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文檔簡介
1、臨床輸血前檢查及配合性試驗(yàn)規(guī)范性要求,吳國光南寧輸血醫(yī)學(xué)研究所,輸血醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué),輸血醫(yī)學(xué)是現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)的組成部分輸血醫(yī)學(xué)是醫(yī)學(xué)發(fā)展史上的重要里程碑輸血醫(yī)學(xué)是最早獲得成功的組織移植輸血醫(yī)學(xué)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要支持手段輸血醫(yī)學(xué)是未來醫(yī)學(xué)成功的重要載體,現(xiàn)代輸血治療理念,各類血液成分的適應(yīng)癥、指征和輸注量,相關(guān)病例的輸血和細(xì)胞治療,輸血不良反應(yīng)的預(yù)防、診斷、處理,確保治療的安全和有效性。,輸血治療的目的,1、補(bǔ)充攜氧能力:
2、輸紅細(xì)胞2、恢復(fù)血容量:輸血漿、白蛋白3、補(bǔ)充膠體滲透壓:輸白蛋白4、血小板異常引起出血:輸血小板5、控制感染:輸粒細(xì)胞6、凝血因子缺乏引起的出血:輸冷凍血漿、低溫沉淀物7、補(bǔ)充體內(nèi)免疫能力:輸免疫球蛋白8、補(bǔ)充人體微量元素:補(bǔ)銅、鋅、鍺等,輸血——救死扶傷的主要醫(yī)療措施,輸血——能對傷病員有害,甚至危及生命,現(xiàn)代輸血醫(yī)學(xué)和細(xì)胞治療學(xué)科工作,★核心問題:血液和血液成分輸注治療的安全和有效性 ,★影響輸血安全性的最主要因
3、素之一 : 血液和血液成分輸注相關(guān)的免疫反應(yīng) Transfusion –related immune reactions,國際性研究項(xiàng)目(Hemovigilance Programs)報告,* 英國輸血不良反應(yīng)調(diào)查;非傳染性的輸血反應(yīng)數(shù)超過95%, 其中主要是輸注相關(guān)的免疫反應(yīng) * 法國、加拿大和美國大量報告,輸血相關(guān)的發(fā)病及致死的案例中,主要來自非輸注相關(guān)的免疫反應(yīng)的危險,,臨床常見嚴(yán)重輸血相關(guān)的免疫反應(yīng),1,急
4、性免疫性溶血反應(yīng)2,延遲性免疫性溶血性反應(yīng)3,發(fā)熱,非溶血性免疫反應(yīng)4,過敏反應(yīng)5,輸血相關(guān)急性肺損傷(TRALI)6,輸血相關(guān)移植物抗宿主?。═A-GVHD)7,血小板同種免疫(HLA,HPA)8,粒細(xì)胞同種免疫(HNA),引發(fā)輸血相關(guān)免疫反應(yīng)的基礎(chǔ)是多態(tài)性的人類血型抗原和遺傳標(biāo)記,1,紅細(xì)胞 抗原: 2,HLA抗原:3,粒細(xì)胞抗原:4,血小板抗原:5,血漿蛋白抗原:,多態(tài)性抗原存在是介導(dǎo)輸血相關(guān)同種免疫
5、反應(yīng)的基礎(chǔ),* 血液的各種主要成分的遺傳多態(tài)性, 紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞等成分都攜帶著有免疫活性的抗原, 人種、人群、地區(qū)的多態(tài)性差異。* 抗原和抗體的免疫應(yīng)答是輸血免疫反應(yīng)問題的根本原因。,輸血前檢查及配合性試驗(yàn),★ 預(yù)防、診斷和治療輸血相關(guān)免疫反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),★血液和血液成分輸注的安全和有效性的技術(shù)保障,★ 血液機(jī)構(gòu)和臨床輸血科的工作基礎(chǔ)。,輸血前檢查及配合性試驗(yàn)的基礎(chǔ)免疫血液學(xué)技術(shù),★免疫血液學(xué):描述各種
