骨髓細胞學(xué)

1、骨 髓 細 胞 學(xué) 檢 查(Bone Marrow Examination),主要內(nèi)容,血細胞的生成與發(fā)育 正常血細胞形態(tài) 常用血細胞化學(xué)染色 骨髓細胞檢查的臨床意義 常見血液病血細胞特征 急性白血病的MICM分型,骨髓是主要造血組織（hemopoietic tissue）組成：網(wǎng)狀組織（reticular tissue） 造血細胞（hemopoietic cell） 基質(zhì)

2、：調(diào)節(jié)造血細胞的增殖與分化 觀察骨髓中血細胞數(shù)量和質(zhì)量的變化 對造血系統(tǒng)疾病的診斷和防治都有重要意義,一、血細胞生成與發(fā)育,,造血干細胞的功能特點,造血組織中一類目前尚無形態(tài)學(xué)特征描述的功能細胞具有高度自我更新的能力，可維持干細胞數(shù)量的恒定具有多向分化的能力即可向各系列祖細胞分化，然后 增殖分化為各系血細胞,血細胞發(fā)生示意圖,血細胞發(fā)育規(guī)律 (原 始→ 成 熟),[ 胞 體 ] 大→小 (

3、巨核細胞相反,早幼粒較原粒大) [ 胞 漿 ] 量： 少→ 多 顏 色：深藍→淺藍 →淺紅 顆 粒：無→有,非特異性→特異性 [ 胞 核 ] 大→小 (巨核細胞相反) 核 型： 規(guī)則→不規(guī)則

4、 染色質(zhì)： 細致疏松→粗糙密集→緊縮成塊 核 仁： 有→無 核 膜： 不明顯→明顯 [ 核漿比 ] 大→小 (巨核細胞相反),二、正常血細胞形態(tài),紅細胞系(Erythrocyte Series),原 紅 細 胞(proerythroblast),早 幼 紅 細 胞(Ba

5、sophilic erythroblast),中 幼 紅 細 胞(Polychromatic erythroblast),晚 幼 紅 細 胞 ( normoblast ),粒細胞系(Granulocytic Series),原粒細胞（myeloblast）,早幼粒細胞(promyelocyte),中幼粒細胞(myelocyte),晚幼粒細胞(metamyelocyte),桿狀核粒細胞(stab gran

6、ulocyte ),分葉核粒細胞(segmented granulocyte),單核細胞系(Monocytic Series),原單核細胞（monoblast）幼單核細胞（promonocyte）單核細胞（monocyte）,淋巴細胞系(Lymphocytic Series),原淋巴細胞 (lymphoblast),幼淋巴細胞 (prolymphocyte),淋巴細胞 (l

7、ymphocyte),巨核細胞系(Megakaryocytic Series),原巨核細胞（megakaryoblast）,幼巨核細胞（promegakaryocyte）,顆粒巨核細胞（granular megakaryocyte ）,產(chǎn)板巨核細胞,漿細胞系統(tǒng) (Plasmacytic Series),原漿細胞 (plasmablast) 幼漿細胞 (proplas

8、macyte ) 成熟漿細胞 (plasmacyte ),三、常用血細胞化學(xué)染色,血細胞細胞化學(xué)染色,以細胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)原理，應(yīng)用骨髓涂片進行固定、化學(xué)反應(yīng)顯色、復(fù)染等程序染色，然后在光鏡下觀察細胞的化學(xué)成分及其變化的一項檢驗方法研究血細胞在生理或病理情況下細胞化學(xué)成分的變化，有助于了解各種血細胞的化學(xué)組成及病理生理改變可用作血細胞類型的鑒別，對某些血液病的診

9、斷和鑒別診斷、療效觀察、發(fā)病機制探討等均有一定價值,血細胞化學(xué)染色,過氧化物酶( POX)非特異性酯酶( NSE)特異性酯酶 (SE)糖原染色 (PAS)中性粒細胞堿性磷酶 ( NAP),過氧化物酶染色 (Peroxidase, POX),原理：H2O2 H2O ＋ O

10、2 ↑ POX 聯(lián)苯胺 聯(lián)苯胺蘭＋亞硝基鐵氰化鈉 O2 ↓

11、 暗藍色的顆粒↓ 結(jié)果：粒細胞(+)；單核細胞( ±)； 淋巴細胞( –),,,非特異性脂酶 (Non specific esterase, NSE),原理： NSE水解 α－醋 酸 奈 酚 奈 酚

12、 ＋ 有色沉淀↓ 重氮染料偶聯(lián)臨床意義： 單核、巨噬(+++),,,特異性脂酶 (Specific esterase, SE),原理：

13、 SE水解 氯醋酸奈酚AS－D 奈酚AS－D ＋ 紅色沉淀↓ 重氮鹽偶聯(lián) 臨床意義：

14、 粒(+++)；單( ±)；淋(－),,,中性粒細胞堿性磷酸酶染色 Neutrophil alkaline phosphatase, NAP,原理： NAP β－甘油磷酸鈉 磷酸鈉＋甘油 PH 9.2

