第4章-微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基

1、第四章,微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基,自學(xué)內(nèi)容,營養(yǎng)、營養(yǎng)物異養(yǎng)微生物、自養(yǎng)微生物、雙功能營養(yǎng)物氨基酸自養(yǎng)型生物、異養(yǎng)型生物能源及能源譜生長(zhǎng)因子，生長(zhǎng)因子自養(yǎng)型微生物，生長(zhǎng)因子異養(yǎng)型微生物，生長(zhǎng)因子過量合成型微生物無機(jī)鹽及其作用,營養(yǎng)物（營養(yǎng)作用，nutrient）,指具有營養(yǎng)功能的物質(zhì)在微生物學(xué)中，常常還包括光能這種非物質(zhì)形式的能源在內(nèi)。微生物的營養(yǎng)物可為它們正常生命提供結(jié)構(gòu)物質(zhì)、能量、代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境。,營養(yǎng)（營養(yǎng)

2、作用，nutrition）,是指生物體從外部環(huán)境攝取其生命活動(dòng)所必需的能量和物質(zhì)，以滿足其生長(zhǎng)和繁殖需要的一種生理功能。營養(yǎng)物質(zhì)作用參與細(xì)胞組成構(gòu)成酶的活性成分與物質(zhì)運(yùn)輸系統(tǒng)提供機(jī)體進(jìn)行各種生理活動(dòng)能量,第一節(jié) 微生物的營養(yǎng)素,微生物的培養(yǎng)基配方猶如菜譜，新的種類是層出不窮的。不論從元素水平還是從營養(yǎng)要素的水平來看，微生物的營養(yǎng)與攝食型的動(dòng)物（包括人類）和光合自養(yǎng)型的植物非常相似，它們之間存在著“營養(yǎng)上的統(tǒng)一性”微生物有六種

3、營養(yǎng)要素，即碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽和水。,一、微生物的化學(xué)組成,微生物與動(dòng)植物相同，都需要20種元素，C H O N P S 六種元素為主，占細(xì)菌干重97％，還包括：K Na Mg Ca Fe Mn Cu Co Zn 分類：碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、水有機(jī)物有蛋白質(zhì)、糖、脂、核酸、維生素及其降解產(chǎn)物與代謝產(chǎn)物等物質(zhì)組成。水是細(xì)胞中主要成分，占干重的90％，賦予細(xì)胞的遺傳連續(xù)性、透性和生化活性。,微生物的化學(xué)組

4、成是動(dòng)態(tài)的，依種類、培養(yǎng)條件、菌齡而改變；幼齡 N多微生物細(xì)胞含某種元素量多則細(xì)胞對(duì)這種元素的需要量就大，含量低則需要量少；,（一）碳源物質(zhì)除水外含量最大——大量營養(yǎng)素,凡可以被M用來構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)的或代謝產(chǎn)物中碳素來源的營養(yǎng)物質(zhì)稱碳源物質(zhì)；從碳源譜的大類來看，有有機(jī)碳源與無機(jī)碳源兩大類，凡必須利用有機(jī)碳源的微生物，就是為數(shù)眾多的異養(yǎng)微生物，凡能利用無機(jī)碳源的微生物，則是自養(yǎng)微生物。微生物細(xì)胞含碳量占干重50%。,,微生物的碳源

5、譜,微生物的碳源譜雖然很廣，但對(duì)異養(yǎng)微生物來說，其最適碳源則是“C·H·O”型。其中，糖類是最廣泛利用的碳源，其次是醇類、有機(jī)酸類和脂類等。在糖類中，單糖勝于雙糖和多糖，已糖勝于戊糖，葡萄糖、果糖勝于甘露糖、半乳糖；在多糖中，淀粉明顯地優(yōu)于纖維素或幾丁質(zhì)等純多糖，純多糖則優(yōu)于瓊脂等雜多糖和其他聚合物。,對(duì)異養(yǎng)微生物來說，它的碳源同時(shí)又充作能源，這時(shí)，可認(rèn)為碳源是一種雙功能的營養(yǎng)物。異養(yǎng)細(xì)菌雖然必須利用各種有機(jī)

