控制措施進(jìn)行效果評價。,檢測和監(jiān)測,二. 監(jiān)測與防疫和免疫的關(guān)系指導(dǎo)防疫和免疫的方向；檢驗(yàn)防疫和免疫的效果；,,三. 監(jiān)測的原則：以整群動物為目標(biāo)，把握整體的狀況,正態(tài)分布了解整體狀況采取適當(dāng)措施,監(jiān)

26、測的目的一,提前了解，疾病預(yù)警了解疾病在場內(nèi)的污染狀況，制定相應(yīng)策略；提前了解免疫抗體的高低及整齊度，及時糾正；,免疫程序的評估與安排1）了解母源抗體的消長情況； 2） 疫苗接種的效果 -- 免疫抗體監(jiān)控；,監(jiān)測的目的二,抗體是怎樣消退和產(chǎn)生的?,,二次免疫,,首次免疫,制訂針對性的疾病管理方案1） 豬瘟抗體水平的分群、淘汰方案； 2） 偽狂犬病凈化方案； 3） 后備豬進(jìn)群方案； 4） 公豬采精方案； 5） P

27、RRSV穩(wěn)定監(jiān)測方案； 6） 豬群健康狀況分析；,監(jiān)測的目的三,血清學(xué)檢測 是進(jìn)行抗原抗體檢測最為成熟、簡單和方便的工具！,,體外實(shí)驗(yàn) (實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的反應(yīng))抗原抗體反應(yīng)；可以檢測到血清、卵黃、牛奶等中的抗原或抗體；將血清學(xué)實(shí)驗(yàn)用于疾病診斷和控制是由Jones在1913年開創(chuàng)的 (將試管凝集實(shí)驗(yàn)用于雞白痢)；已經(jīng)成為疾病確診和疾病控制不可或缺的工具；根據(jù)不同的檢測目的選擇不同的檢測方法，并與病史、免疫史等資料結(jié)合進(jìn)行分析。,血

28、清學(xué)檢測,常用的血清學(xué)檢測技術(shù),血清中和試驗(yàn)/病毒中和試驗(yàn) (SNT/VNT)血凝抑制實(shí)驗(yàn) (HI)瓊脂凝膠擴(kuò)散實(shí)驗(yàn) (AGP)快速血清平板凝集實(shí)驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),快速,大量樣品,敏感性,簡單,,,,,,血清學(xué)檢測方法比較,,敏感性? (假陰性 無法及時移出感染源)從已知感染群中檢測“真正陽性”的能力特異性? (假陽性，損失健康動物)從已知陰性群中檢測“真正陰性”的能力,為什么使用 “ELISA”?,

29、敏感性和特異性上有較好的平衡； 同時檢測大量樣品；操作和數(shù)據(jù)分析自動化；不同實(shí)驗(yàn)室之間的交流。,如何進(jìn)行ELISA監(jiān)測？,科學(xué)取樣選擇可靠的產(chǎn)品并進(jìn)行規(guī)范的操作，獲 得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果密切結(jié)合臨床資料，作出正確的結(jié)果分 析,可使用的樣品,IDEXX ELISA實(shí)驗(yàn)可以應(yīng)用多種樣品 血清 全血, 組織,血塊 肉汁(豬),ELISA監(jiān)測的使用,科學(xué)取樣的原則,選對對象，正確分群（肉豬分日齡，母豬分胎次），血清學(xué)監(jiān)控應(yīng)當(dāng)

30、首先考慮采樣對象；樣品質(zhì)量；合適的樣品數(shù)目；隨機(jī)取樣，代表群體；,血清樣品的質(zhì)量要求,樣品的質(zhì)量對最終的測定結(jié)果具有顯著的影響；避免應(yīng)用高度溶血的樣品(深紅色)或嚴(yán)重脂血樣品；血清樣品在2-7ºC冷藏不可超過3-5天，或在 -20ºC冷凍不超過30 天；避免反復(fù)凍融，建議不超過3-5個循環(huán)；,樣本數(shù)量,合適的樣本大小可以通過檢查群體內(nèi)以往滴定數(shù)據(jù)獲得最佳提示結(jié)果變異越大，樣本應(yīng)該越多，以代表整群狀況。

