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文檔簡介
1、松阿扁葉蜂松阿扁葉蜂SSRSSR摘要:以sds-蛋白酶k法提取的松阿扁葉蜂(acantholydaposticalismatsumura)基因組dna為模板,利用l16(45)正交設計對影響松阿扁葉蜂ssr-pcr反應的主要參數(shù)dna模板、taqdna聚合酶、mg2+、引物和dntps進行優(yōu)化。結果表明,松阿扁葉蜂ssr-pcr最優(yōu)的反應體系為25μl體系中含1.00utaqdna聚合酶、300mmol/lmg2+、375mmol/ld
2、ntps、2500ng/μldna模板和1000μmol/l引物。關鍵詞:松阿扁葉蜂(acantholydaposticalismatsumura);ssr-pcr;正交設計abstract:inordertoestablishthessr-pcramplificationsystemusinggenomicdnaofacantholydaposticaliswhichwasextractedbysds-proteinasekmetho
3、dastemplate,orthogonaldesign主選擇[7]、防治技術和預測預報[8,9]等方面,但關于該害蟲種群遺傳變異的研究至今未見報道。微衛(wèi)星(ssr)分子標記具有分布廣泛、多態(tài)性高、穩(wěn)定性好、操作簡便、檢測技術簡單及共顯性遺傳等優(yōu)點,已被廣泛應用于物種資源遺傳多樣性研究、基因分子標記以及昆蟲遺傳多樣性研究等領域。但ssr-pcr反應結果易受反應體系中多種因素的影響,因此需要對其擴增體系進行優(yōu)化,然后才能進行后續(xù)的試驗分析
4、;此外,不同物種所需的ssr-pcr反應的最佳反應體系一般也不盡相同。在進行種群遺傳多樣性的研究中,運用正交設計方法[10-12]對影響松阿扁葉蜂ssr-pcr反應的各因素進行了優(yōu)化試驗,建立了一套適合松阿扁葉蜂ssr-pcr的反應體系,為應用該技術進行松阿扁葉蜂的種群遺傳多樣性分析打下基礎。1材料與方法11材料111原料供試材料為2010年6月采自陜西省周至縣樓觀臺國家森林公園為害油松的松阿扁葉蜂幼蟲,樣品保存于體積分數(shù)為95%的乙醇
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