6、碳源，但不少種類尤其是生長(zhǎng)在動(dòng)物的血液、組織和腸道中的致病微生物，還需要少量二氧化碳才能正常生長(zhǎng)，因此，在培養(yǎng)它們時(shí)，常要提供10% CO2；在其他好氧微生物生長(zhǎng)時(shí)，如果用KOH除CO2，也往往對(duì)其生長(zhǎng)有抑制。,不同微生物利用碳源的能力不同。 有的能廣泛地利用，如假單孢菌屬有些種可利用90種以上的碳源， 有的碳源范圍極其狹窄，如甲烷氧化菌僅能利用甲烷和甲醇。,二、氮源,凡是提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需要氮元素營養(yǎng)源，稱為氮源(nitroge

7、n source)。 細(xì)胞的干物質(zhì)中氮含量?jī)H次于碳和氧。 氮是組成核酸和蛋白質(zhì)的重要元素， 氮對(duì)微生物的生長(zhǎng)發(fā)育有著重要的作用。,無機(jī)氮源：N2 N+O：硝酸鹽 N+H：胺類 有機(jī)氮源：N+C+H+O：尿素、氨基酸 N+C+H+O+X：蛋白質(zhì)、核酸 氨基酸自養(yǎng)型生物：自身合成 氨基酸異養(yǎng)型生物：

8、外界吸收,許多腐生性細(xì)菌、腸道菌、動(dòng)植物致病菌一般都能利用銨鹽或硝酸鹽作N源，E coli、產(chǎn)氣桿菌、枯草芽孢桿菌、綠膿桿菌、防線菌可利用硝酸鉀作N源，霉菌可利用硝酸鈉作N源；牛肉膏、蛋白胨、酵母粉、魚粉、蠶蛹粉、黃豆餅粉、花生餅粉、玉米漿為實(shí)驗(yàn)室氮源；,能利用N2生長(zhǎng)微生物,營非共生生活的好氧型自生固N(yùn)菌；兼性厭氧型的克氏肺炎桿菌；厭氧型的巴氏固N(yùn)梭菌；營共生生活的固N(yùn)菌－根瘤菌；在含化合態(tài)N培養(yǎng)基時(shí)固N(yùn)菌利用化合態(tài)N，無

9、時(shí)利用還原大氣中分子態(tài)N。,三、能源,能為M生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射能；化學(xué)能： 有機(jī)物：碳源為能源； 無機(jī)物：不同于碳源，如 S、H2S 光能：可見光,四、無機(jī)鹽,為機(jī)體生長(zhǎng)提供必需的金屬元素，Na K Mg Fe 及硫酸鹽、磷酸鹽、氯化物；生理作用：參與酶組成，構(gòu)成酶最大活性；維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定；調(diào)節(jié)與維持細(xì)胞的滲透壓平衡；控制細(xì)胞的氧化還原電位；作為某些M生長(zhǎng)的能源物質(zhì)。,P、S、K、M

10、g、Na、Fe：10-3---10-4 Cu、Zn、Mn、Mo、Co等：10-6---10-8 K2HPO4 + MgSO4 大量使用有毒、微量元素一般不需專門添加；,磷：合成核酸、pro、核pro、磷脂與其它含p化合物的重要元素。 是許多酸，輔酶的重要組成元素。（NAD NADP、輔酶A）。 核苷酸GTP、ATP、CTP、UTP等在cell物質(zhì)合成與能量傳遞和儲(chǔ)存過程中起重要作用。 對(duì)環(huán)境pH起調(diào)節(jié)作用（磷酸Buf

11、fer）。,硫：,是胱Aa、半胱Aa、甲硫Aa的組成元素之一，是構(gòu)成Pro的主要成分。參與一些生理代謝活性物質(zhì)的組成，如硫胺素、生物素、輔酶A等。硫或硫化物也能作為某些M的能源物質(zhì)。,鎂：,構(gòu)成某些酶的活性成分，如已糖磷酸化酶、異檸檬酸脫H酶或使酶活性到最大；是光合M的光合色素——葉綠素或細(xì)菌葉綠素的組成元素，在光能轉(zhuǎn)換上起重要作用。在M cell中某些cell結(jié)構(gòu)如核糖體、cell膜等的穩(wěn)定上起重要作用。G＋需要量>G

