檢定菌保存、傳代、使用、銷毀標準操作規(guī)程

1、檢定菌保存、傳代、使用、銷毀標準操作規(guī)程檢定菌保存、傳代、使用、銷毀標準操作規(guī)程1目的：目的：規(guī)范藥品微生物學檢定用菌的管理，最大限度降低變異率，確保菌種的溯源性與穩(wěn)定性，從而確保微生物學檢驗結果的準確可靠。2依據(jù)：依據(jù)：ChP2010版（一部）、《中國藥品檢驗標準操作規(guī)范》（2010年版）。3范圍：范圍：本規(guī)程適用于檢定用菌種的管理，包括菌種的申購、保存、傳代、使用及銷毀等。4責任：責任：4.1.QC主管負責菌種的申購、接受、保存、分

2、發(fā)。4.2.微生物檢驗員負責菌種的確認、傳代、使用及銷毀。5.5.相關文件及術語：相關文件及術語：5.1術語標準菌種是指由中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學微生物菌種保藏管理中心提供的冷凍干燥菌。傳代用菌種是指用標準菌種制備的采用特定保存方法長期固定保存的菌種，用于傳代及制備工作用菌種。工作用菌種是指用標準菌種或傳代用菌種接種至普通瓊脂斜面培養(yǎng)后，作為日常工作使用的菌種。菌種的代是指將其接種至一新鮮培養(yǎng)基上或培養(yǎng)基內(nèi)，每萌發(fā)一次即稱為一代，從菌

3、種保藏中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代。6.6.標準：標準：用無菌接種環(huán)輕輕刮取經(jīng)冷凍復溶增菌后并接種至平板或瓊脂斜面的菌苔，并通過接種環(huán)與試管壁之間的輕輕摩擦而使細菌充分擴散到預先裝入試管中的無菌純化水中，調整菌液濃度，使其等同于10號比濁管，向已制備好的菌懸液中加入等體積的無菌甘油（濃度20%），即為10%甘油菌懸液，輕輕振搖，使內(nèi)容物充分混合，分裝于無菌小試管，在30℃冷凍條件下保存。此甘油冷凍管為第2代（G2）?？梢悦扛?年轉種一

4、代。使用時，取出一支放至室溫，轉種增菌培養(yǎng)或接種至瓊脂斜面復蘇，挑取純菌落傳代或工作用。此種方法主要適用于需氧細菌和酵母菌的保藏（如大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門菌）。6.3.2.2液體石蠟保存法6.3.2.2.1無菌液體石蠟的制備：選用優(yōu)質化學純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，在121℃滅菌30分鐘置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。6.3.2.2.2液體石蠟管的制備：將菌種穿刺接種于半固體高層培養(yǎng)基中