2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、微生物常規(guī)鑒定技術(shù)微生物常規(guī)鑒定技術(shù)一、形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特性觀察一、形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特性觀察1、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察主要是通過染色,在顯微鏡下對其形狀、大小、排列方式、細(xì)胞結(jié)構(gòu)(包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性進(jìn)行觀察,直觀地了解細(xì)菌在形態(tài)結(jié)構(gòu)上特性,根據(jù)不同微生物在形態(tài)結(jié)構(gòu)上的不同達(dá)到區(qū)別、鑒定微生物的目的。2、細(xì)菌細(xì)胞在固體培養(yǎng)基表面形成的細(xì)胞群體叫菌落(colony)。不同微生物在某種培養(yǎng)基中生長繁殖,所形成的菌落

2、特征有很大差異,而同一種的細(xì)菌在一定條件下,培養(yǎng)特征卻有一定穩(wěn)定性。,以此可以對不同微生物加以區(qū)別鑒定。因此,微生物培養(yǎng)特性的觀察也是微生物檢驗(yàn)鑒別中的一項(xiàng)重要內(nèi)容。1)細(xì)菌的培養(yǎng)特征包括以下內(nèi)容:在固體培養(yǎng)基上,觀察菌落大小、形態(tài)、顏色(色素是水溶性還是脂溶性)、光澤度、透明度、質(zhì)地、隆起形狀、邊緣特征及遷移性等。在液體培養(yǎng)中的表面生長情況(菌膜、環(huán))混濁度及沉淀等。半固體培養(yǎng)基穿刺接種觀察運(yùn)動(dòng)、擴(kuò)散情況。2)霉菌酵母菌的培養(yǎng)特征:大

3、多數(shù)酵母菌沒有絲狀體,在固體培養(yǎng)基上形成的菌落和細(xì)菌的很相似,只是比細(xì)菌菌落大且厚。液體培養(yǎng)也和細(xì)菌相似,有均勻生長、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的絲狀體,菌絲粗長,在條件適宜的培養(yǎng)基里,菌絲無限伸長沿培養(yǎng)基表面蔓延。霉菌的基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲都常帶有不同顏色,因而菌落邊緣和中心,正面和背面顏色常常不同,如青霉菌:孢子青綠色,氣生菌絲無色,基內(nèi)菌絲褐色。霉菌在固體培養(yǎng)表面形成絮狀、絨毛狀和蜘蛛網(wǎng)狀菌落。革蘭氏染色革蘭氏染色:革

4、蘭氏染色法是1884年由丹麥病理學(xué)家C.Gram所創(chuàng)立的。革蘭氏染色法可將所有的細(xì)菌區(qū)分為革蘭氏陽性菌(G)和革蘭氏陰性菌(G—)兩大類,是細(xì)菌學(xué)上最常用的鑒別染色法。該染色法所以能將細(xì)菌分為G菌和G—菌,是由這兩類菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和成分的不同所決定的。G—菌的細(xì)胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質(zhì),而且肽聚糖層較薄、交聯(lián)度低,故用乙醇或丙酮脫色時(shí)溶解了類脂質(zhì),增加了細(xì)胞壁的通透性,使初染的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物易于滲出,結(jié)果細(xì)菌就被脫色,再經(jīng)

5、蕃紅復(fù)染后就成紅色。G菌細(xì)胞壁中肽聚糖層厚且交聯(lián)度高,類脂質(zhì)含量少,經(jīng)脫色劑處理后反而使肽聚糖層的孔徑縮小,通透性降低,因此細(xì)菌仍保留初染時(shí)的顏色步驟:(1)涂片:涂片方法與簡單染色涂片相同。(2)晾干:與簡單染色法相同。(3)固定,與簡單染色法相同(4)結(jié)晶紫色染色:將玻片置于廢液缸玻片擱架上,加適量(以蓋滿細(xì)菌涂面)的結(jié)晶紫染色液染色1分鐘。(5)水洗:傾去染色液,用水小心地沖洗。(6)媒染:滴加盧哥氏碘液,媒染1min。(7)水洗

6、:用水洗去碘液。(8)脫色:將玻片傾斜,連續(xù)滴加95%乙醇脫色20—25s至流出液無色,立即水洗。(9)復(fù)染:滴加蕃紅復(fù)染5min。(10)水洗:用水洗去涂片上的蕃紅染色液。(11)晾干:將染好的涂片放空氣中晾干或者用吸水紙吸干。(12)鏡檢:鏡檢時(shí)先用低倍,再用高倍,最后用油鏡觀察,并判斷菌體的革蘭氏染色反應(yīng)性。(13)實(shí)驗(yàn)完畢后的處理:①將浸過油的鏡頭按下述方法擦拭干凈,a.先用擦鏡紙將油鏡頭上的油擦去。b.用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡

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