12、-，缺鎂，核糖體與cell膜穩(wěn)定性降低，影響機(jī)體正常生長(zhǎng)。,鐵,是M cell內(nèi)H2O2酶，過氧化物酶、cell色素與cell色素氧化酶的組成元素；是某些鐵細(xì)菌生長(zhǎng)的能源物質(zhì)，因此缺Fe使機(jī)體內(nèi)的某些代謝活性降低或喪失，細(xì)菌得不到能量；Ecoli在缺Fe培養(yǎng)基中不能合成足夠的甲酸脫H酶，因而在發(fā)酵葡萄糖時(shí)不產(chǎn)生氣體；白喉?xiàng)U菌在Fe充足時(shí)，不形成白喉毒素，在Fe不足時(shí)，能合成大量白喉毒素，通過控制Fe濃度，控制產(chǎn)毒素能力。,微量元素

13、M生長(zhǎng)還需要一些元素，需要量少，如無特殊原因不額外加，過量有毒害作用。,五、生長(zhǎng)因子,微生物生長(zhǎng)所必須、需要量很小、一般不能用簡(jiǎn)單的碳、氮源自行合成的有機(jī)物。 維生素、氨基酸 、堿基、甾醇等；生長(zhǎng)因子自養(yǎng)型微生物：不需要 生長(zhǎng)因子異養(yǎng)型微生物：吸收生長(zhǎng)因子過量合成型微生物,功能,（1）構(gòu)成細(xì)胞的組成成分。（2）作為酶的組成成分。（3）維持酶的活性。（4）調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓，氫離子濃度和氧化還原電位。（5）作為某些自養(yǎng)菌的能源

14、。,六、水,(1) 直接參與一些反應(yīng)。如藍(lán)細(xì)菌 (2) 作為機(jī)體內(nèi)一系列生理生化反應(yīng)的介質(zhì)。 (3) 營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、代謝產(chǎn)物的排泄都需通過水(4) 由于水的比熱高，又是良好的熱導(dǎo)體，能有效吸收代謝中放出的熱并將吸收的熱迅速散發(fā)出去，避免導(dǎo)致胞內(nèi)溫度陡然升高——控制胞內(nèi)溫度;,,,水在細(xì)胞中有兩種存在形式：結(jié)合水和游離水。 結(jié)合水，很難加以利用。 游離水（或稱非結(jié)合水）則可以被微生物利用。,不同生物及不同細(xì)胞結(jié)構(gòu)中

15、游離水的含量有較大的差別：,人體 平均60% 海蜇 ?96% 霉菌孢子 ?39% 孢子 細(xì)菌芽孢 皮層 ?70% 微生物 核心 30% 營養(yǎng)體 細(xì)菌 ?80%

16、 酵母 ?75% 霉菌 ?85%,,,,第二節(jié) 微生物的營養(yǎng)類型,微生物的營養(yǎng)類型,能源：光能營養(yǎng)型、化能營養(yǎng)型 供氫體：無機(jī)營養(yǎng)型、有機(jī)營養(yǎng)型 碳源：自養(yǎng)型、異養(yǎng)型 氨基酸：氨基酸自養(yǎng)型、氨基酸異養(yǎng)型 生長(zhǎng)因子：原養(yǎng)型、缺陷型 獲取有機(jī)物：腐生、寄生,不同營養(yǎng)類型之間界限并非絕對(duì)紫色非硫細(xì)菌 沒有有機(jī)物 同化CO2，有機(jī)物存在，利用有機(jī)物光照厭氧，

17、利用光，黑暗有氧，依靠有機(jī)物產(chǎn)生的化學(xué)能,第三節(jié) 營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式,一、單純擴(kuò)散（O2、CO2、乙醇等） 特點(diǎn)：高濃度-----------低濃度 運(yùn)送速度慢 無特異載體 運(yùn)送動(dòng)力：濃度差 運(yùn)送終點(diǎn)：內(nèi)外濃度相等 運(yùn)送前后溶質(zhì)分子：結(jié)構(gòu)不變,二、促進(jìn)擴(kuò)散（氨基酸、維生素等）,特點(diǎn)：高濃度