31、根據(jù)以往的實(shí)踐和統(tǒng)計(jì)學(xué)經(jīng)驗(yàn)，23-30份以上的樣本被認(rèn)為是合理的。隨機(jī)采樣,血清學(xué)監(jiān)測的使用,取樣的要求,血清學(xué)監(jiān)測-樣品和取樣,樣本量 （假定陰性群采樣建議95%可信度）,血清學(xué)監(jiān)測-樣品和取樣,樣本量 （預(yù)計(jì)陽性群采樣建議95%可信度）,,,,,,,分析結(jié)果者同時應(yīng)該了解臨床資料 和讀懂血清學(xué)檢測結(jié)果,臨床資料包括：日齡、母豬胎次免疫史臨床表現(xiàn)，有無不穩(wěn)定的因素以往檢測情況等。,為什么要進(jìn)

32、行抗體的檢測？,對未免疫的疾病進(jìn)行抗體測定就可直接了解疾病的感染率；根據(jù)抗體檢測的狀況，確定抗原檢測的方向；有些方法可以直接區(qū)分感染和免疫抗體（PRV-gE）；有些感染抗體往往具備水平更高、抗稀釋能力強(qiáng)；感染可以造成抗體水平不正常---偏離基準(zhǔn)線；,規(guī)?；i場如何制定檢（監(jiān)）測計(jì)劃？,群體的基礎(chǔ)性調(diào)查；依據(jù)調(diào)查結(jié)果：制定每季度的檢（監(jiān)）測計(jì)劃；制定與群體管理相關(guān)的檢測方案。,1200頭基礎(chǔ)母豬場調(diào)查樣本設(shè)計(jì),公豬群采樣數(shù)量可

33、以按實(shí)際數(shù)量100%采樣,2400頭基礎(chǔ)母豬場調(diào)查樣本設(shè)計(jì),公豬群采樣數(shù)量可以按實(shí)際數(shù)量100%采樣,規(guī)?；i場如何制定監(jiān)測計(jì)劃？,群體的基礎(chǔ)性調(diào)查；依據(jù)調(diào)查結(jié)果：制定每季度的檢（監(jiān)）測計(jì)劃；制定與群體管理相關(guān)的檢測方案。,1200頭基礎(chǔ)母豬場調(diào)查樣本設(shè)計(jì),公豬群采樣數(shù)量可以按實(shí)際數(shù)量100%采樣,當(dāng)豬瘟抗體有問題時，增加抗原的檢測。,建立豬場分析系統(tǒng),血清學(xué)檢測：PRRSV、PRVCSF、M.hyo等,臨床癥狀情況：發(fā)病的階

34、段、病理變化、臨床表現(xiàn)等,生產(chǎn)性能情況：種豬繁殖性能、死亡率、飼料轉(zhuǎn)化率等,其它疾病伴發(fā)或繼發(fā)情況：發(fā)生時間、疾病種類、臨床表現(xiàn)等等,免疫情況：免疫的疫苗種類、疫苗的品牌、免疫程序、免疫反應(yīng)等,（1）同一個豬場在不同時間的分析；,（2）不同的豬場在相同時間的分析；,一分場,二分場,1月,7月,6月,5月,4月,3月,2月,三分場,保健情況：保健品種類、藥物的品牌、使用程序,月份,場次,總結(jié)：血清學(xué)檢測是溝通內(nèi)外的橋梁,阻斷外部傳播

35、 消除內(nèi)部傳播,疫苗免疫程序用藥程序,,,流行病學(xué)調(diào)查 疾病早期診斷 疫苗免疫評估 疾病控制和根除,血清學(xué)檢測可以提供確定的信息，提高對現(xiàn)場狀況的把握度,性能可靠的試劑盒是檢測的質(zhì)量保證,農(nóng)場在進(jìn)行ELISA檢測時，通常只有試劑盒是要 靠外部得到，因此謹(jǐn)慎選擇性能可靠的產(chǎn)品是非 常重要的。每次疾病的流行都催生了大量的疫苗和試劑盒， 由于質(zhì)量參差不齊，往往加劇了疾病的危害和誤 導(dǎo)了判斷。,檢測操作過程中沖擊性