6、成份的特異性抗原、抗體和他們的特異性免疫反應(yīng)性,★紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞和血漿蛋白的免疫活性抗原和涉及的抗體導(dǎo)致各類輸血相關(guān)性免疫反應(yīng),★現(xiàn)代免疫血液學(xué)的技術(shù)核心是血型血清學(xué)和分子生物學(xué),構(gòu)成了先進(jìn)水平的臨床輸血前檢查及配合性試驗(yàn)內(nèi)容。,為什么要規(guī)范輸血前檢查及配合性試驗(yàn),☆ 確保結(jié)果的可信度, ☆確保結(jié)果的一致性,☆確保結(jié)果的臨床參考價值,☆為受血者提供安全和有效性的保障。,輸血前檢查及配合性試驗(yàn)?zāi)康暮鸵?★ 為受
7、者選擇血液或血液制品,血液成分在受者體內(nèi)有效存活,無不良反應(yīng), ★ 輸入的紅細(xì)胞在受者體內(nèi)不凝集或不溶血、血小板不破壞、血漿成分不導(dǎo)致受者細(xì)胞顯著破壞, ★輸入的血液或制品與受者血液在免疫血液學(xué)方面“相容”,使受者獲得恢復(fù)健康所需的血液成分。,輸血前檢查及配合性試驗(yàn)的主要程序,①受者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對及處理;②ABO和Rh系定型;③抗體篩選和鑒定;④交叉配血試驗(yàn);⑤標(biāo)簽和發(fā)血。,受者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對及處
8、理,(一)病史資料和信息的要求;(二)標(biāo)本的要求。,ABO和Rh定型,(一) ABO定型和定型試驗(yàn)的規(guī)范性操作; 樣本、試劑、設(shè)備、技術(shù)的要求(二) ABO定型和定型試驗(yàn)中的常見問題。,Rh定型和定型試驗(yàn),(一)Rh定型和定型試驗(yàn) 常規(guī)操作;(二) Rh定型和定型試驗(yàn)中注意的問題。1.導(dǎo)致Rh血型鑒定出現(xiàn)假陽性的原因:2.導(dǎo)致Rh血型鑒定出現(xiàn)假陰性的原因 。,抗體篩選和鑒定(一) 目的和原則,目的:受血者血清和
9、血漿作常規(guī)的抗體篩選試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體,原則:受檢的血清與試劑紅細(xì)胞反應(yīng),發(fā)現(xiàn)37℃中有反應(yīng)活性的抗體。試驗(yàn)環(huán)境和反應(yīng)相:鹽水試驗(yàn)法、白蛋白介質(zhì)法、低離子強(qiáng)度介質(zhì)法(LISS)、酶技術(shù)、抗球蛋白試驗(yàn)、聚凝胺(polybrene)促凝技術(shù)和PEG(聚乙烯乙二醇)促凝技術(shù)和微柱凝集試驗(yàn)等。,抗體篩選和鑒定(二) 抗體篩選和鑒定技術(shù),1.抗體篩選和鑒定實(shí)驗(yàn)的試劑細(xì)胞; 2.抗體的鑒定實(shí)驗(yàn);(1)自身細(xì)胞檢查 ;(
10、2)使用試劑細(xì)胞中的譜紅細(xì)胞(Panel Red Cell)檢查 ,,用自身細(xì)胞檢查抗體,目的:1,質(zhì)控要求; 2,確定血清內(nèi)是否有自身抗體; 3,確定血清內(nèi)是否有自身抗體和同種抗體二者同時存在 。,用譜紅細(xì)胞檢查抗體,1,譜紅細(xì)胞的組成;2,使用的反應(yīng)環(huán)境和特異性技術(shù);3,解釋譜細(xì)胞的反應(yīng)結(jié)果的主要因素 。,交叉配血試驗(yàn),(一) 要求和內(nèi)容 1, “主側(cè)”配血:受血者
11、血清對供者紅細(xì)胞反應(yīng),是檢測對供者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體; 2, “次側(cè)”配血:受血者紅細(xì)胞對供血者血清,是檢測對受者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。3.自身對照:受血者紅細(xì)胞對受血者血清,目的是顯示自身抗體、直接抗球蛋白試驗(yàn)陽性及假陽性的存在。,交叉配血試驗(yàn),(二)影響交叉配血試驗(yàn)的一些因素1,樣本的原因;2,試劑的原因;3,試驗(yàn)條件的原因;4,技術(shù)的原因;5,自身抗體的原因;6,不明的同種抗體的原因。,標(biāo)簽和發(fā)血,(一)要求
