實(shí)驗(yàn)十四臨床生化檢驗(yàn)試劑盒副本

1、臨床生化檢驗(yàn)試劑盒性能評價試驗(yàn),蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院,,本實(shí)驗(yàn)選擇GOD—POD法測定血糖的商品試劑盒進(jìn)行性能評價,一、線性范圍試驗(yàn),目的與要求,掌握檢測臨床生化檢驗(yàn)商品試劑盒測定線性范圍的原理和方法，劑量反應(yīng)曲線的匯制，統(tǒng)計方法和性能評價熟悉線性范圍變窄的原因了解影響線性的因素,原理,使用不同濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，用GOD—POD法試劑測定各自的吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，以其對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，在方格紙上作圖，即可繪制出一

2、條直線，即劑量反應(yīng)曲線,過程,試劑操作步驟計算,注意事項(xiàng),葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的加量必須十分準(zhǔn)確，應(yīng)用計量性能準(zhǔn)確度很高的微量加樣器加樣。本法的 線性可達(dá)22.24mmol/L，造成線性變窄的原因是試劑配制中組分投料不足；試劑配制后組分穩(wěn)定性差；因運(yùn)輸、貯存不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致試劑組分的含量發(fā)生變化等,注意事項(xiàng),有的測定特別是酶法測定，當(dāng)酶量相對不足時，用標(biāo)準(zhǔn)液所作的線性范圍可以達(dá)到指定的高限，但在測定同樣高值的 樣品時，結(jié)果卻明顯偏低，這往往是樣

3、品中的介質(zhì)效應(yīng)引起的。,線性范圍確定,測定上限應(yīng)使95％的臨床標(biāo)本不經(jīng)稀釋即可進(jìn)行測定，具體數(shù)值必須通過線性范圍實(shí)驗(yàn)加以確定，因?yàn)闄z測上限是不可超越的界限，當(dāng)測定值高于上限臨界值時，應(yīng)減少標(biāo)本用量或?qū)?biāo)本稀釋后重新測定測定下限實(shí)測多少就報告多少，如未經(jīng)驗(yàn)證，隨意延長測定下限的做法是不正確的,線性范圍評價,通過制作劑量反應(yīng)曲線的實(shí)驗(yàn)可以確定某種測定方法的吸光度—濃度線性范圍，就能為制作實(shí)際工作中使用的校準(zhǔn)曲線打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)對線性范

4、圍內(nèi)的濃度與對應(yīng)吸光度值作直線回歸分析，求出直線的截距a和斜率b，建立直線回歸方程y=a+bx；并作相關(guān)分析，求出相關(guān)系數(shù)（r）。,線性范圍評價,使用高濃度和低濃度臨床標(biāo)本若干分進(jìn)行實(shí)際的線性檢查，理想的情況是該方法的分析范圍的最高濃度上限能使95％的臨床標(biāo)本不經(jīng)稀釋均能得到正確的測定結(jié)果。試劑盒測定線性范圍是該試劑盒按其說明使用時可準(zhǔn)確測量的范圍。,線性范圍評價,觀察試劑盒的測定范圍時，應(yīng)用真實(shí)標(biāo)本如定值血清或標(biāo)準(zhǔn)液操作，高濃度標(biāo)本

5、含量應(yīng)超過說明書上規(guī)定線性上限的20％，整個線性需要五組不同的濃度，每組均需測定4次，并求平均值。一旦線性范圍變窄即應(yīng)放棄。,時間反應(yīng)曲線試驗(yàn),（一）終點(diǎn)法時間反映曲線試驗(yàn),目的要求掌握試劑盒終點(diǎn)法測定反應(yīng)曲線實(shí)驗(yàn)的方法原理，并弄清其試驗(yàn)的意義；終點(diǎn)法測定時間反映曲線圖繪制方法；熟悉試劑盒終點(diǎn)法測定的參數(shù)及其性能評價方法,（一）終點(diǎn)法時間反應(yīng)曲線試驗(yàn),原理終點(diǎn)法測定的是反應(yīng)達(dá)到平衡時產(chǎn)物生成量，這樣才能較可靠的反應(yīng)代測物的量。

6、用稍高于參考值上限的標(biāo)準(zhǔn)液或定值血清，按試劑盒說明書的樣品與試劑比例進(jìn)行測定，以觀察反應(yīng)達(dá)到平衡期的時間以及反映持續(xù)和中止時間，即可分析有關(guān)試劑盒的性能指標(biāo)。,（一）終點(diǎn)法時間反應(yīng)曲線試驗(yàn),試劑操作步驟,（一）終點(diǎn)法時間反應(yīng)曲線試驗(yàn),性能評價試劑空白吸光度是否符合要求試劑空白的反應(yīng)速度時間曲線平坦，吸光度在整個反應(yīng)期間無明顯波動，否則，說明試劑本身不穩(wěn)定，會導(dǎo)致測定偏差。反映能否在規(guī)定時間內(nèi)達(dá)到平衡，達(dá)到平衡時間應(yīng)在臨床生化自動

7、分析儀終點(diǎn)法讀取測定吸光度的時間之前。反應(yīng)測定期觀察,（二）連續(xù)監(jiān)測法時間反應(yīng)曲線試驗(yàn),目的與要求掌握試劑盒連續(xù)檢測法測定時間反應(yīng)曲線的 方法和原理，并弄清試驗(yàn)的意義。連續(xù)檢測法測定時間反應(yīng)曲線圖繪制方法熟悉試劑盒連續(xù)檢測法測定的參數(shù)及其性能評價方法,（二）連續(xù)監(jiān)測法時間反應(yīng)曲線試驗(yàn),原理連續(xù)檢測法測定的實(shí)化學(xué)反應(yīng)的初速度。本試驗(yàn)用HK法測定血糖的試劑盒進(jìn)行測定，觀察動態(tài)反應(yīng)中的延遲期，線性期，混合期的出現(xiàn)，持續(xù)和中止的時間，