36、破壞的影響？,被檢樣品中的成分復(fù)雜，包被物的篩選、純化技術(shù)？,試劑盒批次之間、每塊板、每個孔，如何減少檢測結(jié)果的差異化？,不同包被物在反應(yīng)板的附著性不同？,Quality control system,精準(zhǔn)性、不漏檢,穩(wěn)定性,重復(fù)性,如何在養(yǎng)豬生產(chǎn)中 開展重要疾病的血清學(xué)檢測,當(dāng)前的生產(chǎn)，完全不關(guān)注風(fēng)險動物,健康動物,當(dāng)前絕大多數(shù)豬場的健康控制策略,健康動物,感染動物,感染動物,感染動物,亞健康,健康動物,策略 1：剔除內(nèi)部的感染

37、源,控制與清除的策略,疾病控制與清除,感染動物,健康動物,疾病控制與清除,感染動物,健康動物,疾病控制,健康動物,策略 2: 阻止外部感染源,,控制與清除的策略,在引入前進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)風(fēng)險動物,健康動物,,風(fēng)險動物,只引進(jìn)安全無風(fēng)險的豬只,健康動物,當(dāng)然還要確保有效免疫，以防疏漏,健康動物,豬場常見病疫苗免疫效果,策略 3: 后備豬的馴化,,控制與清除的策略,后備豬在引入生產(chǎn)群前進(jìn)行不少于90天的馴化， 經(jīng)檢測穩(wěn)定后方可進(jìn)入

38、生產(chǎn)群體,生產(chǎn)群體,,,生產(chǎn)群體,后備豬在引入生產(chǎn)群前進(jìn)行不少于90天的馴化， 經(jīng)檢測穩(wěn)定后方可進(jìn)入生產(chǎn)群體,建立豬場分析系統(tǒng),血清學(xué)檢測：PRRSV、PRVCSF、M.hyo等,臨床癥狀情況：發(fā)病的階段、病理變化、臨床表現(xiàn)等,生產(chǎn)性能情況：種豬繁殖性能、死亡率、飼料轉(zhuǎn)化率等,其它疾病伴發(fā)或繼發(fā)情況：發(fā)生時間、疾病種類、臨床表現(xiàn)等等,免疫情況：免疫的疫苗種類、疫苗的品牌、免疫程序、免疫反應(yīng)等,（1）同一個豬場在不同

39、時間的分析；,（2）不同的豬場在相同時間的分析；,一分場,二分場,1月,7月,6月,5月,4月,3月,2月,三分場,保健情況：保健品種類、藥物的品牌、使用程序,月份,場次,豬群疾病控制的首要目標(biāo),PRRS：掌握監(jiān)測、干預(yù)和保持穩(wěn)定狀態(tài)的規(guī)律，建立“與藍(lán)共舞”的控制機(jī)制。CSF：淘汰帶毒豬，抗體水平檢測符合不同群體和階段性的要求。PR：凈化。,規(guī)?；i場如何制定檢（監(jiān)）測計(jì)劃？,群體的基礎(chǔ)性調(diào)查；依據(jù)調(diào)查結(jié)果：制定每季度的檢（監(jiān)）

40、測計(jì)劃；制定與群體管理相關(guān)的檢測方案。,制定與群體管理相關(guān)的檢測方案,后備豬馴致方案；PRRS檢測控制方案；群體凈化、淘汰方案。,疫病檢（監(jiān)）測與綜合防治,2. 生產(chǎn)過程監(jiān)測：- 對管理變化、員工異動；豬舍溫濕度變化、豬群生產(chǎn)流程、飼料異常；采食量變化、健康狀況、殘死數(shù)量、病例剖檢；疫苗保存、免疫；藥物預(yù)防治療情況；對以上情況進(jìn)行詳盡記載和分析，為疫病的診斷和防治提供長期的依據(jù)。,疫病檢（監(jiān)）測與綜合防治,3. 臨