18、 低濃度 運(yùn)送速度快 有特異載體 運(yùn)送動(dòng)力：濃度差 運(yùn)送終點(diǎn)：內(nèi)外濃度相等 運(yùn)送前后溶質(zhì)分子：結(jié)構(gòu)不變,,,,,促進(jìn)擴(kuò)散,三、主動(dòng)運(yùn)送（無機(jī)離子、有機(jī)離子等）,特點(diǎn)：低濃度 高濃度 運(yùn)送速度快 有特異載體 運(yùn)送動(dòng)力：消耗能量ATP

19、 運(yùn)送終點(diǎn)：內(nèi)外濃度高得多 運(yùn)送前后溶質(zhì)分子：結(jié)構(gòu)不變,,,主動(dòng)運(yùn)送,四、基團(tuán)移位（各種糖類、核苷酸等）,特點(diǎn)：低濃度 高濃度 運(yùn)送速度快 有特異載體 運(yùn)送動(dòng)力：消耗能量ATP 運(yùn)送終點(diǎn)：內(nèi)外濃度高得多 運(yùn)送前后溶質(zhì)分子：結(jié)構(gòu)改變,,大腸桿菌的磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖 酶Ⅰ：非特異

20、性 酶Ⅱ：特異性載體 HPr：熱穩(wěn)定性蛋白（分子量低、可溶性） PEP：磷酸烯醇式丙酮酸,熱穩(wěn)蛋白的激活 酶Ⅰ PEP + HPr HPr~磷酸 + 丙酮酸 糖被磷酸化運(yùn)入膜內(nèi)膜外環(huán)境中的G先與膜外表面的底物特異蛋白酶IIc結(jié)合糖分子被磷酸集團(tuán)激活

21、 酶Ⅱ（IIa IIb） HPr~磷酸 + 糖 糖~磷酸 + HPr (在膜上) 通過酶IIc再把這一磷酸糖釋放到細(xì)胞質(zhì)中,,,,,,,基團(tuán)移位,甘露醇,第四節(jié) 培養(yǎng)基,培養(yǎng)基:人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合營養(yǎng)基質(zhì)。許多微生物能夠在人工培養(yǎng)基上

22、生長(zhǎng)；,一、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則和方法,根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基；（一）4個(gè)原則 1、目的明確 2、營養(yǎng)協(xié)調(diào) 3、理化適宜 4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約,1、目的明確 培養(yǎng)何菌？自養(yǎng)菌？異養(yǎng)菌？種子菌？發(fā)酵菌？實(shí)驗(yàn)用？生產(chǎn)用？ 收獲何物？收獲菌體？收獲產(chǎn)物？產(chǎn)物成分含氮如何？,2、營養(yǎng)協(xié)調(diào) 基本遵循10倍遞減關(guān)系 注重C/N比 H20 （10-1）> C （10-2）> N（10-3）

23、> （P、S） （10-4） > K、Mg （10-5） >生長(zhǎng)因子（10-6）真菌C/N高，細(xì)菌C/N低,,3、理化適宜 （1）pH （2）滲透壓（3）氧化還原電位,（1）pH,細(xì)菌：6.5-7.5放線菌：7.5-8.5 酵母:3.8-6.0霉菌：4.0-5.8 藻類：6.0－7.0生長(zhǎng)過程需要及時(shí)調(diào)節(jié)：緩沖液、CaCO3、NaHCO3等內(nèi)源調(diào)節(jié)及外源調(diào)節(jié),（2）滲透壓與水活度,滲透壓的大小由溶液中

