基因工程復習題答案版

1、1基因工程原理復習題思考題基因工程原理復習題思考題考試時間：考試時間：2009.06.21上午上午9：0011：00地點地點5D305基因工程緒論基因工程緒論1、基因工程的定義與特征。、基因工程的定義與特征。定義：在體外把核酸分子（DNA的分離、合成）插入載體分子，構(gòu)成遺傳物質(zhì)的新組合（重組DNA），引入原先沒有這類分子的受體細胞內(nèi)，穩(wěn)定地復制表達繁殖，培育符合人們需要的新品種（品系），生產(chǎn)人類急需的藥品、食品、工業(yè)品等。特征：1、具跨

2、越天然物種屏障的能力。2、強調(diào)了確定的DNA片段在新寄主細胞中的擴增。2、試述基因工程的主要研究內(nèi)容。、試述基因工程的主要研究內(nèi)容。1）、目的基因的分離2）、DNA的體外重組（載體、受體系統(tǒng)等）3）、重組DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細胞及其篩選4）、基因在受體細胞內(nèi)的擴增、表達、檢測及其分析。3、基因工程在食品工業(yè)上有何應用發(fā)展？、基因工程在食品工業(yè)上有何應用發(fā)展？主要是通過基因重組，使各種轉(zhuǎn)基因生物提高生產(chǎn)谷氨酸、調(diào)味劑、酒類和油類等有機物的

3、產(chǎn)率；或者改良這些有機物組成成分，提高利用價值。4、轉(zhuǎn)基因是一把雙刃劍，請客觀談談對轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品安全性的認識。、轉(zhuǎn)基因是一把雙刃劍，請客觀談談對轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品安全性的認識。轉(zhuǎn)基因技術(shù)所帶來的好處是顯而易見的，在人類歷史進步和發(fā)展中起到了積極作用。首先，通過該項技術(shù)可以提供人們所需要的特性，改良培育新品種；第二，延長食品保存時間或增加營養(yǎng)成分；第三，將抗蟲防菌基因轉(zhuǎn)入到作物中，使作物本身產(chǎn)生抵抗病蟲害侵襲的能力，減少了農(nóng)藥的使用

4、量，有利于環(huán)境保護；第四，轉(zhuǎn)基因技術(shù)及基因食物在醫(yī)學方面得到廣泛研究和應用。人們對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的主要擔憂在于環(huán)境方面。外源基因的導入可能會造就某種強勢生物，產(chǎn)生新物種或超級雜草、損害非目標生物、破壞原有生物種群的動態(tài)平衡和生物多樣性，也即轉(zhuǎn)基因生物存在潛在的環(huán)境安全問題。轉(zhuǎn)基因作物的大面積種植已有數(shù)年，食用轉(zhuǎn)基因食品的人群至少有10億之多，但至今仍未有轉(zhuǎn)基因食品對生命造成危害的實例；更何況目前每一種基因工程食品在上市前，都要經(jīng)過國家法律認

5、可，食品衛(wèi)生部門和環(huán)境部門的嚴格檢測。只有測試合格了，才能投放市場。因此公眾完全可以安全地消費、大膽地食用轉(zhuǎn)基因食品。第一章第一章DNA的分子特性與利用的分子特性與利用1、原核生物和真核生物的基因表達調(diào)控有何差別？原核生物和真核生物的基因表達調(diào)控有何差別？1）原核基因表達調(diào)控的三個水平：轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控、翻譯水平調(diào)控、蛋白質(zhì)加工水平的調(diào)控原核基因表達調(diào)控主要是在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控。2）真核生物基因表達的特點：?1基因組DNA存在的形式與原核生

6、物不同；?2真核生物中轉(zhuǎn)錄和翻譯分開進行；?3基因表達具有細胞特異性或組織特異性；?4真核基因表達的調(diào)控在多個水平上進行：DNA水平的調(diào)控、轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控、翻譯水平調(diào)控、蛋白質(zhì)加工水平的調(diào)控；33.PCR的原理和主要反應過程，并分析影響的原理和主要反應過程，并分析影響PCR擴增的影響因素。擴增的影響因素。PCR原理：變性溫度下，DNA雙鏈變性雙螺旋解開成單鏈DNA，在退火溫度中人工合成的特異引物根據(jù)堿基互補配對原則與單鏈D

7、NA特異結(jié)合，然后在DNA聚合酶的作用下，在延伸溫度下不同的脫氧核苷酸按照堿基互補配對原則在引物的引導下合成與模板DNA互補的新鏈，實現(xiàn)DNA的擴增。影響PCR擴增的影響因素：(1)Taq酶：常用1U25L?濃度低，擴增產(chǎn)物不夠；?濃度高，非特異性擴增增加；?酶的活性；(2)dNTP的濃度：常用100200molL，不能低于20molL，特異性、保真性；(3)模板：主要考慮純度及使用量，對純度要求不高，但含有酚、氯仿等雜質(zhì)則難以成功。使

8、用量從幾個ng到100ng.(4)引物濃度：0.10.5molL之間，過多則非特異擴增增加，形成引物二聚體；(5)Mg2濃度：常用0.52.5mmolL；影響：酶的活性、引物模板退火、特異性(6)PCR反應程序設(shè)定：變性溫度和時間、引物退火溫度Tm與時間、引物延伸溫度與時間和循環(huán)數(shù)4.PCR引物設(shè)計的原則，若給一指定引物設(shè)計的原則，若給一指定DNA序列并需要通過序列并需要通過PCR擴增此序列，如何設(shè)計擴增此序列，如何設(shè)計擴增引物？（關(guān)于

9、如何設(shè)計這個問題，靠自己了）擴增引物？（關(guān)于如何設(shè)計這個問題，靠自己了）引物設(shè)計原則：1、GC含量4555%；2、Tm值高于55；3、引物特異性；4、引物擴增跨度；5、是否形成引物二聚體5.定量定量PCR的原理？的原理？Ct值的含義。值的含義。原理：通過實時檢測PCR每一個循環(huán)擴增產(chǎn)物相對應的熒光信號，來實現(xiàn)對起始模板進行定量及定性的分析。初始模板量X0的對數(shù)值與C(T)值之間呈線性關(guān)系：logX0=log(1Ex)CtlogNCt值的