41、床監(jiān)測：流行病學(xué)調(diào)查：流行學(xué)調(diào)查內(nèi)容包括豬群疫病發(fā)生及死亡情況、臨床癥狀；有無傳染性、傳播流行的特點(diǎn)和規(guī)律；不同季節(jié)、地區(qū)、日齡、飼養(yǎng)管理方式與相關(guān)疾病的密切關(guān)系。臨床觀察：每種疾病都有癥狀，且具有特異性，觀察疫病的示病癥狀、特征性癥狀、固有癥狀，有重要的診斷意義。病理剖檢：根據(jù)剖檢病變并結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查和臨床檢查，通過檢查器官的顏色、氣味、性質(zhì)的變化、不同的病理變化可給不同疫病的診斷以提示。,疫病檢（監(jiān)）測與綜合防治,4.

42、 綜合防治：近年來豬病呈病原復(fù)雜化狀態(tài)，隨著免疫抑制性疾病的增加，繼發(fā)和混合感染情況普遍發(fā)生；必須區(qū)別那些是元兇、幫兇和常在病原；在疾病診斷中，傳統(tǒng)的診斷技術(shù)面臨挑戰(zhàn)，單一的某種診斷方法也不能確定疾病的類型，必須通過血清學(xué)、病原學(xué)、臨床診斷、病理剖檢和飼養(yǎng)管理等多種手段結(jié)合，有針對性的采取對應(yīng)措施；任何一種檢測手段都有局限性，疾病綜合評定的原則是根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床觀察、病理剖檢、病原檢測、藥物治療，特別是管理因素等各方面信息進(jìn)

43、行綜合分析，避免主因不明、疫苗和藥物的濫用。豬病的防控要建立檢（監(jiān)）測預(yù)警機(jī)制；規(guī)?；B(yǎng)豬過程中的經(jīng)驗(yàn)：只有加強(qiáng)基礎(chǔ)性管理工作、改善飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生、改進(jìn)工藝流程、減少應(yīng)激、提高機(jī)體非特異性免疫力、確保生物安全是豬病防治的重中之重。在檢（監(jiān)）測的基礎(chǔ)上有針對性進(jìn)行免疫等綜合防治措施，才能高效的防止豬群疫病的發(fā)生。,1. 有些病原存在又未必是發(fā)病的根源；2. 有些病原存在，是發(fā)病的原因而未必能被檢測到；3. 有些急性病患病豬，未出

44、現(xiàn)特征臨床癥狀便死亡了；4. 有些疾病病理癥狀并非十分典型；5. 有些疾病是管理不到位而引起條件性疾病的發(fā)生；6. 目前的PRRS、PRDC都與以上情況相關(guān)。,精準(zhǔn)檢測，信心保證！,2010年藍(lán)耳?。≒RRS）控制方法的現(xiàn)狀,免疫的豬群；非免疫的豬群；多點(diǎn)式生產(chǎn) -- 實(shí)行分段式免疫的豬群；自主馴化的豬群；采用綜合方法控制。,2010年規(guī)?；i場藍(lán)耳抗體檢測報(bào)表,,,2010年藍(lán)耳病血清學(xué)檢測中的主要表現(xiàn),PRRS的

45、血清學(xué)檢測面臨復(fù)雜狀況：抗體陽性率高，卻能夠穩(wěn)定生產(chǎn)?？贵w陰性率高，卻出現(xiàn)損失。如何評估PRRS疫苗免疫？抗體陽性率高一定就有“風(fēng)險”嗎？抗體滴度高是否表示被保護(hù)？在群體中抗體陰性的豬只是否沒有風(fēng)險？免疫豬群或非免疫豬群如何進(jìn)行PRRSV穩(wěn)定狀態(tài)的分析？,PRRSV生物學(xué)特性,有囊膜單股正鏈RNA病毒；包括8 個開放閱讀框架（ORF）,可編碼6 種結(jié)構(gòu)蛋白和2 種非結(jié)構(gòu)蛋白。根據(jù)PRRSV基因的變異程度分為：以LV（

