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文檔簡介
1、本文以160粒馬尾松胚乳為作圖材料，利用235對SSR引物，構(gòu)建了馬尾松的遺傳連鎖框架圖譜，主要研究成果如下：
1、通過比較CTAB和SDS兩種方法，發(fā)現(xiàn)SDS法比較適合馬尾松胚乳DNA提取。
2、確定了適合馬尾松胚乳的最佳SSR反應體系：10μL反應體系中，模板DNA為15ng，引物濃度為0.1μM，dNTP濃度為0.3mM，Mg2+濃度為2.0mM，Taq酶濃度為1.0U。擴增程序為：94℃，4min；9
2、4℃，30s； Tm-5℃，15s；72℃，30s:，40cycles；72℃延伸30min；4℃保溫。擴增產(chǎn)物在8％PAGE膠上分離檢測，銀染法顯帶。試驗證明擴增效果好，條帶豐富，穩(wěn)定性強，重復性好。
3、利用篩選出的多態(tài)SSR引物30對，對160個胚乳個體進行檢測，獲得分離位點97個，平均1.62位點/引物。
4、連鎖圖譜構(gòu)建用FsLinkageMap2.0軟件。通過對86個標記的連鎖關(guān)系進行分析，獲得一
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