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1、公司整理高效液相知識手冊公司整理高效液相知識手冊技術(shù)部技術(shù)部HPLC六通閥進(jìn)樣器的使用及保養(yǎng)....................................................................................................48第一部分第一部分理論知識理論知識I概論一、液相色譜理論發(fā)展簡況一、液相色譜理論發(fā)展簡況色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobilephase)中
2、的各組分經(jīng)過固定相時(shí),由于與固定相(stationaryphase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由俄國植物學(xué)家茨維特(Tswett)在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的,色譜法(Chromatography)因之得名。后來在此基礎(chǔ)上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。液相色譜法開始階段是用大直徑的玻
3、璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(常有幾個(gè)小時(shí))。高效液相色譜法(HighperfmanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromat
4、ography,HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChromatography,HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。二、二、HPLC的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)HPLC有以下特點(diǎn):高壓——壓力可達(dá)150~300Kgcm2。色譜柱每米降壓為75Kgcm2以上。高速——流速為0.1~10.0mlmin。高效——可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01
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