46、Lelystad virus ）株為代表的歐洲基因型（簡稱A亞群）；以VR-2332為代表的美洲基因型（簡稱B亞群），兩者均有典型的免疫抑制特性。目前是否出現(xiàn)新的亞群？PRRSV的組織分布：（1）新生仔豬僅在肺臟中檢出；（2）在仔豬的脾臟中含量最高，依次為腎臟、肺臟、淋巴結(jié)、心臟和中樞神經(jīng)系統(tǒng)；（3）種豬和肥育豬體內(nèi)病毒主要位于肺、腎臟等內(nèi)臟器官和脾、淋巴結(jié)等免疫器官以及其他組織的巨噬細(xì)胞中。,PRRSV,非結(jié)構(gòu)蛋白,結(jié)構(gòu)蛋白,

47、,,PRRSV,Enveloped ss RNA virus 單股正鏈包囊RNA病毒Arteriviridae familyArterivirus genus 動脈炎病毒屬Replication in macrophages 在巨噬細(xì)胞中復(fù)制，對巨噬細(xì)胞有專嗜性Prolonged viremia 長期的病毒血癥Persistent infection 持續(xù)感染- 毒力差異：SHFV: 100% mortali

48、ty within a week 一星期內(nèi)100%的死亡率。LDV: asymptomatic infection with extremely high viremia 無癥狀感染極高的病毒血癥,,PRRS的傳播途徑,豬是唯一的易感動物：精液可以帶毒— 通過交配或人工授精傳播；30%是經(jīng)過人員和車輛傳播；10%是通過引進(jìn)豬傳播的；空氣傳播可能是重要的傳播途徑，但只是鄰近豬舍間的傳播，豬場間的傳播可能性不大，PR

49、RSV感染豬體的途徑很多，包括口腔、鼻腔、肌肉、腹腔和生殖道。傳染常常發(fā)生于豬只之間的密切接觸。豬只直接接觸極易造成PRRSV的傳播，因此豬場內(nèi)和豬場間豬只的移動成為最主要的傳播方式。雖然存在非豬宿主（比如禽類），但他們在PRRSV流行病學(xué)中的作用尚不清楚?！哪肛i到仔豬的傳播，主要是在子宮中或出生后發(fā)生，或者是易感仔豬與感染豬混群，使病毒持續(xù)循環(huán)傳播。,PRRS的流行病學(xué),各種品種、不同年齡的豬只均可感染，但以懷孕母豬和幼齡仔豬最易

50、感；主要傳播途徑是接觸感染、空氣傳播和精液傳播，也可通過胎盤垂直傳播；易感豬可經(jīng)口、鼻腔、肌肉、腹腔、靜脈和子宮內(nèi)接種傳播；持續(xù)性感染：是PRRS流行病學(xué)的重要特征，PRRSV可在感染豬體內(nèi)存在很長時間；PRRS是以懷孕母豬的繁殖障礙及各種年齡豬（特別是仔豬）的呼吸道疾病為特征。,為什么PRRSV容易變異？,作為RNA病毒，PRRSV的基因在合成時容易出現(xiàn)內(nèi)在性錯誤，可出現(xiàn)點(diǎn)突變、刪除、添加和毒株間基因重組，因此PRRSV的基因

51、容易發(fā)生變異，不同分離株之間基因組存在廣泛變異。依據(jù)血清學(xué)及基因序列分析將PRRSV分為兩種基本基因型，以LV型為代表的歐洲型和以VR2332為代表的北美洲型，兩種的核苷酸序列同源性約為60％。通過序列分析顯示，美洲型毒株間的變異明顯大于歐洲型毒株間的變異。PRRSV在豬體內(nèi)持續(xù)感染過程中，會出現(xiàn)病毒亞種或亞群。國外的研究表明：同一基因型的PRRSV分離毒株之間存在明顯的序列差異，特別是在基因組ORF1a的nsp1b和nsp2，O

52、RF3和ORF5的變異性很大。我國已發(fā)現(xiàn)nsp2的變異主要表現(xiàn)在氨基酸的缺失，此次發(fā)現(xiàn)的高致病性藍(lán)耳病就是由nsp2缺失30個氨基酸的變異株引起的。,PRRSV免疫學(xué)特性,垂直感染：PRRSV對巨噬細(xì)胞的親嗜性，被PRRSV感染的豬肺泡巨噬細(xì)胞可能會通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，病毒感染胎兒。增殖作用：用有PRRS抗體的病毒培養(yǎng)物接種懷孕中后期母豬，病毒在胎兒中的復(fù)制顯著增加；反映在臨床上就是剛斷奶的仔豬呼吸道疾病癥狀比大的架子豬嚴(yán)重的多。

