實(shí)驗(yàn)四 液相色譜法測(cè)定苯甲酸、山梨酸含量

1、1周次日期課時(shí)安排3課時(shí)課題實(shí)驗(yàn)三液相色譜法測(cè)定苯甲酸、山梨酸含量重點(diǎn)難點(diǎn)教學(xué)目標(biāo)1、了解高效液相色譜儀的結(jié)構(gòu)和工作原理；2、理解苯甲酸和山梨酸的高效液相色譜方法。教學(xué)方法教學(xué)手段1要求學(xué)生實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，實(shí)驗(yàn)前教師檢查并批改預(yù)習(xí)報(bào)告，了解學(xué)生預(yù)習(xí)情況。2實(shí)驗(yàn)前先進(jìn)行重點(diǎn)的講解和示范基本操作、實(shí)驗(yàn)步驟中的注意事項(xiàng)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中巡回指導(dǎo)。教學(xué)過(guò)程實(shí)驗(yàn)操作參考GBT5009.292003食品中山梨酸、苯甲酸的測(cè)定第二法高效液相色譜法一

2、、原理一、原理試樣加溫除去二氧化碳和乙醇，調(diào)pH至近中性，過(guò)濾后進(jìn)高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離后，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性和定量。二、試劑二、試劑方法中所用試劑，除另有規(guī)則外，均為分析純?cè)噭疄檎麴s水或同等純度水，溶液為水溶液。甲醇：經(jīng)濾膜（0.5μm）過(guò)濾。稀氨水（11）：氨水加水等體積混合。乙酸銨溶液（0.02molL）：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL，溶解，經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾。碳酸氫鈉溶液（20gL）：稱取2

3、g碳酸氫鈉（優(yōu)級(jí)純），加水至100mL，振搖溶解。苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取0.1000g苯甲酸，加碳酸氫鈉溶液（20gL）5mL，加熱溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量為1mgmL，作為儲(chǔ)備溶液。3推一針濃度峰面積提取10ml雪碧（只含苯甲酸）稀釋至50ml稀釋五倍六個(gè)芒果（只含山梨酸）45組雪碧樣品min246810mAU20020406080100120140160VWD1AWavelength=23

4、0nm(C:CHEM321DATA20140623名名名名名20141019104510.D)1.7811.9972.2012.3452.6817.70245組芒果樣品min24681012mAU050100150200250300VWD1AWavelength=230nm(C:CHEM321DATA20140623名名名名名20141019105701.D)1.4051.9222.1642.3572.4952.6262.8312.97