高效液相常見問題及解決

1、高效液相色譜儀使用中常見問題及解決方法高效液相色譜儀使用中常見問題及解決方法?高效液相色譜儀系統(tǒng)高效液相色譜儀系統(tǒng)液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數(shù)據處理系統(tǒng)組成。對于整個系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測器是核心部件同時也是易出問題的主要部位。?常見問題及解決方法常見問題及解決方法高效液相作為一種高精密儀器，如果在使用過程中不按照正確操作的話，就容易導致一些問題。其中最常見的就是柱壓問題、漂移問題、峰型異常問題。1柱壓

2、問題柱壓問題柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在345kPa以內或在50PSI（針對Waters高效液相色譜儀）之間（在使用梯度洗脫時，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的）。壓力過高、過低都屬于柱壓問題。1.1壓力過高壓力過高這是高效液相在使用中最常見的問題，指的是壓力突然升高，1、一般都是由于流路中有

3、堵塞的原因。此時，我們應該分段進行檢查。(1).首先斷開真空泵的入口處，此時PEEK管里充滿液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個小時，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常，在檢查；(2).打開Purge閥，使流動相不經過柱子，如果壓力沒有明顯下降，則是過濾白頭堵塞。處理方法：將過濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至

4、100PSI以下，過濾白頭正常，在檢查；(3).把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質導致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上，用流動相沖洗柱子。這時，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。問題無法解決可考慮

5、更換色譜柱。2、流速設定不正確：可重新設定正確流量。3、流動相配比不正確：不同配比的流動相其黏度系數(shù)不相同，較高黏度的流動相相應的系統(tǒng)壓力也大，如果可能可更換黏度較小的溶劑或重新設定配比。4、系統(tǒng)壓力零點漂移：調節(jié)壓力傳感器的零點。5、阻尼器堵塞：拆下后進行超聲波清洗或更換新的阻尼器。6、進樣器堵塞：參見說明書清洗。動相。2.22.2基線噪音基線噪音對于紫外檢測器氘燈光源打開后要預熱30min以上基線才能穩(wěn)定。噪聲是指與被測物無關的檢測

6、器輸出信號的隨機擾動變化分短期噪聲和長期噪聲兩種。氘燈用的過久接近壽命期時(氘燈的壽命約1000h)會使基線噪音明顯增加應及時更換氘燈。除光源外流路中的氣泡也會產生噪音。對于判斷基線噪聲增大是由于光源燈的老化還是來自流路中的氣泡的問題可將泵關上繼續(xù)走基線如果噪聲立即停止基線呈一條直線說明基線噪聲來自流動相中的氣泡應設法排氣若停泵后仍有噪音出現(xiàn)應考慮是燈的問題。電化學檢測器中的工作電極(安培型)對氣泡十分敏感儀器的平衡時間較長。流路中如果

7、有氣泡存在不僅基線會出現(xiàn)尖峰還會影響檢測。因此做電化學檢測時流動相的配制要很嚴格水要超純、除還原物配好后一定要過濾脫氣還應現(xiàn)用現(xiàn)配。如果泵系統(tǒng)不是PK材料即電化學分析專用儀器而是普通的高效液相色譜不銹鋼泵應對系統(tǒng)中的不銹鋼材料的輸液泵、進樣器和管道在分析前用6molL1硝酸溶液鈍化(注意斷開分離柱)可縮短基線平衡時間。還可在流動相中加入EDTA離子隱蔽劑也是可以的。如果有較大的氣泡進到檢測器中光靠泵沖可能太慢可暫時將泵停止關上電化學檢測

8、器拆下工作電極用超純水沖洗電極表面也很奏效的但對液相色譜技術不太熟練的技術員要小心操作不宜反復這樣拆卸。2.2.12.2.1基線噪音基線噪音(規(guī)則的規(guī)則的)產生基線噪音的原因有：在流動相、檢測器或泵中有空氣；漏液；流動相混合不完全；溫度影響(柱溫過高檢測器未加熱)；在同一條線上有其他電子設備；泵振動。了避免基線噪音在正式進樣之前需要對流動相脫氣；沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣；檢查管路接頭是否松動；泵是否漏液；是否有鹽析出和不正常的噪

9、音如有必要更換泵密封；用手搖動使溶劑混合均勻或使用低粘度的溶劑減少差異或加上熱交換器；有其他電子設備時斷開LC、檢測器和記錄儀檢查干擾是否來自于外部加以更正；泵振動時在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器。2.2.22.2.2基線噪音基線噪音(不規(guī)則的不規(guī)則的)(1)漏液：檢查接頭是否松動泵是否漏液是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要更換密封檢查流通池是否漏液。(2)流動相污染、變質或由低質溶劑配成：檢查流動相的組成。(3)流動相各溶劑不相溶：選擇互溶

10、的流動相。(4)檢測器記錄儀電子元件的問題：斷開檢測器和記錄儀的電源檢查并更正。(5)系統(tǒng)內有氣泡：用強極性溶液清洗系統(tǒng)；檢測器內有氣泡清洗檢測器在檢測器后面安裝背景壓力調節(jié)器。(6)流通池污染(即使是極少的污染物也會產生噪音):用硝酸清洗流通池(7)檢測器燈能量時不足更換燈(8)色譜柱填料流失或阻塞:更換色譜柱。(9)流動相混合不均勻或混合器工作不正常:維修或更換混合器在流動相不走梯度時不建議使用泵的混合裝置。3保留時間保留時間3.1