15、 磷酸鈉＋氯化鈣 磷酸鈣↓＋硝酸鈷 硫化鈷↓ 硫化銨 + 磷酸鈷,,,,,NAP臨床意義,慢粒NAP↓，類白NAP↑ 急粒NAP↓，急淋NAP↑，急單正?；颉?再障NAP↑， PNH者NAP↓ 化膿感染NAP↑， 病毒感染NAP↓,糖原染色 (Periodic-schiff. PAS),原理：

16、 過碘酸氧化 1.2乙二醇 雙 醛 基 ＋ Schiff

17、 紅色品紅 紫紅色↓臨床意義： 淋－－粗顆?；驁F塊狀陽性 粒－－彌漫均勻狀陽性 單－－細顆粒狀陽性,,,鐵染色：普魯士蘭反應(yīng)染色法,原理： 細胞 鐵+ 亞鐵氰化鉀 亞鐵氫化鐵 呈蘭色臨床意義： 缺鐵性貧血時

18、：細胞外、內(nèi)鐵依次減少 非缺鐵性貧血時：細胞外鐵多增高 鐵粒幼貧血時：鐵粒幼細胞增多，出現(xiàn)環(huán)鐵,內(nèi),外,H+,,四、骨髓細胞學(xué)檢查的臨床意義,,[適 應(yīng) 癥] 診 斷 造 血 系 統(tǒng) 疾 病: 白 血 病

19、 貧 血 血小板減少性紫癜 診 斷 非 造 血 系 統(tǒng) 疾 病： 原 蟲 感 染

20、 代 謝 性 疾 病 轉(zhuǎn) 移 性 癌 腫 原因不明： 發(fā)熱、惡病質(zhì) 肝、脾、淋巴結(jié)腫大 血細胞單項或多項減少、增多 周圍血

21、出現(xiàn)幼稚細胞、可疑細胞,[禁 忌 癥 ],明顯出血傾向：血友病,常用取材部位,髂后上棘（較易掌握分寸） 髂前上棘（較易掌握分寸） 胸骨（對向心性病變陽性率高，有一定危險性） 脛骨粗隆（2歲以下小兒）,骨髓涂片檢查的內(nèi)容和方法,低倍鏡檢查 （1) 觀察涂片的取材、制片、染色是否滿意 （2）確定骨髓增生程度(Hypercellularity ) 有核細胞、巨

22、核細胞 （3）注意有無特殊細胞 油鏡檢查 （1）有核細胞分類 ( Normal rate of cells in different series ) (Normal rate of cells at different stages ) （2）計算：?！眉t=2~4∶1

23、 （3）觀察細胞形態(tài)有無異常 （4）觀察有無特殊細胞及寄生蟲,骨髓增生程度,增生程度 成熟RBC/有核細胞 有核細胞(%)極度活躍 1 ： 1 ＞ 50明顯活躍 10 ： 1 10～20增生活躍

24、 20 ： 1 2～7增生減低 50 ： 1 < 1極度減低 300 ： 1 < 0.5,,,,正 常 骨 髓 象,1. 增 生 活 躍2. 粒 紅 比 正 常（2－4/1）3. 粒 系(約40－60％)增 生 良 好，各

25、 階 段 比 例 適 當(dāng) 細 胞 形 態(tài) 無 異 常4.紅 系(約20％)增 生 良 好， 各 階 段 比 例 適 當(dāng)， 細 胞 形 態(tài) 無 異 常5.淋巴細胞（約20％） 、單核細胞（ 約4％）的百分率、各階段比例及形態(tài)正常。6.巨 核 細 胞（ 7~35個/1.5㎝）?3㎝血片易見，以產(chǎn) 板 巨 多 見7.可 見 少 量 非 造 血 細 胞 8.無 特 殊 細 胞 及 寄 生 蟲,骨髓象檢查的臨床意義,增生程度

26、 ? 極度活躍－亢進：白血病 ? 明顯活躍－旺盛：白血病、增貧 ? 增生活躍－正常 ? 增生減低－減低: 慢性再障 ? 極度減低－衰竭：急性再障,粒/ 紅( 有 核 紅 細 胞)：2－4/1,〔臨 床 意 義〕 正 常： 正常骨髓象 粒,紅兩系以外造血系統(tǒng)疾?。篒TP、MM

27、 粒,紅兩系平行增高或減低：再障 增 高：粒系增高 紅系減低 減 低：紅系增高：增生性貧血 粒系減低：粒缺,五、常見血液病血細胞特征,貧 血,概念：單位容積循環(huán)血液中紅細胞數(shù)、血紅蛋白量 及（或）血細胞比容低于參考值按骨髓增生情況可分為 增生性貧血 增生不良性貧血,缺鐵性貧血