53、 早期抗體的影響：對病毒的增殖有依賴性增強(qiáng)作用，在中和抗體存在的情況下，PRRSV在細(xì)胞上的復(fù)制能力反而提高10-100倍。（斷奶仔豬、斷奶母豬、后備豬）。4. 持續(xù)感染：PRRSV在有循環(huán)抗體存在的情況下，依然可見到長期的病毒血癥，這是由于早期產(chǎn)生的是非中和抗體，中和抗體產(chǎn)生緩慢并且要高滴度的中和抗體才能消除病毒，因此出現(xiàn)持續(xù)感染。,什么是高致病性PRRS？,高致病性豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株引起的一種急性高致死性

54、傳染病。仔豬發(fā)病率可達(dá)100％、死亡率可達(dá)50％以上；母豬流產(chǎn)率可達(dá)30％以上；育肥豬也可發(fā)病死亡是其特征。,發(fā)生PRRS的風(fēng)險群體的風(fēng)險群體,引入的外來豬只（帶有不同與生產(chǎn)群體的毒株）；PRRSV活躍階段的公豬；馴致不夠、移動的后備種豬；豬只機(jī)體抵抗力降低（環(huán)境、持續(xù)應(yīng)激、分娩應(yīng)激、免疫抑制等）和病原微生物感染壓力增大的群體；,后備,初配,泌乳期,妊娠后期,斷奶-配種,妊娠中期,,,,公豬,,種豬PRRSV抗體檢測波動時

55、期,5 6 7 8 9周,斷奶,10 13 14 18 22 26,仔培/保育階段,,轉(zhuǎn)群至育肥舍,,,,,育肥階段,商品豬PRRSV抗體檢測波動時期,豬藍(lán)耳病抗體陽性率分析,B1-B10：20-35日齡保育豬B11-B15：36-45日齡保育豬B16-B25：46-55日齡保育豬B26-B31：56-65日齡仔豬,生產(chǎn)母豬各階段檢測結(jié)果,保育階段檢測結(jié)果

56、,一分場,二分場,三分場,四分場,五分場,一分場,二分場,三分場,四分場,五分場,豬感染PRRSV后最早出現(xiàn)（大約7天）的是針對N蛋白的抗體，而且該抗體可持續(xù)存在180天以上，因此N蛋白作為PRRSV抗體的檢測抗原，無論早期還是晚期都具有重要的診斷學(xué)意義，特別適合于評估流動的豬群PRRSV的穩(wěn)定性和風(fēng)險： （1）可以監(jiān)控豬群的感染和穩(wěn)定狀態(tài)； （2）群體病毒循環(huán)規(guī)律； （3）引進(jìn)后備公母豬的穩(wěn)定狀態(tài)； （

57、4）及時發(fā)現(xiàn)問題和干預(yù)。,PRRS抗體檢測在生產(chǎn)中的應(yīng)用,1. 引入“哨兵豬”或針對移動的群體,2. 定期群體普查,,豬藍(lán)耳病抗體陽性率分析,B1-B10：20-35日齡保育豬B11-B15：36-45日齡保育豬B16-B25：46-55日齡保育豬B26-B31：56-65日齡仔豬,生產(chǎn)母豬各階段檢測結(jié)果,,,3. 豬群穩(wěn)定性分析,,,,穩(wěn)定豬場,不穩(wěn)定豬場,穩(wěn)定豬場,不穩(wěn)定豬場,豬群穩(wěn)定性分析,4. 公豬及后備豬進(jìn)群檢測,,豬