24、的質(zhì)點(diǎn)數(shù)決定，等重物質(zhì)，分子或離子越小，質(zhì)點(diǎn)數(shù)越多，滲透壓越大，等滲最適于微生物生長(zhǎng) 水活度（aw）：W可以利用的自由水或游離水的含量 同溫同壓下 aw=P/P0 0.998—0.60 P：溶液蒸汽壓，P0：純水蒸汽壓Aw過低時(shí)，微生物生長(zhǎng)遲緩期延長(zhǎng)，生長(zhǎng)速度和總生長(zhǎng)量減少,（3）氧化還原電位,還原劑釋放電子與氧化劑接受電子的趨勢(shì) 好氧菌：Eh：+0.3--+0.4 厭氧菌：Eh：+0.1以下（除氧+還原劑） 兼性

25、厭氧菌：Eh：0.1以上好氧呼吸 0.1以下厭氧發(fā)酵指示劑－刃天青：無氧呈無色，有氧顏色與溶液pH有關(guān)，中性－紫色，堿性－藍(lán)色，酸性－紅色，微含氧－粉紅色,,氧化還原電勢(shì)的調(diào)節(jié),在培養(yǎng)基中加入還原性物質(zhì)能降低Eh以培養(yǎng)厭氧微生物，常用還原劑：巰基乙酸、抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇向培養(yǎng)基中通入空氣或加氧化劑提高Eh培養(yǎng)好氧菌Eh為培養(yǎng)基中成分的綜合結(jié)果,4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約 以粗

26、代精、以廢代好、以簡(jiǎn)代繁 以國代進(jìn)等等,,,（二）4種方法生態(tài)模擬 參閱文獻(xiàn) 精心設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)比較,培養(yǎng)基配制注意的問題,沉淀瓊脂膠體強(qiáng)度的破壞褐色物質(zhì)的形成pH發(fā)生變化,培養(yǎng)基的滅菌,高壓蒸汽滅菌 一般培養(yǎng)基，含糖培養(yǎng)基過濾滅菌分別滅菌間歇滅菌器皿的滅菌和無菌室的消毒,二、培養(yǎng)基的種類,（一）按培養(yǎng)基成分分類 （二）按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)分類 （三）按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能分類 （四）其它分類,（一）按培

27、養(yǎng)基成分分類,1、天然培養(yǎng)基 用天然成分（動(dòng)、植物，微生物體）制成的培養(yǎng)基 優(yōu)點(diǎn)：營養(yǎng)豐富、價(jià)格低廉 缺點(diǎn)：成分不清楚、不穩(wěn)定 適于：菌種培養(yǎng)、發(fā)酵生產(chǎn)牛肉膏蛋白胨、麥芽汁培養(yǎng)基,,,,2、組合培養(yǎng)基（合成培養(yǎng)基） 高純度化學(xué)試劑配制的培養(yǎng)基 優(yōu)點(diǎn)：成分精確、重現(xiàn)性高 缺點(diǎn)：價(jià)格較高、微生物生長(zhǎng)一般 適于：生理、生化、代謝、菌種鑒定研究等高氏一號(hào)培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基,3、半組合培養(yǎng)基 化學(xué)試劑

28、 + 天然成分 實(shí)際應(yīng)用過程中大多數(shù)為半組合培養(yǎng)基馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,根據(jù)微生物類群來分四種菌的實(shí)驗(yàn)室常用培養(yǎng)基（1） 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基------細(xì)菌牛肉膏 5g ，氯化納 5g，蛋白胨 10g，水 1000ml，pH7.2-7.4 （2） 高氏一號(hào)培養(yǎng)基-------放線菌 可溶性淀粉 20g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g ，NaCl 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，F(xiàn)eSO4 0.01g

29、，水1000ml pH7.2-7.4,（3） 麥芽汁培養(yǎng)基---------酵母菌干麥粉加4倍水，在60度保溫3～4h，用碘液試驗(yàn)至糖化完全為止，調(diào)糖度為100巴林，煮沸過濾，pH5-6.0 （4） 察氏培養(yǎng)基------------霉菌NaNO3 3g，F(xiàn)eSO4 0.01g ，K2HPO4 Ig，KCl 0.5g ，MgSO4.7H2O 0.5g，蔗糖 30g ，H2O 1000ml ，pH5--6,1．固體培養(yǎng)基：外觀呈固