28、(小細胞低色素性貧血),〔血 象〕（1）HGB、RBC↓，不成比例 （2）小細胞低色素RBC （3）網(wǎng)織紅細胞↑/正常 （4）WBC、PLT正?！?骨 髓 象〕 （1）增生活躍→明顯活躍 （2）M/E↓ （3）紅系增生，以中、晚幼紅為主呈核老幼漿 （4）粒系↓，巨核系正常 （5）外鐵消失，內(nèi)鐵減少,再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA) 特 征： 全 血 細 胞 減 少,〔

29、血 象〕1. 全血細胞減少,淋巴細 胞相對增高2. 網(wǎng)織紅細胞減少〔 骨 髓 象〕1. 增生低下2. 紅系(晚幼紅多見),粒 系,巨系減 低3. 非造血細胞增高:漿細 胞,淋巴細胞多見,白 血 病,是造血系統(tǒng)的一種惡性腫瘤特點為造血組織中白血病細胞呈過度異常增生與分化成熟障礙，并浸潤其它器官和組織，而正常的造血功能則受抑制分為急性和慢性兩大類,急性白血病血液學(xué)特征共同點,骨髓增生活躍或明顯活躍。

30、一系或兩系原始細胞增多。因白血病類型不同，其它系列血細胞均受抑制而減少涂片中分裂型細胞和退化細胞增多,急 性 白 血 病(Acute Leukemia),〔血 象〕1. 血紅蛋白、紅細 胞 減少,可見幼紅細胞2. 白細胞計數(shù)不定,以 原幼稚為主3. 血小板減少,急 性 白 血 病 (Acute leukemia),〔骨髓 象〕1. 增生活躍2. 原幼稚細胞異常 增生≥30％(非紅系)

31、3. 巨核細胞相對受抑,慢 性 白 血 病 (Chronic Leukemia),〔血 象〕1.白細胞增高,分類以 成熟細胞為主 (慢粒:嗜酸,嗜堿增高)2. 血小板早期正常, 晚 期降低,慢 性 白 血 病(Chronic Leukemia),〔 骨 髓 象〕1.增生明顯活躍2.粒(淋)系極度增 生, 以成熟為主3.其它系統(tǒng)受抑,原發(fā)性血小板減少性紫癜 Idiopa

32、thic Thrombocytopenic Purpura,〔血象〕1.血小板減少,可見異 形、巨大血小板2.血色素、紅、白細 胞正?！补撬柘蟆?.增生活躍2.粒系、紅系正常3.巨核:增生、產(chǎn)板巨 減少,成熟障礙,六. 急性白血病的MICM分型,MICM TYPING DIAGNOSIS,MICM MorphologyImmunologyCytogeneticsMolecular,細胞形態(tài)學(xué)分型

33、(FAB分型),急淋 L 1 － 小細胞 L 2 － 大細胞 L 3 － 空泡 急髓 M 0－7,the tradition classification (FAB)of leukemia,According to the Differentiation & Kind of cell

34、 acute myeloid leukemia（AML） M0 M1 M2 ……………….. M7acute leukemia acute lymphocyte leukemia（ALL） L1，L

35、2，L3 chronic leukemia： CML、CLL……,,急髓白血病FAB 分 型,M1 急粒未分化型 原?！?0％( 非紅系)M2 急粒部分分化型 原粒≥30-89％M3 急早粒 早幼粒>30％M4 急粒-單 粒單兩系細胞均增生M

36、5 急單 原幼單>30%M6 紅白血病 紅系>50％且形態(tài)異常 原粒(原單)＋早幼粒(幼單)>30％M7 巨核白 原幼巨>30％,急性淋巴細胞白血病(L1),急性淋巴細胞白血病(L2),急性淋巴細胞白血

37、病(L3),急粒未分化型 (M1),急粒部分分化型（M2）,急性早幼粒細胞白血病（M3）,急性粒－單細胞白血?。∕4）,急性單核細胞白血?。∕5）,急性紅白血病（M6）,巨核細胞白血?。∕7）,幾種常見急性白血病的細胞化學(xué)染色,,SE:,粒系陽性,,單核陰性,,陽性:,,急粒急單,POX,,NSE:,粒系陰性,,PAS,,單核陽性,,陰性: 急淋(NAP) 急粒(NAP)  急單,,,,,,粒:片狀,淋

38、:粗顆粒,環(huán)核,單:細顆粒,,,,,,,,,,,,,,,免疫學(xué)分型,急淋 ? T細胞---CD1、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8 ? B細胞---CD9、CD10、CD19、CD20 急髓 ? CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34,細胞免疫分型 （一）急性白血病細胞免疫表型特點,（二）ALL的免疫表型特點,（三）AML的免疫學(xué)分類,IMMUNO-

39、PHENOTYPING,mab M1 M2M3M4M5M6M7CD13+++++--CD33+++++--CD14-±-++--CD41------+Ret-----+-Lectoferrin -+-+---CD19CD7HLA-DRCD2MPO T- +

40、 - + - B+ - + - -,細胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)分型,M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR? CML t ( 9 ; 22 ) BCR-ABL,MECHANISM —Ph CHROMOSONE,復(fù)習(xí)題,骨髓檢查應(yīng)用于哪些方面？血細胞發(fā)育演變的一般規(guī)律？正