58、蘭耳病抗體檢測：檢測樣品共100份，陽性樣品95份，陰性樣品5份，懷疑樣本0份，陽性率達(dá)95.0%。,后備豬進(jìn)群前檢測：,豬偽狂犬病gE抗體檢測：檢測樣品共100份，陽性樣品8份，陰性樣品92份，懷疑樣本0份，陽性率達(dá)8.0%。,后備豬進(jìn)群前檢測：,豬瘟抗體檢測：檢測樣品共102份，陽性樣品76份，陰性樣品16份，可疑樣品9份，陽性率76%。,后備豬進(jìn)群前檢測：,5. PRRS控制實(shí)例,,,某集團(tuán)：后備豬群: 4月齡

59、進(jìn)行馴致工作(利用感染母豬和感染保育豬血清,稀釋后人工感染后備母豬), 6月齡左右使用PRRS X3 0.4≤S/P≤2.5 為馴致成功,若S/P2.5后備豬淘汰；母豬群(采用免疫和非免疫2種方法進(jìn)行PRRS干預(yù))； ①免疫PRRS疫苗(BI)后檢測PRRS抗體,判斷標(biāo)準(zhǔn)為: PRRS X3 0.4≤S/P≤2.0， CV≤40%為免疫合格群。 ②非免疫群: PRR

60、S X3 0.4≤S/P≤2.0為穩(wěn)定群,S/P≥2.5暫停引入.公豬群: PRRS X3 S/P≥2.5 暫停使用精液,1個月后再次檢測,若S/P≤2.5則使用精液。引種檢測: 從陰性場引種 PRRS S/P≤0.4 從陽性場引種 PRRS S/P≤2.0,如何使用IDEXX PRRS 試劑盒,,某農(nóng)場：母豬群: 用哈獸研PRRS滅活苗免疫 PRRS X3 0.4≤S/P≤2.0 為穩(wěn)定群。公

61、豬群: PRRS X3 S/P≥2.5 暫停使用精液,1個月后再次檢測,若S/P≤2.5則使用精液。商品肉豬群:使用上海海利PRRS弱毒疫苗免疫,使用PRRS X3 檢測 0.4≤S/P≤2.0為合格群。,如何使用IDEXX PRRS 試劑盒,,某豬場：后備豬群: 4月齡進(jìn)行馴致工作(利用感染母豬和感染保育豬血清,稀釋后人工感染后備母豬), 6月齡左右使用PRRS X3: 0.4≤S/P≤3.0

62、 為馴致成功,若S/P3.0后備豬淘汰；其它豬群不進(jìn)行檢測,公豬精液PCR檢測病原。,如何使用IDEXX PRRS 試劑盒,IDEXX PRRS X3抗體檢測試劑盒基于以核衣殼蛋白（N 蛋白） 作為主要包被抗原的意義,N蛋白具有穩(wěn)定的氨基酸含量：ORF7編碼核衣殼（N ）蛋白，分子量為13.8- 15KD，具有一個糖基化位點(diǎn)，但屬非糖基化蛋白；各類毒株（美洲

63、株、歐洲株和其他分離株）分別含有123-128個氨基酸。N蛋白在PRRS病毒粒子中含量最高（約占病毒蛋白總量的20-40%），是不同毒株P(guān)RRSV 主要結(jié)構(gòu)蛋白之一，具有較高的免疫原性。N蛋白有6個疏水區(qū)及至少5個抗原決定族，其中既有對所有PRRSV毒株保守的共同決定族，又有北美洲各型和歐洲各型的特異決定族。N蛋白保守性高；針對不同PRRSV毒株，具有群特異性。,快速檢測：豬感染PRRSV后最早出現(xiàn)（大約7天）的是針對N蛋白的抗體

64、，而且該抗體可持續(xù)存在180天以上，因此N蛋白作為PRRSV抗體的檢測抗原，無論早期還是晚期都具有重要的診斷學(xué)意義，特別適合于評估流動的豬群PRRSV的穩(wěn)定性和風(fēng)險： （1）可以監(jiān)控豬群的感染和穩(wěn)定狀態(tài)； （2）群體病毒循環(huán)規(guī)律； （3）引進(jìn)后備公母豬的穩(wěn)定狀態(tài)； （4）及時發(fā)現(xiàn)問題和干預(yù)。包被物N蛋白的選擇：IDEXX PRRS X3能夠同時用于檢測歐洲株和美洲株，對不同的PRRS毒株（經(jīng)典毒株或高致病