基因工程原理練習(xí)題及其答案

1、基因工程原理練習(xí)題及其答案基因工程原理練習(xí)題及其答案一、填空題1基因工程是_________年代發(fā)展起來的遺傳學(xué)的一個分支學(xué)科。2基因工程的兩個基本特點(diǎn)是：(1)____________，(2)___________。3基因克隆中三個基本要點(diǎn)是：___________；_________和__________。4通過比較用不同組合的限制性內(nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構(gòu)建顯示該區(qū)域各限制性內(nèi)切核酸酶切點(diǎn)相互位

2、置的___________。5限制性內(nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結(jié)合的原則命名的，第一個大寫字母取自_______，第二、三兩個字母取自_________，第四個字母則用___________表示。6部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________(3)___________等。7第一個分離的限制性內(nèi)切核酸酶是___________；而第一個用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是_____________。8

3、限制性內(nèi)切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的來源不同，但識別的序列都是_________，它們屬于_____________。9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段，具有兩種酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。10為了防止DNA的自身環(huán)化，可用_____________去雙鏈DNA__________________

4、。11EGTA是____________離子螯合劑。12測序酶是修飾了的T7DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而沒有_______酶的活性。13切口移位(nicktranslation)法標(biāo)記DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。14欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈DNA分子轉(zhuǎn)變成平末端的雙鏈形式，通常可采用_________或_______________。15反轉(zhuǎn)錄酶除了

5、催化DNA的合成外，還具有____________的作用，可以將DNARNA雜種雙鏈中的___________水解掉。16基因工程中有3種主要類型的載體：_______________、_____________、______________。17就克隆一個基因(DNA片段)來說，最簡單的質(zhì)粒載體也必需包括三個部分：_______________、_____________、______________。另外，一個理想的質(zhì)粒載體必須具有

6、低分子量。18一個帶有質(zhì)粒的細(xì)菌在有EB的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，一部分細(xì)胞中已測不出質(zhì)粒，這種現(xiàn)象叫。19pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，它的復(fù)制子來源于，它的四環(huán)素抗性基因來自于，它的氨芐青霉素抗性基因來自于。20YAC的最大容載能力是，BAC載體的最大容載能力是。21pSCl01是一種復(fù)制的質(zhì)粒。22pUCl8質(zhì)粒是目前使用較為廣泛的載體。pUC系列的載體是通過和兩種質(zhì)粒改造而來。它的復(fù)制子來自，Amp抗性基因則是來自。23噬菌體

7、之所以被選為基因工程載體，主要有兩方面的原因：一是；二是。24野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是和。25黏粒(cos)是質(zhì)?！删w雜合載體，它的復(fù)制子來自、COS位點(diǎn)序列來自，最大的克隆片段達(dá)到kb。26野生型的?噬菌體DNA不宜作為基因工程載體，原因是：(1)(2)(3)。27噬菌粒是由質(zhì)粒和噬菌體DNA共同構(gòu)成的，其中來自質(zhì)粒的主要結(jié)構(gòu)是52根據(jù)外源片段提供的遺傳表型篩選重組體，必需考慮三種因素：(1)_______

8、________(2)________________________(3)______________________。53Nthern印跡和Southern印跡有兩點(diǎn)根本的區(qū)別：(1)_______________________________________________________________________(2)____________________________________________________

9、___________________。54放射免疫篩選的原理基于以下三點(diǎn)：(1)__________________________________(2)___________________________(3)__________________________________。答案1702(1)分子水平上的操作；(2)細(xì)胞水平上的表達(dá)3克隆基因的類型；受體的選擇；載體的選擇4限制性酶切圖譜5屬名的第一個字母；種名的前兩個字母；株

10、名6(1)減少酶量；(2)縮短反應(yīng)時間；(3)增大反應(yīng)體積7EcoK；Ecl8GGCC；異源同工酶9枯草桿菌蛋白酶；(1)53合成酶的活性；(2)35外切核酸酶10堿性磷酸酶；5’端的磷酸基團(tuán)11Ca21253合成；35外切13DNA聚合酶I：5一3外切核酸酶；5一3合成酶14S1核酸酶切割；DNA聚合酶補(bǔ)平15核酸水解酶H；RNA16質(zhì)粒DNA；病毒DNA；質(zhì)粒和病毒DNA雜合體17復(fù)制區(qū)：含有復(fù)制起點(diǎn)；選擇標(biāo)記：主要是抗性基因；克隆

11、位點(diǎn)：便于外源DNA的插入18質(zhì)粒消除(或治愈)19，pMBl；pSCl01；pSF2124(R質(zhì)粒)201000kb；300kb21.嚴(yán)緊22pBR322和M13；pMBl；轉(zhuǎn)座子23它在細(xì)菌中能夠大量繁殖，這樣有利于外源DNA的擴(kuò)增；對某些噬菌體(如?噬菌)的遺傳結(jié)構(gòu)和功能研究得比較清楚，其大腸桿菌宿主系統(tǒng)的遺傳也研究得比較詳盡24沒有合適的限制性內(nèi)切核酸酶識別位點(diǎn)；選擇標(biāo)記25質(zhì)粒；?噬菌體；4526(1)分子量大，(2)酶的多切

12、點(diǎn)，(3)無選擇標(biāo)記27復(fù)制區(qū)；IG區(qū)2875％～105％29螯合Mg2離子，抑制核酸酶的活性30中和DNA分子的負(fù)電荷，增加DNA分子間的凝聚力31(1)合成探針；(2)合成cDNA；(3)用于PCR反應(yīng)；(4)進(jìn)行序列分析32T—載體33第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)?34乙醇使DNA分子脫水35(1)保持正確的可讀框(2)能夠使其轉(zhuǎn)錄的啟動子(3)具有翻譯的起始和終止信號36接受外源DNA的生理狀態(tài)37(1)黏性末端連接；(2)平末端連