12、配、發(fā)血單上,清楚受者的姓名、床號、ABO及Rh血型、醫(yī)院、獻(xiàn)血員姓名、編號、交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的解釋、發(fā)出血液制品的名稱、日期和時間,工作人員的姓名,反復(fù)核對輸血申請單和血液的標(biāo)簽正確無誤,將血液或血液制品及時發(fā)出。(二)責(zé)任 以患者安危為己任,高度科學(xué)性和責(zé)任心,熟練和靈活應(yīng)用免疫血液學(xué)試驗(yàn)的原理和技術(shù),與臨床觀察密切結(jié)合,全面、細(xì)致和綜合觀察和分析試驗(yàn)結(jié)果。使輸血前的檢查工作真正成為患者安全輸血治療的保障。,安全輸血(成分)
13、的免疫血液學(xué)措施和規(guī)范化,,輸紅細(xì)胞前免疫血清學(xué)試驗(yàn)基本內(nèi)容,1,ABO,正反定型,2,Rh D定型,3,抗體篩選和鑒定試驗(yàn)(不同介質(zhì)),4,交叉配合試驗(yàn)(不同介質(zhì))5,在37oC中,供者紅細(xì)胞與受者血清沒有任何反應(yīng),供者血清與受者紅細(xì)胞沒有任何反應(yīng)。,血小板的安全輸注,輸血前免疫血清學(xué)試驗(yàn): 策略和技術(shù)程序1,通常要求血小板ABO配合輸注(沒有國際性的正式規(guī)定),2,如ABO配合的血小板輸注效果差:
14、(1)檢測HLA抗體。(2)選擇ABO和HLA交又配合的血小板供體。3,如果HLA交叉配合的血小板效果不佳,檢測血小板特異性選擇血小板交叉配合的供體。,新鮮冷凍血漿、液體血漿的安全輸注,◎一般不做交叉配血,所輸血漿必須與受者血型相容,不一定要求相同,HLA與安全輸血,HlA抗體和相應(yīng)抗原反應(yīng)的預(yù)防措施,供、受體間淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)交叉配合試驗(yàn),HLA抗體的檢測和鑒定,輸注三洗紅細(xì)胞、冷凍保存復(fù)蘇紅細(xì)胞。使用白細(xì)胞濾器、輸注去白
15、細(xì)胞的血液成分,照射處理血液成分。,低溫沉淀液物的安全輸注,輸血前免疫血清學(xué)檢查選擇血型相容的低溫沉淀物制品,,IgA缺乏受者輸血的特殊要求·,IgA缺乏受者須輸:IgA缺乏的血液制品,避免嚴(yán)重輸血免疫反應(yīng),免疫血液學(xué)技術(shù)規(guī)范化的要素,1. 人員2. 設(shè)備3. 試劑 4. 標(biāo)本5. 采用的技術(shù)6. 記錄7. 其它,常用試劑規(guī)范化的基本要求,1. 水和生理鹽水的質(zhì)控2. 試劑細(xì)胞的質(zhì)控3. 定型血清的質(zhì)
16、控4. 反應(yīng)增強(qiáng)介質(zhì)的質(zhì)控5. 抗球蛋白試劑的質(zhì)控6. 其它試劑的質(zhì)控,技術(shù)操作的規(guī)范化,1,技術(shù)操作的基本質(zhì)量要求,2, 凝集物檢查的質(zhì)量保證,3, 結(jié)果的解釋及實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄,4,凝集的判讀與記錄的質(zhì)量保證5,嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)操作規(guī)程,技術(shù)人員技術(shù)素質(zhì)的規(guī)范化,1. 掌握基本的血型血清學(xué)技術(shù)和知識,2. 了解血型抗體特性,抗體鑒定須知,3. 了解各項(xiàng)技術(shù)的長處和缺陷,4. 心理素質(zhì)和職業(yè)道德的的要求,5. 新知識
17、和技術(shù)的了解和追求。,結(jié)言,★規(guī)范化輸血前檢查及配合性試驗(yàn),才能及時和正確的處理血型血清學(xué)疑難問題及異常結(jié)果,是輸血醫(yī)學(xué)服務(wù)機(jī)構(gòu)的重要任務(wù),高質(zhì)量和高水平服務(wù)的體現(xiàn)?!锩庖哐簩W(xué)的技術(shù)人員是解決問題的主體,必須全面理解和操作各項(xiàng)試驗(yàn)過程,掌握解決疑難問題的技巧和能力。,共同提高,★南寧輸血醫(yī)學(xué)研究所掌握目前國際上先進(jìn)的免疫血液學(xué)技術(shù)和相關(guān)的分子免疫血液學(xué)技術(shù), 并開展了進(jìn)一步的研究和臨床應(yīng)用工作.★南寧輸血醫(yī)學(xué)研究所將作為一個開放的
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