第八章 合子胚培養(yǎng)

1、1第八章第八章合子胚培養(yǎng)合子胚培養(yǎng)1合子胚培養(yǎng)的概念合子胚培養(yǎng)的概念1.11.1植物胚胎培養(yǎng)的概念植物胚胎培養(yǎng)的概念植物胚胎培養(yǎng)是指對(duì)植物的胚、子房、胚珠和胚乳進(jìn)行離體培植物胚胎培養(yǎng)是指對(duì)植物的胚、子房、胚珠和胚乳進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其發(fā)育成完整植株的技術(shù)。養(yǎng)，使其發(fā)育成完整植株的技術(shù)。目前，胚胎培養(yǎng)除了應(yīng)用于育種工作外，還廣泛被用來(lái)研究胚胎發(fā)生過(guò)程中的生理代謝變化以及有關(guān)影響胚發(fā)育的內(nèi)外因素等問(wèn)題。并且，在離體胚培養(yǎng)成功的基礎(chǔ)上，又進(jìn)行了

2、胚乳、胚珠和子房的培養(yǎng)，特別是未受精胚珠或子房培養(yǎng)，為進(jìn)行離體授粉(或試管受精)的研究提供了重要的技術(shù)條件。試管受精技術(shù)使克服遠(yuǎn)緣雜交中花粉與柱頭之間的不親和性成為可能。1.21.2合子胚培養(yǎng)的概念合子胚培養(yǎng)的概念合子胚培養(yǎng)是指在無(wú)菌條件下分離和培養(yǎng)有性胚，以期獲得可合子胚培養(yǎng)是指在無(wú)菌條件下分離和培養(yǎng)有性胚，以期獲得可育植株的一種技術(shù)。育植株的一種技術(shù)。1904年，Hannig最早在無(wú)菌條件下進(jìn)行了離體胚培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，他當(dāng)時(shí)所培養(yǎng)的是兩種

3、十字花科植物—辣根菜和蘿卜的成熟胚。在含無(wú)機(jī)鹽和蔗糖的半固體培養(yǎng)基上，Hannig成功將胚培育成可移栽的幼苗。隨后，許多研究者從一些植物的成熟種子，特別是從敗育導(dǎo)致種子不能萌發(fā)的植物中分離種胚，通過(guò)離體培養(yǎng)獲得植株。依靠合子胚培養(yǎng)技術(shù)，現(xiàn)在已經(jīng)能夠挽救早熟敗育的雜志胚了。2胚培養(yǎng)的類型胚培養(yǎng)的類型離體胚培養(yǎng)可分為幼胚（未成熟胚）培養(yǎng)幼胚（未成熟胚）培養(yǎng)和成熟胚培成熟胚培養(yǎng)。離體3一樣。如果是一般的實(shí)驗(yàn)或示范，最好是先用一種胚易于剝離的植

4、物如大粒種子的豆科和十字花科植物；如希望培養(yǎng)材料的胚發(fā)育時(shí)期具有一致性，應(yīng)選擇開(kāi)花和結(jié)實(shí)習(xí)性有規(guī)律的植物，如薺菜具有總狀花序，各個(gè)胚珠處于不同的發(fā)育時(shí)期，一般沿花序軸由上而下，胚齡逐漸增加。每個(gè)蒴果含20～25個(gè)胚珠，且基本處于同一發(fā)育時(shí)期；如希望培養(yǎng)某一發(fā)育時(shí)期的胚，則須對(duì)剛開(kāi)放的花進(jìn)行人工授粉，并了解該植物授粉后的天數(shù)與胚胎發(fā)育的相應(yīng)關(guān)系；如培養(yǎng)遠(yuǎn)緣雜種胚，則必須在其夭折前進(jìn)行。取回大田或溫室里授粉受精后的植物子房，用70％的酒精進(jìn)

5、行幾秒表面消毒，再用0.1％氯化汞滅菌1030min，用無(wú)菌水沖洗3～4次，即可用于胚的分離和培養(yǎng)。3.23.2胚的分離及培養(yǎng)胚的分離及培養(yǎng)3.2.13.2.1胚的分離胚的分離一般來(lái)說(shuō)，在進(jìn)行胚的離體培養(yǎng)時(shí)，必須把胚從周圍的組織中剝離出來(lái)。成熟胚只須剖開(kāi)種子即可剝離，比較容易。但有些種子種皮很硬，須先在水中浸泡之后才能剖開(kāi)。在剝?nèi)”容^小的胚的時(shí)候則須借助解剖鏡，并且在剝離出來(lái)后，要立即轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中。對(duì)于幼胚的剝離，是把滅菌后的材料在無(wú)菌