30、態(tài)的培養(yǎng)基（1）天然固體培養(yǎng)基：天然固體狀基質(zhì)直接制成的培養(yǎng)基。如，麩皮、米糠、稻草粉配制的真菌培養(yǎng)基；（2）非可逆性固體培養(yǎng)基：由血清凝固成或無機(jī)硅膠配制的培養(yǎng)基。適合于分離自養(yǎng)型微生物。（3）凝固培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基中加入1-2%瓊脂或5-12%明膠作凝固劑，加熱融化，冷卻后凝固。,（二）按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)分類,凝固劑------瓊脂的特點(diǎn)a) 不被微生物液化分解和利用；b) 在微生物的生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)能保持固

31、體狀態(tài)；c) 凝固點(diǎn)的溫度對(duì)微生物無害；d)  不會(huì)因培養(yǎng)基滅菌而被破壞；e)  透明度好，粘著力強(qiáng)； f)   配制方便、價(jià)格低。,瓊脂------其熔點(diǎn)96℃，凝固點(diǎn)40℃ 明膠-------熔點(diǎn)28--35℃，凝固固體培養(yǎng)基為微生物提供了一個(gè)營養(yǎng)表面，可以形成單個(gè)菌落，在微生物的分離、鑒定、計(jì)數(shù)、保藏等方面起重要作用。 （4）濾膜,2．半

32、固體培養(yǎng)基： 一般用0.2%--0.7%瓊脂作凝固劑 用作觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)特征、噬菌體效價(jià)、各種厭氧菌的培養(yǎng)及菌種保藏等。3．液體培養(yǎng)基： 不含任何凝固劑，它常用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物生理代謝等研究。,4、脫水培養(yǎng)基干燥培養(yǎng)基 使用時(shí)加入適量水、滅菌即可 使用方便,1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基 含有一般微生物生長(zhǎng)所需的基本營養(yǎng)成分；也可以作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分2.選擇性培養(yǎng)基： 就是根據(jù)某種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)

33、需要或?qū)δ撤N化合物的敏感性不同而設(shè)計(jì)出來的一類培養(yǎng)基。 利用這種培養(yǎng)基可以將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來。,（三）按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能分類,加富性選擇培養(yǎng)基-------投其所好，形成優(yōu)勢(shì)，使原先極少量的篩選對(duì)象很快在數(shù)量上接近或超過原試樣中其他占優(yōu)勢(shì)的微生物，富集和增殖。 抑制性選擇培養(yǎng)基--------抑制其它菌生長(zhǎng) 兩者功能疊加使用，利用其對(duì)某種制菌微生物的抗性，使原試樣中敏感菌死亡纖維素培養(yǎng)基、無氮培養(yǎng)基

34、。,3.鑒別培養(yǎng)基： 可以用于鑒別某種或某一類微生物的培養(yǎng)基。 一般通過加入某些試劑，使得某種或某類微生物的菌落發(fā)生顏色變化，肉眼從近似菌落中找出目的菌落的培養(yǎng)基，便于區(qū)別。例如：伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基 EMB， 用于飲用水、牛奶中的大腸菌群的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)蛋白胨 10g，乳糖 5g，蔗糖5g，K2HPO4 2g，伊紅Y 0.4g，美藍(lán)0.065g，蒸餾水1000ml，pH7.2,EMB培養(yǎng)基 伊紅 美藍(lán)------苯胺染料，

35、抑制G+菌和一些難培養(yǎng)的G－細(xì)菌。低酸下----兩種染料結(jié)合，作產(chǎn)酸指示劑作用，大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)大量混合酸，菌表面帶H＋，菌落深紫色、菌落表面有綠色金屬光澤；其它幾種產(chǎn)酸力弱的腸道菌呈棕色，因此為鑒別培養(yǎng)基，也具有選擇革蘭氏陰性菌的作用。,試樣：G＋菌受抑制，獲得G-；能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸：產(chǎn)酸強(qiáng)，菌落紫色有綠色金屬光：大腸桿菌產(chǎn)酸弱，菌落棕色：腸桿菌屬、沙雷氏菌屬、克雷伯氏菌屬、哈夫尼菌屬不發(fā)酵乳糖、不產(chǎn)酸：菌落無色透明